脂肪乳输注对血红蛋白测定的影响研究*

黄 浩，黄玲莎，朱 波，梁艺华，任宁毅，徐 茜

(广西医科大学附属肿瘤医院检验科，南宁 530021)



·论 著·

脂肪乳输注对血红蛋白测定的影响研究*

黄 浩，黄玲莎△，朱 波，梁艺华，任宁毅，徐 茜

(广西医科大学附属肿瘤医院检验科，南宁 530021)

目的 探讨脂肪乳输注对血红蛋白(Hb)及相关指标检测结果的影响。方法 选取10例输注脂肪乳的自愿者，于脂肪乳输注后1、2、4、8、12 h采集静脉血2 mL，离心后检测血浆三酰甘油(TG)及Hb水平，并将不同时间点的血浆标本混合制备5份混合乳糜血浆。选择1例O型血健康自愿者，采集静脉血6 mL，离心后吸去血浆，制备健康浓缩红细胞(RBC)，在200 μL各时间点混合乳糜血浆中分别加入200 μL浓缩RBC，以200 μL生理盐水加入200 μL健康浓缩红细胞为对照。选择1例O型血小细胞低色素贫血自愿者，采集静脉血6 mL，离心后吸去血浆，制备小细胞低色素浓缩RBC，将100 μL浓缩红细胞加入100、200、300、400 μL TG浓度为15.23 mmol/L的乳糜血浆中，以100 μL浓缩红细胞加入等体积生理盐水为对照。采用迈瑞公司BC-6800型血细胞分析仪对各试验管进行Hb及相关指标检测，每管测2次，计算均值。结果 输注脂肪乳后自愿者血浆TG水平迅速升高，最高可达25.89 mmol/L，乳糜血浆直接测定Hb水平最高可达19 g/L。各时间点乳糜血浆对健康浓缩RBC和小细胞低色素浓缩RBC中的RBC、红细胞比容(HCT)、平均红细胞体积(MCV)检测结果影响不大，对Hb、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)造成假性增高，输注后4 h内影响程度尤为明显；贫血越严重，Hb、MCH、MCHC受影响程度越大。脂肪乳输注12 h后，血浆对Hb及相关指标检测结果影响较小。结论 输注脂肪乳后4 h内尽量避免检测Hb及MCH、MCHC，特别是严重贫血的患者，输脂肪乳后12 h的检测结果则相对可靠。

脂肪乳； 血红蛋白； 血细胞分析

血红蛋白(Hb)测定方法包括比色法、全血铁法、比重法、折射仪法等，血细胞分析仪通常采用比色法。采用比色法进行Hb检测时，引起比色液混浊的因素均可能对检测结果造成影响，其中乳糜血是最常见的影响因素之一[1-2]。然而，关于静脉输注脂肪乳所致乳糜血的脂浊程度、脂浊持续时间及其对Hb测定的影响程度和影响时间国内外尚无明确报道。本研究探讨了输注脂肪乳所致乳糜血对外周血常规检测的影响，现将研究结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 标本采集与制备 选择10例接受脂肪乳静脉滴注治疗的自愿者，采用乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝管，在脂肪乳输注后1、2、4、8、12 h分别采集静脉血2 mL，常规离心后分离血浆，采用日立公司7600型生化分析仪及其配套试剂检测血浆三酰甘油(TG)，采用迈瑞公司BC-6800型血细胞分析仪及其配套试剂检测血浆Hb；分别吸取各时段血浆标本500 μL，混合后制备成混合血浆。另选择1例O型血健康自愿者，采用3支EDTA-K2抗凝管，分别采集2 mL静脉血，常规离心后吸去血浆，混合后制备成健康浓缩红细胞(RBC)。另选择1例O型血小细胞低色素贫血患者，相同方法采集6 mL静脉血，常规离心后吸去血浆，混合后制备成小细胞低色素浓缩RBC。

