阿托伐他汀对自发性高血压大鼠心肌细胞PPAR-γ及GLUT-4表达的影响研究*

蒲丽君，罗 勇，赵 珂

(川北医学院附属医院，四川 南充 637000)

高血压病是最常见的心血管疾病之一，也是其它心血管疾病的一个主要危险因素。近年来随着我国社会经济状况的改善和人民生活方式的转变，其发病率呈增加趋势，我国高血压患者已逾1亿人口［1］。由于高血压病的病因及发病机制较为复杂，尚未完全阐明，使其防治工作成为目前一大难题。有文献研究发现，心脏在高负荷状态下能量代谢的改变是心肌肥厚发生发展的机制之一［2］。因此，临床上抑制高血压心肌肥厚已经成为成为治疗高血压的新途径。有学者研究，改善心肌细胞代谢是抑制高血压心肌肥厚的有效途径。过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR-γ)与葡萄糖转运蛋白4(GLUT-4)与心肌细胞代谢密切相关［3］。本文就选择20只自发性高血压大鼠为研究对象，探讨分析阿托伐他汀对自发性高血压大鼠心肌细胞PPAR-γ及GLUT-4表达水平的影响，为临床运用提供理论指导。

1 资料与方法

1.1 实验动物:选择8周龄180～200g的健康雄性自发性高血压大鼠20只，随机分为A组与B组，同期同批次选择10只同周龄和体重的健康雄性大鼠组成C组。在保持温度(20±2.5)℃、24h自由进食与进水的条件下喂养三组大鼠。

1.2 药物喂养方法:A组大鼠按照50mg·kg-1·d-1的水平喂养阿托伐他汀溶液，连续喂养10周，每周3次;同时喂养B组、C组大鼠等量的蒸馏水，连续喂养10周，每周3次.观察三组大鼠的血压值、血脂水平、左心室质量指数水平以及PPAR-γ及GLUT-4表达水平的差异性。

1.3 实验组器材以及试剂:CODA尾袖套法无创血压系统;DW-86L386型-80℃低温冰箱;全自动化学分析仪;免疫组化光学显微镜;各种规格的量筒、烧杯、EP管、枪头及枪头盒;UV-2500紫外分光光度计;阿托伐他汀，规格为20mg/片;鼠抗鼠PPARγ单克隆抗体;鼠抗鼠GLUT4单克隆抗体等。

1.4 血压监测:采用CODA尾袖套法无创血压系统检测三组大鼠第1周、3周、5周、7周以及10周的的血压水平，比较三组大鼠的血压的差异性。

1.5 血脂水平以及左心室质量指数水平的检测:使用全自动化学分析仪检测三组大鼠TC、TG、HDL-C以及LDL-C等的水平。严格按照实验组操作方法制备实验标本，计算三组大鼠的左心室质量指数水平，比较差异性。

1.6 PPAR-γ、GLUT-4 表达水平的检测［4］:采用免疫组化法及PT-PCR法检测三组大鼠的PPAR-γ及GLUT-4表达水平。检测过程严格按照试剂盒操作标准操作，保证检测结果的科学性。

1.7 统计学方法:数据处理软件包为SPSS16.0，计量的比较采用t值检验，计数的比较采用χ2检验，P＜0.05表示有显著性差异。

2 结 果

2.1 三组大鼠血压值的比较:A组与B组大鼠的舒张压与收缩压水平较C组大鼠均较高，具有明显差异性(P＜0.05)，A组与B组大鼠的血压值水平比较，差异性不明显(P＞0.05)。具体见表1。

2.2 三组大鼠血脂水平、LVM1水平的比较:A组与B组大鼠的TC、TG、HDL-C以及LDL-C等血脂水平较C组大鼠均较低，具有明显差异性(P＜0.05)，A组与B组比较血脂水平无差异性(P＞0.05)。三组大鼠的LVM1水平两两比较均具有显著性差异(P＞0.05)，但B组大鼠的LVM1水平最高，其次是A组，C组大鼠水平最低。见表2。

2.3 三组大鼠PPAR-γ、GLUT-4表达水平的比较:干预前，A组与B组大鼠PPAR-γ及GLUT-4表达水平均较C组较低，具有统计学意义(P＜0.05)，但A组与B组比较差异性不大(P＞0.05);干预后，A组大鼠PPAR-γ及GLUT-4表达水平显著提高，与C组大鼠比较差异性不大，但与B组大鼠比较，具有较大差异性(P＜0.05)。见表 3。

表1 三组大鼠血压值的比较(±s)

表1 三组大鼠血压值的比较(±s)

时间 血压 A组 B组 C组 A组与B组比较χ2 P A组与C组比较χ2 P B组与C组比较χ2 P 1 周 舒张压 122.80±13.80 125.30±16.50 99.10±12.10 0.943 ＞0.05 4.204 ＜0.05 5.132 ＜0.05收缩压 166.50±35.20 167.80±36.10 141.04±14.50 0.823 ＞0.05 5.043 ＜0.05 4.893 ＜0.05 3 周 舒张压 123.30±13.50 125.30±15.50 98.80±13.10 0.847 ＞0.05 5.132 ＜0.05 4.321 ＜0.05收缩压 168.30±34.10 169.20±37.20 140.35±15.12 0.475 ＞0.05 5.054 ＜0.05 5.012 ＜0.05 5 周 舒张压 124.20±14.20 125.40±12.90 99.50±12.20 0.124 ＞0.05 4.982 ＜0.05 4.892 ＜0.05收缩压 169.50±36.20 169.80±37.80 139.18±15.20 0.784 ＞0.05 4.829 ＜0.05 5.013 ＜0.05 7 周 舒张压 122.40±12.20 124.30±14.60 100.10±11.15 0.673 ＞0.05 4.545 ＜0.05 5.312 ＜0.05收缩压 167.50±36.20 170.50±37.10 140.32±15.50 0.812 ＞0.05 5.032 ＜0.05 4.554 ＜0.05 10 周 舒张压 123.40±12.70 122.80±14.50 98.85±12.60 0.783 ＞0.05 5.012 ＜0.05 5.984 ＜0.05收缩压 170.50±34.80 168.50±37.50 141.2±15.30 0.384 ＞0.05 5.392 ＜0.05 5.324 ＜0.05

