磺丁基醚－β－环糊精／格列本脲包合物的制备

刘 凯，何 媛

（江苏恒瑞医药股份有限公司，江苏连云港222047）

·制剂研究·

磺丁基醚－β－环糊精／格列本脲包合物的制备

刘 凯，何 媛

（江苏恒瑞医药股份有限公司，江苏连云港222047）

目的制备磺丁基醚－β－环糊精／格列本脲包合物，并对其提高药物溶解性和稳定性的作用进行考察。方法采用相溶解度法测定表观稳定常数，中和法制备磺丁基醚－β－环糊精／格列本脲包合物，并对包合物的溶出度进行了考察。结果与格列本脲原料药相比，磺丁基醚－β－环糊精／格列本脲包合物显著提高了药物的溶解度。结论制备格列本脲的环糊精包合物具有良好的实际应用价值。

格列本脲；磺丁基醚－β－环糊精；包合物；制备方法

格列本脲（GM）是磺酰脲类的第二代口服降血糖药物，其口服吸收快，在临床上主要用于治疗非胰岛素依赖型糖尿病，但因为水溶性差而导致在体内的生物利用度很低［1］，而包合物作为一种新的剂型的出现得到了极大的发展与应用。包合物是将药物作为客体分子包合入环糊精类物质中，可以起到增加溶出度、改善稳定性、提高生物利用度等作用。制备环糊精包合物需要注意环糊精的空腔应该与药物分子的大小吻合，又因为空腔是疏水性的，所以要包裹的物质应该具有疏水性，而所用溶剂则应该是强亲水性的介质以防止溶剂本身形成包合物，此外，各种附加剂如pH调节剂、防腐剂、渗透压调节剂的添加，可以起到稳定包合物的作用［2，3］。而在制备过程中一些外在因素如反应物浓度、反应温度等均会影响包合物的形成［4，5］。磺丁基醚－β－环糊精（SBE－β－CD）是由美国Cydex公司研发的水溶性、阴离子型β－环糊精衍生物，是一种良好的药用辅料［6～10］，可以用作格列本脲的包合物的制备。因此，本文研究了通过磺丁基醚－β－环糊精作为主体分子制备格列本脲的包合物，并进行了溶解性的进一步研究。

1 材料与仪器

1.1 材料 磺丁基醚－β－环糊精（实验室自制，批号：20140712）；格列本脲对照品（中国食品药品检定研究院，批号：100135－201405）；格列本脲原料药（天津津康药业有限公司，批号：20140211）；磷酸盐（广东汕头市陇东化工厂）；其他试剂为色谱纯，水为双重蒸馏水。

1.2 仪器 SPE－KOL 1200紫外分光光度仪（德国Jena分析仪器有限公司）；pHS－3C型精密pH计（上海雷磁精密科学仪器有限公司）；HZQ－C空气浴振荡器（哈尔滨市东明医疗仪器厂）；KQ－100型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；FA－104电子分析天平（上海精密科学仪器有限公司）；AR1140型精密电子天平（沈阳杰龙仪器有限公司）。

2 实验方法

2.1 检测波长的选择 取适量的格列本脲对照品及一定量的磺丁基醚－β－环糊精，用pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液分别配制成澄清溶液，以磷酸盐缓冲液为空白，在200～400 nm范围内使用紫外分光光度计进行扫描。

2.2 标准曲线方程的确定 精密称取格列本脲对照品4.0 mg，置50 mL量瓶中，加pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液稀释至刻度，作为贮备液。分别精密量取贮备液0.5、2.0、4.0、8.0、16.0 mL，置于各个50 mL量瓶中，再加入pH 7.4的磷酸盐缓冲溶液稀释至刻度，摇匀，得到浓度为0.8、3.2、6.4、12.8、25.6 mg·L－1的标准系列溶液，在225 nm下测定吸光度（A），记录结果并得出标准曲线方程。

2.3 表观稳定常数的测定 采用相溶解度法，考察磺丁基醚－β－环糊精对格列本脲的增溶作用。以pH 7.4磷酸盐缓冲液配制浓度分别为0、2、5、10、20、30、40 mmol·L－1的磺丁基醚－β－环糊精系列溶液。取上述溶液分别置于具塞试管中，加入过量的格列本脲固体粉末，密封后置于25℃空气浴恒温震荡器中振摇（100 rpm），振摇3 d使得增溶作用达到平衡，将上清液用0.45μm的微孔滤膜过滤，取滤液用pH 7.4的磷酸盐缓冲液稀释适当的倍数，在225 nm处测定格列本脲的吸光度A，代入所得的标准曲线方程，得到饱和溶液中含有的格列本脲浓度。以格列本脲的浓度（mmol·L－1）为纵坐标，磺丁基醚－β－环糊精的浓度（mmol·L－1）为横坐标作出相溶解度图。磺丁基醚－β－环糊精／格列本脲包合物的表观稳定常数（Kc）根据下面的公式计算：Kc＝斜率／［截距×（1－斜率）］［11］。

2.4 磺丁基醚－β－环糊精／格列本脲包合物的制备 采用中和法［12］制备磺丁基醚－β－环糊精／格列本脲包合物。在室温下将一定量格列本脲分别加入到不同浓度的磺丁基醚－β－环糊精的0.1 mol·L－1的NaOH溶液中（按格列本脲与磺丁基醚－β－环糊精质量比为1∶5、1∶10、1∶15、1∶20、1∶30、1∶40投料），超声使格列本脲完全溶解，再缓慢滴加0.5 mol·L－1HCl，调节溶液的pH至7.0，持续搅拌20 min，使用0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液即得到包合物溶液。包合物溶液再经过冷冻干燥，最终得到磺丁基醚－β－环糊精／格列本脲包合物粉末。

