8-羟基喹啉荧光法测定口服液中微量锌*

李玉红，孟小华，杨 振，赵 琴

（咸阳师范学院化学与化工学院,陕西咸阳712000）

锌是人体必需的微量元素之一，被冠以“生命之花”、“智力之源”的美称。锌与许多核酸及蛋白质的合成密不可分，参与体内维生素A 的代谢及生理功能，维持味觉、嗅觉功能，促进食欲，提高免疫功能，增强对疾病的抵抗力，锌还保护皮肤粘膜的正常发育；锌缺乏容易引起食欲不振、生长迟缓、智力低下、白内障、老年黄斑变性及肝硬化等症状。日常饮食中，锌的摄入量少且易丢失，通过摄入锌口服液作为对人体锌的补充尤为重要。因此，测定锌口服液中锌含量具有一定的现实意义。锌的测定主要有原子吸收光谱[1，2]、分光光度法[3，4]、荧光光度法[5，6]等。

本工作基于在弱酸条件下，8-羟基喹啉-Zn2+络合物产物的荧光强度F 与待测Zn2+浓度C 成正比，可定量计算出样品中的锌含量。

1 实验部分

1.1 仪器及试剂

赛多利斯BS-224S电子分析天平；耶拿RF-5301 PC 型荧光分光光度计；上海琅轩DZF-6020 型真空干燥箱；DK-98-1 型电热恒温水浴锅。

无水乙酸钠（上海金华大化学试剂有限公司），十六烷基三甲基溴化铵CTMAB（北京山浦化工有限公司），8-羟基喹啉（北京市化学试剂厂），无水乙醇（天津市河东区红岩试剂厂），HZc（天津市河东区红岩试剂厂），锌粒（北京化工厂），浓HNO3（天津市耀华化学试剂有限公司），所有试剂均为分析纯，试验用水为二次蒸馏水。

1.2 试验方法

取两支25mL的具塞比色管，分别依次加入0.4mL的8-羟基喹啉溶液，4.0mL CTMAB 溶液，14.0mL NaAc-HAc 缓冲溶液；其中一支加入适量的锌标准工作溶液或待测样品，定容，摇匀，另一支作为试剂空白。在25℃下反应16min 后，用1.0cm 的石英比色皿测其荧光强度F。

2 结果与讨论

2.1 荧光光谱

按1.2 试验方法测定8-羟基喹啉-Zn2+络合物荧光光谱见图1。

图1 荧光光谱图Fig.1 Fluorescence spectra

从图1 中曲线1 和曲线2 分别为加锌体系和非加锌体系的荧光光谱。结果显示：络合物在497nm 处荧光强度F 最大，选497nm 做测定波长。

2.2 试验条件的选择

2.2.1 指示剂8-羟基喹啉 改变指示剂8-羟基喹啉溶液的用量，试验结果表明：指示剂8-羟基喹啉溶液的用量在0.1～0.4mL 范围内，产生荧光强度先增大后趋于平稳，用量选择0.4mL。

2.2.2 NaAc-HAc 缓冲溶液 在8.0～16.0mL 范围内改变NaAc-HAc 缓冲溶液的用量，试验结果表明：pH 值为5.0 的NaAc-HAc 缓冲溶液，其用量为14.0 mL 荧光强度最佳。

2.2.3 表面活性剂CTMAB 在2.0～6.0mL 范围内改变表面活性剂CTMAB 的用量，试验结果表明：CTMAB 用量为4.0mL 对显色剂的增敏效果最佳。

2.2.4 反应时间 在8～20min 范围内变化反应时间，试验结果表明：随反应时间增长荧光强度先增大后减小，选择反应时间16min。

2.2.5 反应温度 在10～40℃范围内变化反应温度，试验结果表明：反应温度在20～35℃之间产生的荧光强度较大且稳定，实验选用室温25℃。

2.3 标准曲线及检出限

改变锌标准液的浓度，按1.2 试验方法操作，结果表明：锌的质量浓度在0～5.0μg·mL-1范围内与荧光强度呈良好的线性关系，锌的标准工曲线为：F=96.309C+20.611，相关系数为0.9965。平行测定空白溶液11 次，测定方法的标准偏差为0.033，检出限为0.099μg·mL-1。

2.4 干扰试验

在实验条件下，对3.0μg·mL-1的Zn（Ⅱ）测定相对误差＜±5%时,进行了几种金属阳离子K+、Na+、Mg2+、Al3+、Ca2+、Mn2+和几种阴离子Cl-、、I-、等测定干扰性试验。实验结果表明，500μg·mL-1的Al3+和Mn2+对实验有干扰，其他离子均无干扰。

2.5 动力学参数

实验结果表明：在20～40℃，lnF 与1/T 呈线性关系，线性回归方程:lnΔF=7402.6×1/T-20.858，相关系数为0.9899，表观活化能Ea 为61.55kJ·moL-1。

2.6 样品加标回收率

取市售锌口服液样品一支倒入100mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀备用。移取1.0mL 上述制得的样品溶液，按照试验方法测定其荧光强度，标准曲线知样品中锌含量结果见表1（产品标示值为0.5mg·mL-1），相对标准偏差2.81%（n=6）。同时做加标回收率实验，结果回收率在96.5%～104.5%之间。

表1 口服液锌测定结果及回收试验（n=6）Tab.1 Results of Zinc in oral and test for recovery

3 结论

实验结果表明：荧光光度法测定口服液中的微量元素锌，此方法检出限为0.099mg·mL-1，加标回收率为96.5%～104.5%，在20～40℃范围内，lnF 与1/T 呈线性关系，表观活化能Ea 为61.55kJ·moL-1，荧光分析法成本较低，符合分析的要求，达到了预想的结果。

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