1.2 方法

1.2.1 试验一 于200 μL各时间点混合乳糜血浆中分别加入200 μL健康浓缩RBC，以200 μL生理盐水加入200 μL健康浓缩RBC为对照。采用同一台BC-6800型血细胞分析仪对各标本进行血常规检测指标的测定。每份标本各检测2次，计算均值。每次标本检测的同时进行高、中、低值质控品检测，检测结果均在控制范围内。

1.2.2 试验二 于100、200、300、400 μL脂肪乳滴注后1 h混合乳糜血浆中分别加入100 μL小细胞低色素浓缩RBC，以100、200、300、400 μL生理盐水中分别加入100 μL小细胞低色素浓缩RBC为对照。采用同一台BC-6800型血细胞分析仪对各标本进行血常规检测指标的测定。每份标本各检测2次，计算均值。每次标本检测的同时进行高、中、低值质控品检测，检测结果均在控制范围内。

1.2.3 数据计算 试验管检测结果增幅=(试验管检测结果-对照管检测结果)/对照管检测结果×100%，以此公式计算试验管RBC、Hb、红细胞比容(HCT)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)的变化程度，以百分数为单位。

2 结 果

2.1 血浆TG及Hb检测结果 10例脂肪乳输注患者，脂肪乳输注后1 h血浆TG检测结果为10.21～25.89 mmol/L，平均15.42 mmol/L，血浆Hb检测结果为9～19 g/L，平均16 g/L。脂肪乳输注12 h后，血浆TG检测结果为2.42～6.02 mmol/L，平均3.92 mmol/L，血浆Hb检测结果为1～5 g/L，平均3 g/L。

图1 不同时间点混合血浆对健康浓缩RBC检测结果的影响

2.2 不同类型混合标本检测结果 (1)与对照管相比，200 μL健康浓缩RBC、200 μL不同时间点乳糜血浆混合标本，RBC、MCV、HCT检测结果没有明显变化，Hb增幅则分别为9.24%、8.56%、7.88%、4.20%、2.52%，MCH、MCHC检测结果也相应升高，见图1。(2)与对照管相比，100 μL小细胞低色素浓缩RBC与不同体积、TG浓度为15.23 mmol/L的1 h乳糜血浆混合标本，RBC、MCV、HCT检测结果没有明显变化，Hb增幅分别为11.24%、29.14%、41.46%、68.96%，MCH、MCHC也相应升高，见图2。(3)试验二第1～4组样本中，对照样本的Hb浓度分别为89、58、41、29 g/L，实验样本的Hb浓度分别为99、87、57、49 g/L，实验样本比对照样本Hb浓度增幅分别为11.24%、29.14%、41.46%、68.96%。

图2 不同体积混合血浆对小细胞低色素浓缩

3 讨 论

对直接加入脂肪乳人工制备的乳糜血标本进行外周血常规检测时，仪器可提示标本存在混悬、RBC抗溶等现象，但笔者在实际工作中发现，乳糜血标本极少出现上述提示，可见直接加入脂肪乳并不能完全模拟经过人体代谢后的乳糜血。而且，脂肪代谢能力受个体性别、年龄等因素的影响较大。本研究纳入的10例输注脂肪乳的自愿者脂肪乳输注后1 h血浆TG最高值和最低值相差2.5倍，故本次试验将采集自10例不同年龄、不同性别自愿者的血浆等量混合后制备为混合乳糜血浆，并在同一试验中采用相同的浓缩RBC，既部分消除了脂肪代谢的个体差异，又保证了试验条件的稳定性和一致性。

本研究结果图1、图2均显示混合乳糜血浆对健康浓缩RBC和小细胞低色素浓缩RBC的RBC、HCT、MCV检测结果没有明显影响，对Hb、MCH、MCHC则存在明显影响。迈瑞BC-6800型血细胞分析仪以电阻抗法直接检测RBC，以脉冲信号的大小反映MCV，HCT由RBC与MCV检测结果的乘积计算获得，这可能是RBC、HCT、MCV检测结果没有受到明显影响的主要原因。Hb检测原理是亚铁血红素中Fe2+被十二烷基磺酸钠(SDS)氧化，形成SDS-Hb衍生物，以538 nm波长进行比色法测定。由于乳糜血浆存在不同程度的混浊，导致吸光度增高，从而使Hb检测结果假性增高。MCH、MCHM均以Hb检测结果为基础计算获得，因此Hb假性增高引起MCH、MCHC假性增高。有文献报道，乳糜血浆几乎干扰各种类型血细胞分析仪对Hb、MCH、MCHC的测定[3-5]，迈瑞BC-6800型血细胞分析仪也不例外。

