手足口病患儿血清细胞因子及自然杀伤细胞表达的变化及临床意义

路 燕

(江苏省南通市第一人民医院 儿科，江苏 南通，226001)

手足口病(HFMD)是儿童常见病，以发热和手、足、口腔等部位出现皮疹或疱疹为主要临床特征，由肠道病毒(EV)感染引起，少数患儿可出现严重并发症，甚至死亡［1-2］。最近10 多年来，HFMD 在亚太地区多次出现大规模流行，受到广泛关注［3］。目前，重症HFMD 尚无特效治疗方案，早期诊断、识别危重症患儿，及时给予呼吸、循环支持及防治脑损伤是降低病死率的关键［4］。目前尚未发现重症HFMD 的特异性检测指标，但有研究表明，病情严重程度不同的EV71 感染患儿，其免疫功能存在差异［5］。因此，本研究检测了56例HFMD 患儿血清细胞因子及自然杀伤细胞(NK 细胞)的表达水平，分析不同病情患儿免疫功能的差异，以期为临床诊治重症HFMD 提供参考，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2013年1月—2014年12月在江苏省南通市第一人民医院儿科就诊的HFMD 患儿56例，均根据临床表现、实验室检查等确诊，根据病情轻重分为轻症组31例和重症组25例，病情诊断参考卫生部指南［6］相关标准:患儿表现为手、足、口腔、臀部皮疹，伴或不伴发热为轻症;出现嗜睡、谵妄、肢体抖动、惊厥、脑膜刺激征等神经系统受累表现为重症。轻症组男17例，女14例;年龄8 个月～8岁，平均(29.65±3.14)个月。重症组男12例，女13例;年 龄9 个月～8岁，平 均(28.73±4.06)个月。另选取同期健康体检儿童30例设为对照组，其中男14例，女16例;年龄7个月～9岁，平均(30.11±3.85)个月。3组性别、年龄等一般资料比较，差异无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法

3组均于入组第2 天清晨抽取肘静脉血，以酶联免疫吸附法检测血清白介素(IL)-6、IL-12、肿瘤坏死因子?α(TNF?α)水平，试剂盒购自美国Panomics 公司;以流式细胞仪检测NK(以CD16+CD56+表示)比例，仪器购自美国Becton Dickinson公司。

1.3 观察指标

观察3组血清IL-6、IL-12、TNF?α 水平及CD16+CD56+含量差异，并分析各指标与病情的相关性。

1.4 统计学方法

采用SPSS 19.0 软件包处理数据，计量资料以均数±标准差()表示，组间比较采用t 检验，生化指标与病情的相关性采用Spearman 等级相关性分析。

2 结果

2.1 3组细胞因子及NK 含量比较

轻症组血清IL-6、IL-12、TNF?α 水平显著高于重症组及对照组，差异有统计学意义(P＜0.01)，重症组仅IL-12 水平高于对照组，差异有统计学意义(P＜0.01)，而IL-6 和TNF?α 水平与对照组差异无统计学意义(P＞0.05);重症组CD16+CD56+细胞含量显著高于轻症组和对照组，差异有统计学意义(P＜0.01)，而轻症组和对照组之间差异无统计学意义。见表1。

表1 3组细胞因子及NK 含量比较()

表1 3组细胞因子及NK 含量比较()

与对照组比较，＊＊P＜0.01;与轻症组比较，##P＜0.01。

2.2 各指标与病情的相关性分析

经spearman 等级相关性分析，结果表明IL-6和TNF?α 表达水平与病情严重程度呈负相关(r=－0.467，－0.518，P＜0.01)，IL-12 表达水平和CD16+CD56+含量与病情无显著相关性(P＞0.05)，见表2。

3 讨论

HFMD 已在全球多个国家和地区暴发或流行，近年来在中国的发病率呈升高趋势，呈现全年散发和季节性流行趋势。引起HFMD的病毒属于小RNA 病毒科EV 属，以EV71 和CVA16 最常见［7－8］。HFMD 是自限性疾病，目前对症和支持治疗是其主要治疗方案，多数患儿可痊愈，但个别重症患儿病情进展迅速，可出现脑炎、无菌性脑膜炎、神经源性肺水肿等严重并发症，甚至死亡［9］。

表2 各指标与病情的相关性分析

近年来大量研究［10］表明，HFMD 患儿血清细胞因子水平发生显著变化，且与病情严重程度存在一定关系。唐汉庆等［11］报道，HFMD 患儿血清IL-17、IL-22、IL-23 及TNF?α 水平均较健康幼儿升高。谢金纯等［12］报道，重症和轻症HFMD 患儿血清IL-10、IL-6、TNF?α 等多种细胞因子表达水平高于健康组。本研究选取IL-6、IL-12 及TNF?α这3 个前炎症性细胞因子为观察指标，结果表明，轻症组血清IL-6、IL-12、TNF?α 水平显著高于重症组及对照组，重症组仅IL-12 水平高于对照组，与李春玲等［13］报道相似，分析其原因可能是:病毒感染机体后，刺激吞噬细胞等非特异性免疫反应，大量分泌IL-6、IL-12、TNF?α 等前炎症细胞因子，为疾病的快速自限提供免疫环境，属于全身炎症反应时相，而随着炎症发展，这些炎症因子的合成逐渐减少或逐渐被消耗，其表达水平会趋于下降，接近正常。

除炎性细胞因子外，淋巴细胞含量发生变化也是HFMD 常见的临床特征［14］。曾慧慧等［15］报道，HFMD 患儿T 淋巴细胞亚群的均数显著低于正常参考值。NK 细胞是机体抗抗病毒等微生物的第一道免疫防线，其可在免疫应答早期就发挥生物学活性［16］。当疫球蛋白A(IgA)与靶细胞结合，并与NK 细胞CD16结合，即可发挥对靶细胞的杀伤作用［17］。本研究结果表明，随着病情的加重，HFMD 患儿NK 细胞的含量逐渐下降，提示重症患儿免疫功能紊乱，与付丹等［5］报道一致。此外，相关性分析表明，IL-6 和TNF?α 表达水平与病情严重程度呈负相关，提示前炎症因子在疾病起始阶段处于分泌亢进状态，而重症患儿可能处于代偿性抗炎症状态，临床治疗时应分阶段调节患儿的免疫功能，实施个体化治疗。

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