血清甲胎蛋白联合高尔基体蛋白73对原发性肝癌的诊断价值

张知洪　吴英松

作者单位:510515 南方医科大学生物技术学院(张知洪，吴英松)；510317 广东省第二人民医院检验科(张知洪)



血清甲胎蛋白联合高尔基体蛋白73对原发性肝癌的诊断价值

张知洪吴英松

作者单位:510515 南方医科大学生物技术学院(张知洪，吴英松)；510317 广东省第二人民医院检验科(张知洪)

【摘要】目的探讨血清甲胎蛋白(AFP)联合高尔基体蛋白73(GP73)对原发性肝癌(PHC)的诊断价值。方法回顾分析115例PHC患者、104例良性肝脏疾病患者、89例健康对照者的血清AFP、GP73检测结果，其中AFP测定采用电化学发光法，GP73测定采用酶联免疫吸附试验(ELISA)。结果①三组血清AFP、GP73水平相比差异有统计学意义(P<0.05)，PHC组血清AFP、GP73水平显著高于良性肝脏疾病组(P<0.05)，良性肝脏疾病组血清AFP、GP73水平显著高于健康对照组(P<0.05)。②血清AFP、GP73诊断PHC的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.797(95%CI，0.691～0.859)、0.903(95%CI，0.838～0.925)，血清GP73诊断PHC的AUC显著大于血清AFP(P<0.05)。③血清AFP诊断PHC的最佳cut-off值为187.7 μg/L，其对应的灵敏度、特异度分别为77.4%、94.3%。血清P73诊断PHC的最佳cut-off值为143.1 μg/L，其对应的灵敏度、特异度分别为84.3%、95.3%。④采用平行试验对血清AFP、GP73进行联合分析，其灵敏度、特异度分别为94.8%、92.7%。AFP、GP73联合检测诊断PHC的灵敏度显著高于单独检测血清AFP、GP73(P<0.05)，而特异度与单独检测血清AFP、GP73比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论单独检测血清AFP、GP73诊断PHC的灵敏度较低，当两者联合时可以显著提高其诊断灵敏度，而同时特异度无显著下降，从而有利于PHC的诊断与鉴别诊断。

【关键词】甲胎蛋白；高尔基体蛋白-73；原发性肝癌

(ThePracticalJournalofCancer,2015,30:651～653)

原发性肝癌(PHC)是指原发于肝细胞或肝内胆管细胞的恶性肿瘤，其恶性程度较高、预后较差，死亡率在恶性肿瘤中仅次于肺癌、胃癌而居第3位，因此探索早期诊断PHC的方法成为当前肿瘤学研究的重要方向[1]。作为诊断PHC的传统肿瘤标志物，甲胎蛋白(AFP)被广泛应用于临床，但是由于部分AFP阴性PHC患者的存在，使得其诊断灵敏度较低[2]。随着研究的深入，新型肿瘤标志物如高尔基体蛋白-73(GP73)等逐步应用于临床，本研究即旨在探讨血清AFP联合GP73诊断PHC的临床价值，现报告如下。

1材料与方法

1.1一般资料

选取2012年9月-2014年6月广东省第二人民医院收治的115例PHC患者、104例良性肝脏疾病患者、89例健康对照者作为研究对象，所有PHC患者均经病理检查确诊。104例良性肝脏疾病患者包括肝硬化51例、慢性活动性肝炎33例、其他良性肝病20例。89例健康对照者均经体检科确诊。三组患者性别、年龄、体质指数等一般资料相比差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1　3组一般资料的比较

1.2研究方法

空腹抽取患者静脉血约5 ml，静置30 min，3 000 rpm离心5 min分离血清，取血清进行AFP、GP73检测。AFP测定采用瑞士罗氏公司生产的Cobas e601型全自动电化学发光免疫分析仪及其配套试剂、标准品。GP73测定采用ELISA方法，应用北京热景生物科技有限公司生产的GP73试剂盒、丹麦雷杜公司生产的RT-6000酶标仪、美国宝特公司生产的 Bio-TekELX50 洗板机，严格按照试剂盒说明书进行操作。

1.3统计学分析

2结果

2.1三组血清AFP、GP73测定结果的比较

三组血清AFP、GP73水平相比差异有统计学意义(P<0.05)，PHC组血清AFP、GP73水平显著高于良性肝脏疾病组(P<0.05)，良性肝脏疾病组血清AFP、GP73水平显著高于健康对照组(P<0.05)，见表2。