Hb是外周血常规检测的重要指标，MHC、MCHC则是用于判断贫血类型的重要依据。本研究结果显示，1、2、4 h混合血浆对健康浓缩RBC中Hb、MCH、MCHC检测结果影响较大，平均增幅超过8%，可见脂肪乳输注后4 h内，外周血中的TG维持较高水平，符合脂肪代谢特点。12 h混合血浆导致Hb检测结果上升2.52%，接近Hb检测允许偏差(±2%)的行业标准[6]。因此，为避免脂肪乳输注对Hb、MCH、MCHC检测结果的影响，应尽量避免脂肪乳输注后12 h内进行Hb检测。本研究结果图2显示，采用不同体积的1 h乳糜血浆对100 μL小细胞低色素贫血自愿者的浓缩RBC进行稀释，随着稀释倍数的增加，Hb、MCH、MCHC检测结果受影响的程度逐渐增大，原因可能是随着血浆与RBC的比例增大单位浓度的乳糜成分对Hb检测结果造成的影响增大，MCH、MCHC检测结果也假性增高。结果显示，贫血程度越严重，Hb检测结果受影响程度越大，特别是试验二中模拟极重度贫血患者的第4组样本，对照样本Hb为29 g/L，属于极重度贫血，实验样本Hb为49 g/L，属于重度贫血，如此不真实的结果直接影响医生对危急值的判断，甚至可能因延误处置而危及患者生命。术后禁食者、肿瘤患者、重症监护病房患者是接受脂肪乳输注治疗的主要人群，不仅脂肪乳输注剂量较大，而且输注时间较长。此外，上述患者容易因手术出血或长期营养不良导致贫血，甚至重度贫血。此时检测Hb对出血量、贫血程度、输血治疗效果的评估尤为重要。因此，输注脂肪乳导致的Hb检测结果假性增高不容忽视。

临床工作中如何判断用于外周血常规检测的标本存在乳糜现象较为困难。有研究者认为，可以根据RBC与Hb检测结果比值异常(正常情况下为1∶30)或MCH、MCHC异常升高判断标本存在乳糜现象[7]。然而，这种判断方法仅可应用于正色素细胞标本，而且一旦疏于计算也是难以发现的；对于小细胞低色素贫血患者的标本则更难以发现。此外，不同品牌、型号的血细胞分析仪对乳糜血的报警方式有所不同，多数提示为“有混悬/抗溶红细胞”或“乳糜/Hb干扰”[3-5]，有的甚至出现白细胞不分类，并提示堵孔报警的情况[6]。迈瑞BC-6800型血细胞分析仪在MCHC达到389 g/L时，没有“混浊/Hb干扰”报警，在MCHC达到390g/L时，才有“混浊/Hb干扰”报警，可见MCHC 390 g/L可能是“混浊/Hb干扰”报警的触发点之一。如果以此临界值为触发点，正色素细胞MCHC增幅达到15%时可能被发现，但小细胞低色素MCHC则需要增幅超过40%才可能被发现，因此多数乳糜血标本的假阴性结果未被发现。为便于及时发现乳糜血标本，对于输注脂肪乳的患者，临床医生应在标本备注中注明输注脂肪乳的时间及抽血时间，以提醒检验人员给予一定的关注。对于乳糜标本的检测结果，目前尚缺乏公认的校正公式，多数时候是采用盐水或鞘液置换法对标本进行处理[3-5]，例如以3 000 r/min离心5 min，吸去上清液后加入同体积的生理盐水或鞘液[6]，再进行Hb、MCH、MCHC检测，并在检验结果报告中备注“脂血标本”。

