Ki67与MMP-9在胃腺癌中表达的意义①

吕 鑫，何其勇，王亚洲，陈玉强

(佳木斯大学附属第一医院普外一科，黑龙江 佳木斯 154003)



Ki67与MMP-9在胃腺癌中表达的意义①

吕 鑫，何其勇，王亚洲，陈玉强

(佳木斯大学附属第一医院普外一科，黑龙江 佳木斯 154003)

目的：探讨胃腺癌中基质金属蛋白酶MMP-9与Ki67表达的相关性及其临床意义。方法：采用S-P免疫组化染色法，通过检测100例胃腺癌组织中Ki67及MMP-9的表达情况，分析其表达水平与年龄、肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期、分化程度的相关性。结果：100例胃腺癌中Ki67高表达为53例(53%)，而MMP-9高表达46例(46%)。且对于其肿瘤病灶直径大小，不同年龄段之间，Ki67和MMP-9的表达差异无统计学意义，而淋巴结有转移的患者，TNM分期级别高的患者、病理分化程度低的患者其Ki67和MMP-9的表达高于无淋巴结转移的患者、TNM分期低的患者和病理分化高的患者(P<0.05)。Ki67和MMP-9的表达存在正相关(P<0.05，rs=0.405)。结论：Ki67和MMP-9表达在胃腺癌的侵袭中起协同作用。

胃腺癌；基质金属蛋白酶9；Ki-67抗原；免疫组织化学

胃癌是消化道最常见的恶性肿瘤,病死率高。研究[1]表明,胃癌的生物学行为与某些分子指标有关。其中胃腺癌占胃癌中的绝大部分，死亡率也很高。在中国随着近些年来人民饮食水平及社会生活习惯的提高，胃癌的发病率也随之逐渐升高。MMP-9属于基质金属蛋白酶家族(MMPs)，其可以降解肿瘤微环境的胶原组织，增强肿瘤的侵袭能力[2]。Ki67是与细胞增生有关的标志物，Ki67在细胞周期在G0期缺失。在G1、S和G2期可以达到高峰，其指标高表达在许多肿瘤中[3]。本研究探讨胃腺癌中MMP-9与Ki67表达的相关性及其临床意义。

1 资料和方法

1.1 一般资料

选择我院普外科2013～2014年期间收治的胃癌患者100例。其全部接受手术治疗，术前均未接受放，化疗。标本均由病理科确定病理诊断为胃腺癌组织。按胃癌的国际临床分期标准进行划分。试剂及引物采用免疫组化S-P法染色，鼠抗人Ki67单克隆抗体，鼠抗人MMP-9单克隆抗体。DAB显色试剂及免疫组化S-P法试剂盒。所有标本均福尔马林液固定，石蜡包埋，常规切片，片厚约4μm。用ABC方法。结果判定用半定量积分法。

染色判定标准：根据阳性细胞百分比分5级：0分：无染色；1分：染色细胞1%～24%；2分：25%～49%；3分：50%～74%；4分：染色≥75%。根据染色强度分4级：3分深棕色，2分棕黄色，1分浅黄色，0分不着色。每份切片分数为染色细胞数分数+染色强度分数。所得总分数如小于5分为低表达，反之为高表达。

1.2 统计学方法

采用SPSS11.5统计软件包，采用χ2，秩和检验，等级相关分析等统计学方法。各统计学检验均以P<0.05为有统计学差异。

2 结果

2.1 胃腺癌组织中Ki67定位于细胞核，MMP-9则定位于细胞浆。不同年龄间MMP-9和Ki67的表达差异无统计学意义。见表1。

表1 MMP-9及Ki67在胃腺癌中高表达情况

2.2 胃腺癌Ki67和MMP-9的表达存在正相关(P<0.05，rs=0.405)