组别例数AFP(μg/L)GP73(μg/L)PHC组115337.1±107.3285.7±65.2良性肝脏疾病组104104.5±49.064.2±39.5健康对照组899.5±5.424.9±13.6

2.2血清AFP、GP73诊断PHC的ROC曲线分析

绘制ROC曲线，得到血清AFP、GP73诊断PHC的AUC分别为0.797(95%CI，0.691～0.859)、0.903(95%CI，0.838～0.925)。血清GP73诊断PHC的AUC显著大于血清AFP(P<0.05)，见图1。

图1　血清AFP、GP73诊断PHC的ROC曲线分析

2.3血清AFP、GP73诊断PHC的临床价值分析

由ROC曲线可知，血清AFP诊断PHC的最佳cut-off值为187.7 μg/L，其对应的灵敏度、特异度分别为77.4%、94.3%。血清P73诊断PHC的最佳cut-off值为143.1 μg/L，其对应的灵敏度、特异度分别为84.3%、95.3%，见表3。

2.4血清AFP联合GP73诊断PHC的临床价值

采用平行试验对血清AFP、GP73进行联合分析，联合检测诊断PHC的灵敏度、特异度分别为94.8%(109/115)、92.7%(179/193)。联合检测诊断PHC的灵敏度显著高于单独检测血清AFP、GP73(P<0.05)，而特异度与单独检测血清AFP、GP73比较差异无统计学意义(P>0.05)。

表3　血清AFP、GP73诊断PHC的临床价值分析/例

3讨论

长期以来，临床上一直运用AFP作为PHC高危人群的筛查指标。在生理情况下，血清AFP升高主要见于妊娠期妇女、胎儿至出生不足2周的新生儿等。在病理情况下，血清AFP升高则主要见于肝硬化、肝炎等肝脏良性疾病，以及精原细胞癌、PHC等恶性疾病，但是肝脏良性疾病患者血清AFP升高的幅度较小，95%的肝脏良性疾病患者血清AFP不超过200 μg/L，而恶性疾病尤其是PHC患者血清AFP升高幅度较大，因此AFP对诊断PHC有着较高的特异性，从而可以用于肝脏良恶性疾病的鉴别诊断[3]。值得注意的是，并非所有PHC患者均有高水平的血清AFP，约有20%的PHC患者AFP始终呈阴性[4]，这对临床应用AFP筛查PHC是一个挑战，因此临床上有必要探索新的肿瘤标记物用于PHC的诊断。

GP73是1种位于高尔基体的Ⅱ型跨膜糖蛋白，其分子量约为73 kD，由Kladney在研究成人巨细胞性肝炎时发现。进一步研究发现，在健康个体内，GP73主要表达于汇管区的胆管上皮细胞中，大部分肝细胞不表达GP73，仅汇管区周围少量肝细胞低表达GP73。在汇管区的胆管上皮细胞内，GP73主要定位于管腔侧的细胞膜与细胞核之间，呈典型的高尔基体分布[5-6]。随着研究的深入，GP73与肝脏疾病尤其是PHC的关系得到了充分阐述。目前诸多研究均认为，肝脏疾病患者大部分肝细胞均高表达GP73，尤以PHC最为明显[7-8]。

在本研究中，我们先分析单独检测血清AFP与GP73诊断PHC的临床价值，结果可见血清AFP诊断PHC的灵敏度、特异度分别为77.4%、94.3%，而血清GP73诊断PHC的灵敏度、特异度分别为84.3%、95.3%。由此可知，单独检测血清AFP的灵敏度较低，尽管GP73的灵敏度高于AFP，但是仍然有提升的空间。在联合诊断试验设计时，有平行试验、序列试验两种，前者是指两个项目中任意一项大于等于其对应的最佳cut-off值即可确诊，后者是指两个项目均大于等于其对应的最佳cut-off值才可确诊，因此平行试验提高了灵敏度、降低了特异度，序列试验提高了特异度、降低了灵敏度[9]。基于本研究的情况，我们可以选择平行试验对血清AFP、GP73进行联合检测，进一步分析显示联合检测诊断PHC的灵敏度显著高于单独检测血清AFP、GP73(P<0.05)，而特异度与单独检测血清AFP、GP73差异无统计学意义(P>0.05)。综上所述，采用平行试验联合检测血清AFP与GP73，其诊断PHC的灵敏度得到了显著提高，而同时特异度又无显著下降，因此该模式在PHC的诊断与鉴别诊断过程中有较好的临床应用价值，值得临床推广应用。

参考文献

[1]李明岳，刘嘉林，郑锦锋，等.原发性肝癌患者手术治疗后生存状况的影响因素分析〔J〕.实用癌症杂志，2014，29(7)：802-804.