2.5 溶解度的测定 称取过量的格列本脲、磺丁基醚－β－环糊精／格列本脲物理混合物、磺丁基醚－β－环糊精／格列本脲包合物粉末各三份，分别加入到10 mL水溶液中形成过饱和溶液，密封后置于25℃空气浴恒温震荡器中振摇（100 rpm），振摇3 d使得溶解达到平衡，将上清液用0.45μm的微孔滤膜过滤，取滤液用pH 7.4的磷酸盐缓冲液稀释适当的倍数，代入之前计算的标准曲线方程中，对格列本脲、磺丁基醚－β－环糊精／格列本脲物理混合物、磺丁基醚－β－环糊精／格列本脲包合物在水中的溶解度分别进行计算。

2.6 溶出曲线的绘制 分别称取格列本脲、磺丁基醚－β－环糊精／格列本脲物理混合物、磺丁基醚－β－环糊精／格列本脲包结物粉末适量（含2.5 mg格列本脲），测定溶出度。具体方法参照“格列本脲片溶出度测定方法［《中国药典》2010年版（二部）］”［13］，以250 mL的0.02%三羟甲基氨基甲烷溶液作为溶出介质，每分钟75转。于2.5、5、15、30、45 min各时间点取样5 mL，滤过，续滤液于225 nm处测定吸光值，计算出溶出量，绘制溶出曲线。

3 结果与讨论

3.1 检测波长的选择 根据紫外分光光度计的全波长扫描结果发现格列本脲的最大吸收波长为225 nm，此时磺丁基醚－β－环糊精对测定无干扰，因此将检测波长定为225 nm。

3.2 标准曲线方程的确定 根据格列本脲系列标准溶液的吸光度测定，得出标准曲线方程为C（mg·L－1）＝36.864A＋0.011 8（r＝0.999 6，n＝6），该结果表明格列本脲在0.8～25.6 mg·L－1浓度范围内线性关系良好。

3.3 表观稳定常数的测定 所得相溶解度曲线见图1，相溶解度方程为Y＝0.004 3X＋0.001 1，R2＝0.997 9，表观稳定常数Kc＝392.60 L·mol－1。由图1可以看出随着磺丁基醚－β－环糊精溶液浓度的增加，格列本脲的浓度呈现线性增加，表明磺丁基醚－β－环糊精对格列本脲具有良好的增溶效果，且相溶解度曲线为典型的AL型特征，推测主客分子的包合是按1∶1的比例进行的。

图1 格列本脲在磺丁基醚－β－环糊精溶液中的相溶解度图

3.4 不同质量比对包合率的影响 制备包合物的常用方法有饱和水溶液法、中和法、研磨法等，针对热稳定性包合物可以采用喷雾干燥技术、热不稳定的包合物可以采用冷冻干燥技术进行干燥。本文中采用较常见的中和法，并考察了磺丁基醚－β－环糊精与格列本脲的投料质量比对所得包合物中的格列本脲的包合率的影响，所得结果见表1。从表中可以看出在质量比大于20∶1后，格列本脲的包合率增加不明显，考虑到增加磺丁基醚－β－环糊精的量会使得制剂的渗透压增大，所以采用20∶1的质量比即得较好的磺丁基醚－β－环糊精／格列本脲包合物。

表1 不同质量比下制备的磺丁基醚－β－环糊精／格列本脲包合物包合率

3.5 溶解度的测定 格列本脲、磺丁基醚－β－环糊精／格列本脲物理混合物、磺丁基醚－β－环糊精／格列本脲包合物在水中的溶解度及增溶倍数均列于表2。从结果可以看出，格列本脲自身在水中的溶解度只有4.44 mg·L－1，而磺丁基醚－β－环糊精／格列本脲包合物的溶解度增加到77.83 mg·L－1，增溶达到17.53倍，明显的改善了格列本脲的溶解性。

表2 样品的水溶解度及增溶情况

3.6 溶出曲线的测定 溶出度的测定结果见图2，由结果可以看出物理混合物与格列本脲原料药的溶出速率无过大差别，而磺丁基醚－β－环糊精／格列本脲包合物的溶出速率则大大提高，在15 min累积溶出度就达到了90%以上。表明包合物的制备对于格列本脲的溶出度有明显改善。

图2 各样品溶出曲线

4 结论

制备磺丁基醚－β－环糊精／格列本脲包合物有力地改善了格列本脲的水溶性差的问题，具有良好的发展前景，相信随着对磺丁基醚－β－环糊精研究的不断拓展与深入，该类包合物的制备会带来较好的实际意义和临床应用价值。

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Preparation of butyl ether－β－cyclodextrin and glibenclam ide clathrate

LIU Kai，HE Yuan
（Jiangsu Hengrui Pharmaceutical Incorporated Company，Lianyungang 222047，China）

ObjectiveTo prepare butyl ether－β－cyclodextrin and glibenclamide clathrate，and explore their effect on improve the dissolution and stability of drug.M ethodsPhase solubilitymethod was implemented to determine the apparent stability constant，neutralization was used to prepare butyl ether－β－cyclodextrin and glibenclamide clathrate；The dissolution of inclusion compoundswas investigated.ResultsCompared with the glibenclamide bulk drug，butyl ether－β－cyclodextrin and Glibenclamide clathrate had increased the drug solubility significantly.ConclusionThe preparation of butyl ether－β－cyclodextrin and glibenclamide clathrate had good practical application value.

Glibenclamide；Butyl ether－β－cyclodextrin；Clathrate；Preparation method

R944．9

A

2095－5375（2015）07－0401－003

刘凯，男，博士研究生，研究方向：新药制剂研发，E－mail：hrsliukai＠163.com