谌剑波,张丽君,吴 华,黎晓敏,吴建云(.西南大学动物科技学院,重庆北碚40075;.重庆市荣昌县畜牧兽医局,重庆荣昌40460;.重庆市北碚区农委,重庆北碚400700)
渝西地区母猪子宫内膜炎病原菌分离鉴定及耐药性分析
谌剑波1,张丽君2,吴华3,黎晓敏1,吴建云1
(1.西南大学动物科技学院,重庆北碚400715;2.重庆市荣昌县畜牧兽医局,重庆荣昌402460;3.重庆市北碚区农委,重庆北碚400700)
母猪子宫内膜炎是一种母猪产后的常见病,可引起母猪发情不正常,或发情正常但屡配不孕。它是规模化养猪场母猪高淘汰率的重要疾病之一,给养猪业造成巨大经济损失。调查[1]显示,在养猪业中,约20%分娩母猪患有子宫内膜炎。渝西地区是我国重要的生猪生产区,子宫内膜炎在当地猪场也常有发生。我们收集了渝西地区部分规模化种猪场母猪子宫内膜炎病例进行细菌分离试验,并进一步做了常用抗生素对分离细菌的敏感试验,试验结果可为渝西地区该病的临床治疗和预防提供理论与技术支持。
1.1试验动物从渝西地区部分规模化种猪场选取具有相关临床症状的疑似患病母猪,通过直肠检查、子宫颈口黏液实验室检验[2]等方法综合确诊为患子宫内膜炎的母猪。
1.2培养基与试剂营养肉汤、血清琼脂、营养琼脂、甘露醇培养基、麦康凯琼脂等均按常规方法配制。
1.3药敏试片青霉素、链霉素、庆大霉素、强力霉素、丁胺卡那霉素、氨苄青霉素、阿奇霉素、环丙沙星、诺氟沙星和氧氟沙星,均购自上海金穗生物科技有限公司。
1.4病料采集对26头经临床诊断为子宫内膜炎的母猪先使用温水清洁阴部,再用0.1%新洁尔灭消毒。然后将灭菌输精管伸入子宫颈,采集1~1.5 mL子宫分泌物,立即注入灭菌的小试管中,冷藏、密封待用。整个过程尽量保持无菌操作,并做好标记。
1.5细菌分离鉴定将采集的子宫分泌物接种肉汤培养液,37℃培养24 h,然后划线接种于琼脂平板,37℃培养24 h,挑选典型菌落涂片、染色、镜检。根据菌落形态、菌体大小和染色特征再进一步培养。最后将分离菌株低温保存。
1.6药敏试验采用纸片琼脂扩散法[3]测定常用抗菌药物的敏感性。本试验共测定了分离菌株对渝西地区常用的青霉素、链霉素、庆大霉素等10种抗菌药物的敏感性。试验时测量抑菌圈直径,参照CSLI的抗菌药物敏感性试验解释标准[4]进行结果判定。未列入评价标准的参考同类药物标准进行判定。
2.1细菌的分离鉴定对26个子宫分泌物样本进行细菌分离培养和鉴定,结果(见表1),共检出7种共51个菌株。其中葡萄球菌23株,占45.1%;链球菌10株,占19.6%;大肠杆菌14株,占27.5%。从检测结果来看,单一病原菌引起子宫内膜炎发病情况较少,而多种细菌混合感染的情况较为严重,共22例,占总感染数的84.6%。
表1 母猪子宫内膜炎病原菌分离鉴定结果
2.2药敏试验对渝西地区母猪子宫内膜炎的主要致病菌(葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌)进行药敏试验,结果(表2)表明,葡萄球菌对青霉素、氨苄青霉素、强力霉素耐药;对丁胺卡那霉素、阿奇霉素、环丙沙星、诺氟沙星较为敏感;链球菌对青霉素、链霉素、氨苄青霉素耐药;对庆大霉素、阿奇霉素、环丙沙星和氧氟沙星较为敏感;大肠杆菌对青霉素、氨苄青霉素耐药;对庆大霉素、环丙沙星、诺氟沙星和氧氟沙星较为敏感。几种主要致病菌对丁胺卡那霉素、环丙沙星、诺氟沙星等药物敏感性较高,可作为渝西地区治疗母猪子宫内膜炎的主要药物。
表2 常用抗菌药对主要致病菌药敏试验结果/%
3.1在分离出的菌株中,检出率前3名的分别是金黄色葡萄球菌23株(45.1%),大肠杆菌14株(27.5),链球菌10株(19.6%)。这说明引起渝西地区母猪子宫内膜炎的主要病原菌是葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌,与以往其他地区报道[5-6]结果相近。但近年来,由于环境污染、抗生素滥用等原因,单一病原菌引起母猪子宫内膜炎已较少发生,而多种细菌混合感染的情况已较为普遍。
3.2由于临床长期不合理使用抗菌药物,导致病原菌对常用抗菌药物已产生耐药性,尤其对于以前常用的青霉素等药物更为明显。环丙沙星、诺氟沙星、氧氟沙星等喹诺酮类药物因以前临床使用较少,对于主要致病菌仍有较强的敏感性,可在今后的临床工作中作为主要的治疗药物使用。同时,在临床用药时要注意药物的合理使用或交替使用,不要随意加大剂量,暂停已产生明显耐药性的药物。
3.3对于母猪子宫内膜炎的防治,除了治疗时选用较为敏感的抗菌药物外,还可以考虑中西医结合治疗。据报道[7],采用中西医结合治疗可在保证疗效的同时,减少药物在动物体内的残留。
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通讯作者:吴建云,E-mail:jianyun1973@163.com
作者简介:谌剑波(1981-),男,实验师,硕士,主要从事兽医学相关实验教学工作,E-mail:34670344@qq.com
基金项目:中央高校基本科研业务费专项资金项目(XDJK2-013L095)
收稿日期:2014-04-03
中图分类号:S852.65+1
文献标志码:B
文章编号:0529- 6005(2015)10- 0046- 02