[2]周伟东，孙传东，吴力群，等.肝脏局灶性结节性增生与甲胎蛋白阴性肝细胞肝癌的CT及组织学鉴别〔J〕.临床外科杂志，2012，20(4)：254-256.

[3]李玉柱，张玉敏.血清铁蛋白、甲胎蛋白和甲胎蛋白异质体联合检测对原发性肝癌诊断的临床意义〔J〕.肿瘤研究与临床，2014，26(7)：468-469,472.

[4]施纯朝，薛峰，孙延富，等.乙型肝炎肝硬化并发原发性肝癌的危险因素〔J〕.实用癌症杂志，2013，28(4)：399-401.

[5]谢明水，刘杨，陈丹丹，等.甲胎蛋白异质体3、高尔基体蛋白73、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在原发性肝癌诊断中的价值〔J〕.肿瘤研究与临床，2013，25(11)：730-732.

[6]赵岩，李勇，胡宝山，等.高尔基体蛋白73在肝细胞癌诊断及预测疾病进展中的作用〔J〕.中华医学杂志，2014，94(5)：390-392.

[7]袁明生，唐富英，王影.高尔基体蛋白73诊断原发性肝癌的临床评价〔J〕.中国实验诊断学，2013，17(5)：844-846.

[8]毛佳，刘佳，赵静，等.高尔基体蛋白73在原发性肝癌预后判断中的应用价值〔J〕.中华实验和临床病毒学杂志，2014，28(5)：374-376.

[9]张丽坤，崔健娇.血清PCT与hs-CRP联合检测诊断老年下呼吸道细菌性感染的临床价值〔J〕.中国老年学杂志，2012，32(16)：3445-3446.

(编辑：吴小红)

Value of Serum Alpha-fetoprotein and Golgi Protein 73 in the Diagnosis of

Primary Hepatic Carcinoma

ZHANGZhihong，WUYingsong.SouthernMedicalUniversity,Guangzhou，510515

【Abstract】ObjectiveTo investigate the value of alpha-fetoprotein(AFP) and Golgi protein 73 (GP73) in the diagnosis of primary hepatic carcinoma(PHC).MethodsThe serum AFPand GP73 levels in 115 cases of PHC,104 cases of benign liver diseases and 89 cases of healthy controls were analyzed retrospectively,and serum AFPwas detected by electrochemical luminescence method,and GP73 was detected by enzyme linked immunosorbent assay(ELISA).Results①There were obvious differences in serum AFPand GP73 among the 3 group s(P<0.05),and serum AFPand GP73 in PHC group were obviously higher than those of benign liver diseases group (P<0.05),which were obviously higher than those of healthy control group (P<0.05).②The areas under the ROC curve(AUC)of serum AFPand GP73 were 0.903(95%CI，0.838～0.925)and 0.797(95%CI，0.691～0.859)respectively,while the AUC of serum GP73 was obviously larger than that of serum AFP(P<0.05).③For diagnosis of PHC,the best cut-off value of serum AFPwas 187.7 μg/L,which had a sensitivity of 77.4%,specificity of 94.3%,while the best cut-off value of serum GP73 was 143.1 μg/L,which had a sensitivity of 84.3%,specificity of 95.3%.④The serum AFPand GP73 were analyzed jointly by parallel test,which had a sensitivity of 94.8%,specificity of 92.7%.The sensitivity of parallel test were obviously higher those of single detection of serum AFPand GP73(P<0.05),while no obvious differences were found in specificity between parallel test and single detection of serum AFPand GP73(P>0.05).ConclusionThe single detection of serum AFPand GP73 is of lower sensitivity in the diagnosis of PHC,but the parallel test can improve the sensitivity obviously,while the specificity would not decrease obviously at the same time,which contributes to the diagnosis and differential diagnosis of PHC.

【Key words】Alpha-fetoprotein(AFP)；Golgi protein 73(GP73)；Primary hepatic carcinoma(PHC)

(收稿日期2015-03-19修回日期 2015-03-29)

中图分类号：R735.7

文献标识码：A

文章编号：1001-5930(2015)05-0651-03

DOI：10.3969/j.issn.1001-5930.2015.05.007

通讯作者：吴英松