禽流感血清抗体和卵黄抗体的比较研究

何贤海

（贵州省德江县农牧科技局动物疫病预防控制中心，贵州德江 565200）

禽流感血清抗体和卵黄抗体的比较研究

何贤海

（贵州省德江县农牧科技局动物疫病预防控制中心，贵州德江 565200）

禽流感是一种人畜共患的急性、烈性传染病，感染家禽死亡率非常高，对养殖业造成的经济损失难以估量。常规监测禽流感疫苗免疫效果的方法是检测禽流感血清抗体，但存在采血过程费时费力、容易引起家禽应激反应等问题。大量试验证明，禽流感卵黄抗体效价与血清抗体效价基本一致，且具有操作简单的优点，为禽流感的抗体检测提供了新的选择。

禽流感 血清抗体 卵黄抗体 比较研究

禽流感（AI）是由A型流感病毒引起的一种人畜共患的急性、烈性传染病，禽类一旦感染，轻者可引起禽类产蛋量急剧降低，严重者可导致禽类突然死亡，且死亡率非常高[1]，是近年来在家禽养殖业中造成严重危害的传染病之一。如果接触到感染禽流感病毒的禽及其排泄物、分泌物、鸡胚、种蛋和精液，或者是接触到受到污染的饲料、水、垫草等媒介，禽流感就能经呼吸道、消化道传播，传播速度非常迅速。水禽和候鸟也是禽流感的主要传播者，传播面积巨大。一旦禽流感暴发，不仅会给养殖业带来灾难性的危害，造成难以估量的经济损失，甚至会威胁到人类的生命安全。因此，日常中做好高致病性禽流感的监测工作，其为疫病防控起到了重要作用。

1 禽流感血清抗体检测法

目前，在家禽养殖过程中防控禽流感病毒流行的主要方法是对家禽进行禽流感疫苗接种。接种后，为了能够及时掌握疫苗的免疫效果、了解雏鸡母源性抗体水平的高低以便建立科学的免疫计划，确定是否实施强化免疫等，常规的监测方法是检测免疫家禽血清中的免疫抗体水平。但是这种方法的弊端在于，在采血过程中容易使家禽受到惊吓，引起应激反应，使产蛋鸡的产量急剧下降，甚至导致家禽死亡，给养殖户造成不必要的经济损失，而且采血过程也比较麻烦，采血中如果稍微不注意造成血液污染或者溶血等情况发生，会影响检测结果的准确性。

2 禽流感卵黄抗体检测法

以特异性抗原免疫母鸡后，母鸡体内产生相对应的特异性抗体，这种抗体除了存在于血清中，也存在于禽蛋的卵黄中，我们称之为卵黄抗体（Yolk antibody，IgY）。

2.1 卵黄抗体检测的可行性

早在20世纪80年代，我国就有利用卵黄样本替代血清样本进行新城疫免疫抗体效价监测的做法[2]，而且也逐渐延伸应用到传染性法氏囊、减蛋综合征、传染性喉气管炎等禽病的防治中。近年来，国内针对禽流感血清抗体和卵黄抗体的监测效果也进行了大量的研究讨论。付兴周对80只150日龄海兰蛋鸡进行禽流感疫苗免疫后，采用β—微量法在30天内多次测定血清及蛋黄中AI 的血凝抑制（HI）抗体，检测结果发现，免疫5天后，血清中开始检测出HI抗体，到免疫后的第19天，抗体效价达到最高峰，而蛋黄中在免疫后的第7天可以检测出HI抗体，之后抗体水平逐渐上升，至免疫后19～21天达到最高值，而且与血清中的HI抗体水平接近，差异不显著[3]；吕运莲等的试验显示，禽流感血清抗体和卵黄抗体效价分别为6.55和6.75，表明血清抗体效价与卵黄抗体效价基本一致[4]。这些试验都证明了用卵黄抗体代替血清抗体检测效价是可行的。

2.2 卵黄抗体的特点

卵黄抗体的优点有很多。第1，卵黄抗体的产量很高。产蛋母鸡经特异性抗原免疫后，可以产生持久性应答反应，抗体效价可维持数月之久；第2，卵黄抗体耐酸、耐碱、耐热，理化性质非常稳定；第3，卵黄抗体免疫测定中的干扰小，IgY不会和免疫球蛋白IgA和IgG结合，可避免这些因素所造成假阳性或假阴性结果[5]；第四，简单方便，从卵黄中检测IgY比从动物血清中检测抗体更加方便，也免去了免疫动物采血的痛苦。

2.3 卵黄抗体测定的局限性

虽然大量试验都证明用卵黄抗体代替血清抗体进行禽流感疫苗效价检测是可行的，但是这种方法仍然有一定的局限性。由于卵黄的形成需要9～10 d的时间，所以卵黄抗体与血清抗体的检测结果相比有一定的滞后性，在抗体上升期间不能用卵黄代替血清进行HI抗体监测，所以不适用于发生AI疫情时的检测，只适用于日常的疫情监测。

3 结束语

运用鸡蛋卵黄抗体检测法，能把因检测抽血造成的应激反应、产蛋率下降等不利影响降到最低，且方法操作简单易行，检测结果与血清抗体检测结果基本一致，是一种值得日常疫情监测中大面积推广应用的方法。

[1] 姚海潮，曾江勇，张成福.浅谈禽流感的危害及防控[J].西藏科技，2008，（6）：54-56.

[2] 李向东，左兴惠，刘文亮.不同日期所产鸡卵与母鸡血清中鸡新诚疫抗体水平的比较[J].家畜传染病，1988，（30）：12-13.

[3] 付兴周.蛋鸡血清及其蛋黄中禽流感病毒抗体的相关性[J].养禽与禽病防治，2005，（5）：16-17.

[4] 吕运莲，赵晏平，程朝友，周继国.蛋鸡血清抗体与卵黄抗体效价对比试验[J].当代畜牧，2013，（9）：47-48.

[5] 韩丽丽.卵黄抗体的应用研究进展[J].科技视界，2012，（30）：85-86.

表1 RPHA法和AG法对比试验结果

从表1显示，山羊痘待检样品RPHA法阳性率80%，AGP法阳性率仅50%，试验中还发现AGP法阳性样品，RPHA法一定是阳性。病毒培养液检测结果，RPHA法阳性率100%，而AGP法阳性率为0。说明RPHA法敏感性明显高于AGP法。

3 讨论与分析

3.1本研究采用兔抗山羊痘病毒IgG致敏红细胞建立的反向间接血凝试验，对山羊痘病毒抗原具有特异性和敏感性，与其他动物病毒抗原不发生交叉反应，比AGP法敏感，且致敏红细胞的血凝性稳定。本研究建立的方法可用于山羊痘的诊断和流行病学检测，是一种灵敏、操作简单、快速的检测方法。

3.2红细胞的醛化固定和致敏方法较多。本试验采用了戊二醛醛化，结合鞣酸化处理，使红细胞更具有稳定性更敏感，消除了绵羊个体之间的差异而影响试验的重复性。