表2MMP-9及Ki67蛋白在胃腺癌组织中表达的相关性

Ki67阳性阴性合计PMMP-9阳性38846MMP-9阴性153954<0.05合计5347100

3 讨论

本研究通过运用S-P免疫组化方法,证实Ki67及MMP-9在胃腺癌组织中表达均较高，100例胃腺癌中Ki67高表达53例，而MMP-9高表达46例并且这两种蛋白的表达呈正相关。两者蛋白的表达强度与淋巴结转移、TNM分期及肿瘤分化程度均有着相关联系。基质金属蛋白酶家族属于蛋白水解酶，是锌离子依赖性的内肽酶可以降解细胞外基质的成分。研究发现其在恶性肿瘤周围侵袭及远处转移中有着重要作用。基质金属蛋白酶家族由11个成员组成，根据其结构和底物特异性分成：基质降解酶、胶原酶、白明胶酶和其他酶。MMP-9又称为明胶酶B是基质金属蛋白酶家族中分子量最大的酶。以酶原形式分泌，被激活后转化成Ⅳ型胶原酶，Ⅳ型胶原酶可以破坏距离肿瘤表面近Ⅳ型和Ⅴ型胶原及明胶，使得肿瘤细胞容易向周围浸润，侵袭和远处转移。MMP-9还可以通过新生血管生成和毛细血管内生，使肿瘤细胞向周围浸润及远处转移[4]。MMP-9在胃癌组织中的高表达随着胃癌的分化程度,淋巴结转移以及局部浸润深度之间存在密切的联系[5]。Ki67普遍表达于增生期细胞，在静止细胞中表达缺失，其是一种细胞核非组蛋白，Ki67是一种与细胞增生有关的标志物，Ki67对细胞分裂的确切功能还不十分清楚，其在细胞周期在G0期缺失。在G1、S和G2期可以达到高峰，其指标高表达在许多肿瘤中[3]。Ki-67的表达与胃癌患者的淋巴结转移显著相关[6]。Laird等[7]科学家研究发现：在肾癌细胞中Ki67明显低于肾癌肝转移中肝脏癌灶其指标值的表达，证明了Ki67与肿瘤转移有重要关联。本研究结果显示，MMP-9与Ki67表达在胃腺癌的侵袭中起协同作用。对未来的胃腺癌的分子生物学研究领域提供了帮助。

[1]SvenssonA,BackmanU，FachD,etal.Angiogenesiscanbereducedwithoutsignificantreductionoftumorgrowth[J].AnticancerRes, 2007,27(6B):3883

[2]ZhangC,LiC,ZhuM,etal.Meta-analysisofmmp2,mmp3,andmmp9promoterpolymorphismsandheadandneckcancerrisk[J].PLoSOne, 2013,8(4):e62023

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[5]胡明，刘振平，黄世杰，等.MMP-9在胃癌中的表达及与临床病理因素的关系[J].黑龙江医药科学 2013,36(5)：18-19

[6]王彩霞,王晓,吴庆田，等.MMP-26和Ki67在胃癌组织中的表达及临床意义[J].黑龙江医药科学，2012, 35(4)：83-84

[7]LairdA,O'MahonyFC,NandaJ,etal.Differentialexpressionofprognosticproteomicmarkersinprimarytumour,venoustumourthrombusandmetastaticrenalcellcancertissueandcorrelationwithpatientoutcome[J].PLoSOne, 2013,8(4):60483

The Significiance of Ki67 and MMP-9 expressions in gastric adenocarcinoma

LÜXin，HEQing-yong，WANGYa-zhou,CHENYu-qiang

(Department of General surgery, the First Affiliated Hospital, Jiamusi University, Jiamusi 154003, China)

Objective: To explore the correlation between the expressions of matrix metalloproteinase MMP-9 and Ki67 in gastric carcinoma and its clinical significance. Methods: S-P immunohistochemical staining method was adopted to detect the expressions of Ki67 and MMP-9 in 100 cases of gastric carcinoma so as to analyse the correlation among expression, age, tumor size, lymph node metastasis, TNM staging, and differentiation. Results: In 100 cases of gastric adenocarcinoma, 53 cases were highly expressed in Ki67 reaching 53% of the total. 46 case were highly expressed in MMP-9 reaching 46% of the total. For the tumor diameter, there were no significant differences in the expressions of Ki67 and MMP-9 between different age. For patients with lymph node metastasis, high level TNM stage, low pathological differentiation, their expressions of Ki67 and MMP-9 were higher than those with no lymph node metastasis, low level TNM staging, and high pathologic differentiation(P<0.05).ThereexistedpositivecorrelationshipbetweentheexpressionsofKi67andMMP-9(P<0.05,rs=0.405). Conclusion: The expressions of Ki67 and MMP-9 play a synergistic role in the gastric cancer invasion.

gastric adenocarcinoma； matrix metalloproteinase-9; Ki-67 antigen; immunohistochemistry

吕鑫(1985～)男，黑龙江佳木斯人，硕士，住院医师。

何其勇(1966～)男，黑龙江佳木斯人，主任医师，教授，硕士研究生导师。E-mail：HQY3377@126.com。

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1008-0104(2015)03-0084-02

2014-11-26)