检验的目的是为临床提供准确、可靠的信息。然而，由于受到方法学的限制，即使高端仪器也不能完全排除特殊标本的干扰。因此，在使用血细胞分析仪时，应在分析前准备时和分析过程中对乳糜血标本进行相应的处理，从而保证结果的准确性。

[1]从玉隆．检验医学高级教程[M]．北京：人民军医出版社，2010：102．

[2]田薇薇，邢桂英，田敏丽，等．乳糜血对血红蛋白测定的影响和去除方法的探讨[J]．国际检验医学杂志，2011，32(6)：708-709．

[3]曾素根，余江，曾婷婷，等．Sysmex公司血液分析仪干扰因素分析判断及处理程序[J]．检验医学，2010，25(3)：244-246．

[4]徐玉兵，高春芳，赵琳．脂血对Sysmex XE-2100D血液分析仪检测指标的影响研究[J]．检验医学，2012，27(12)：1017-1020．

[5]周窈佳．脂血对Sysmex XE-5000血液分析仪检测指标的影响[J]．检验医学与临床，2014，11(2)：206-207．

[6]孙克．BC-6800血细胞分析仪性能评价[J]．国际检验医学杂志，2013，34(12)：1579-1581．

[7]朱如月，柯敏．稀释液置换法在HmX血细胞分析仪脂血检测中的应用[J]．检验医学与临床，2013，10(22)：3000-3003．

Influence of fat emulsion infusion on determination of hemoglobin*

HUANGHao,HUANGLing-sha△,ZHUBo,LIANGYi-hua,RENNing-yi,XUQian

(DepartmentofClinicalLaboratory,AffiliatedCancerHospital,GuangxiMedicalUniversity,Nanning,Guangxi530021,China)

Objective To study the influence of fat emulsion infusion on the detection of hemoglobin (Hb) and related indexes.Methods Ten cases of volunteers receiving fat emulsion infusion were selected and taken 2 mL venous blood,at 1,2,4,8 and 12 h after infusion.Plasma levels of triglyceride (TG) and Hb were detected.Then,plasma samples of the five time points were prepared.One healthy volunteer with blood type of O was selected and taken 6 mL venous blood.Condense red blood cells (RBC) suspension was prepared by removing plasma.Then,200 μL of 1,2,4,8 and 12 h mixed chylous plasma was mixed with 200 μL healthy condense RBC suspension respectively,and 200 μL healthy condense RBC suspension was mixed with 200 μL normal saline to prepared control tube.One volunteer with low pigment anemia and blood type O was selected and taken 6 mL venous blood.Condense low pigment RBC suspension was prepared.Then,100 μL condense low pigment RBC suspension was mixed with 100,200,300 and 400 μL chylous plasma,TG concentration of which was 15.23 mmol/L,and 100 μL condense low pigment RBC suspension was mixed with 100 μL normal saline to prepare control tube.Levels of Hb and related indicators of each tubes were detected by using Mindray BC-6800 analyzer.Every indicator was detected for twice,and average was calculated.Results Plasma levels of TG rapidly increased after fat emulsion infusion,and the peak value was 25.89 mmol/L.The peak plasma levels of Hb was 19 g/L.The influences of chylous plasmas of different time points on levels of RBC,haematocrit (HCT) and mean corpuscular volume (MCV) were not obvious,but the false increase of Hb,mean corpuscular hemoglobin (MCH) and mean corpuscular hemoglobin concentration (MCHC),especially with 4 h after infusion.With the increasing of severity of anemia,the degree of influences on Hb,MCH and MCHC were more obvious.Fat emulsion was with little influence on Hb and related indexes,12 h after infusion.Conclusion Hb,MCH and HCHC should not be detected within 4 h after fat emulsion infusion,especially in volunteer with severe anemia.Results detected 12 h after infusion might be more reliable.

fat emulsion infusion; hemoglobin; haemocyte analysis

广西壮族自治区卫生厅自筹经费科研课题(Z2014587)。

黄浩，女，副主任检验技师，本科，主要从事临床基础检验研究。△

，E-mail:ls_huang@163.com。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.07.008

A

1672-9455(2015)07-0897-03

2014-10-05

2014-12-10)