表2 三组大鼠血脂水平、LVM1水平的比较±s)

表2 三组大鼠血脂水平、LVM1水平的比较±s)

指标 A组 B组 C组 A组与B组比较χ2 P A组与C组比较χ2 P B组与C组比较χ2 P TC(mmoL/L) 0.32±0.02 0.33±0.02 0.58±0.06 0.583 ＞0.05 4.021 ＜0.05 4.092 ＜0.05 TG(mmoL/L) 1.36±0.21 1.37±0.23 2.35±0.35 0.832 ＞0.05 4.943 ＜0.05 4.343 ＜0.05 HDL-C(mmoL/L) 0.40±0.10 0.41±0.08 0.93±0.18 0.812 ＞0.05 5.032 ＜0.05 4.091 ＜0.05 LDL-C(mmoL/L) 0.84±0.11 0.82±0.13 1.25±0.16 0.482 ＞0.05 5.475 ＜0.05 5.043 ＜0.05 LVM1(mg/g) 3.31±0.24 3.86±0.46 2.88±0.16 4.901 ＜0.05 5.132 ＜0.05 4.823 ＜0.05

表3 三组大鼠PPAR-γ、GLUT-4表达水平的比较(±s)

表3 三组大鼠PPAR-γ、GLUT-4表达水平的比较(±s)

指标 A组 B组 C组 A组与B组比较χ2 P A组与C组比较χ2 P B组与C组比较χ2 P PPAR-γ 干预前 1.15±0.03 1.13±0.02 1.28±0.05 0.854 ＞0.05 5.493 ＜0.05 4.343 ＜0.05干预后 1.25±0.06 1.13±0.03 1.28±0.06 5.034 ＜0.05 0.989 ＞0.05 5.034 ＜0.05 GLUT-4 干预前 1.10±0.02 1.08±0.01 1.25±0.06 0.912 ＞0.05 4.844 ＜0.05 5.175 ＜0.05干预后 1.23±0.05 1.08±0.02 1.25±0.07 4.983 ＜0.05 0.894 ＞0.05 4.434 ＜0.05

3 讨论

高血压是一种遗传异质性疾病，若干有微弱效应的基因累积作用生成高血压，并受一系列环境因素的影响［5，6］。该疾病的病理过程常涉及动脉血管壁增厚、左室肥厚及心肌纤维化即心血管重塑的过程。血管壁重塑可引致高血压靶器官的损害，而高血压长期压力超负荷所引起的心脏结构改变即左心室肥厚，明显增加心脏事件的发生率和死亡率，严重威胁到患者的生命安全［7，8］。随着我国高血压的发病率呈增加趋势，患病人口超过1亿人口，因此，如何治疗高血压，如何改善心脏机能成为当今医学研究的热点课题［9］。

阿托伐他汀是第三代他汀类药物，是新型的全合成的高效他汀类药物。他汀类药物又名羟甲基戊二酸单酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂，是目前临床应用最广泛最重要的降低胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇的药物，且对各种类型的高脂血症均有一定疗效［10］。但是本文研究发现，在阿托伐他汀干预的A组大鼠与蒸馏水喂养的B组大鼠的血脂水平差异性不明显，这可能与实验样本数量较少及阿托伐他汀干预时间较短有关。过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR-γ)是PPARs亚型之一，属于核内受体转录因子超家族成员，是一类由配体激活的核转录因子，在脂肪组织、骨骼肌组织中高表达，最新研究发现其在心脏组织内也存在［11］。有文献报道［12］，PPAR-γ 通过以下机制发挥作用:①通过阻断内皮素的产生，抑制血管紧张素Ⅱ及其受体的表达②抑制促纤维化因子转化生长因子β、基质金属蛋白酶(MMPs)及炎性细胞因子的表达;③抑制心肌细胞凋亡以及改善心肌脂质代谢来。葡萄糖转运蛋白(GLUTs)是细胞膜上的一种载体蛋白，负责葡萄糖分子或果糖分子的运载。有作者研究发现［13］，随年龄增长心肌中GLUT1的表达逐渐降低，GLUT4的表达升高，并伴随着糖分解代谢到氧化代谢的转变，但在心肌肥厚的过程中出现GLUT4的表达减少，GLUT1的表达增加，这说明葡萄糖转运蛋白参与了肥厚心肌的糖代谢过程。本文研究发现，阿托伐他汀干预的A组大鼠的PPAR-γ、GLUT-4表达水平较B组大鼠显著升高，与正常大鼠水平相差无几，并且A组大鼠的左心室质量指数(LVM1)水平明显降低，血压水平与B组、C组相差无几。这说明了阿托伐他汀不是通过影响血压，而是通过增强PPAR-γ、GLUT-4高表达的途径影响LVM1水平。因此，这一结论为临床研究提供了理论参考依据，具有较高的临床价值。，

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