一测多评法的应用及研究概况

王 肖，潘伟东，杨明宇，潘海峰☒（承德医学院，河北承德 067000）

一测多评法的应用及研究概况

王 肖，潘伟东，杨明宇，潘海峰△☒
（承德医学院，河北承德 067000）

一测多评法；中药；质量控制

事物的发展都是由浅入深、由点到线、由线到面的渐进过程，一测多评法（quantitative analysis of multi-components by single-marker，QAMS）的发展亦然。自2006年王智民等［1］首次提出一测多评法至今不到十年的时间里，其研究应用已从中药材、中药饮片发展到中药提取物、中药制剂，从药品领域发展到保健食品领域，从含量测定拓展到优化提取工艺。到2014年6月，一测多评法相关文献已有130余篇，其中采用一测多评法对黄连中表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱的含量测定已载入中国药典2010年版一部。由此可见，该方法已然成为未来评价中药质量的必然趋势。

1 一测多评法的起源

中药多组分、多功效的特点决定了单一组分的评价难以表达其质量，必须进行多组分的同步测定，而多组分同步测定所需的对照品就成为制约其发展的瓶颈，为了解决对照品货源严重紧缺、不稳定和价格高昂等问题，王智民等率先提出了一测多评法的中药质量控制和评价方法。其研究思路起源于内标法、校正因子法、主成分自身对照法及紫外百分吸收系数法等几个概念，即建立成分间的相对校正因子，通过测定一个易得的对照品实现多组分定量。该方法首次在中药材木通中针对相对校正因子的耐用性、系统适用性、方法学验证过程及计算值与实测值之间差异的科学合理性进行了系统研究。一测多评法的提出，得到了业内研究者的广泛关注和认可，之后对其原理、适用范围、方法学验证等多方面的科学性和适用性又进行了更深入的研究和完善［2-5］。

2 一测多评法在中药材、中药提取物及中药制剂中的应用

自2006年一测多评法提出之后，到2010年，先后在人参、三七、冠脉康胶囊、黄芩、黄连、吴茱萸连翘、黄芪、淫羊藿、柴胡、咽炎片中进行了多组分定量的探索，均得到了令人满意的结果，之后，该方法广泛受到业内学者的关注和认可。2011年，开始出现大量与该方法相关的文献，其应用范围覆盖了原药材、炮制品、中药提取物、中药单方制剂、中药复方制剂，从测定同类型成分的含量拓展到了测定不同类型成分的含量。

2006年，王智民等首次以中药材木通为研究对象，建立了木通中三种皂苷类成分的一测多评法，以皂苷PJI为内参物，建立其与百木通皂苷B和C间的相对校正因子，同时采用外标法实测三种成分的含量，用夹角余弦法评价计算值和实测值，结果表明，一测多评法与外标法所得结果无显著性差异。到2014年6月止，一测多评法已在丹参、五味子、木瓜、穿心莲等约50种中药材中得到进一步的探索和应用。

2008年，邹桂欣等［6］首次以中药复方制剂冠脉康胶囊为研究对象进行了一测多评法的探索研究，结果表明，利用一测多评法在不同色谱柱的计算值与外标实测值之间没有显著性差异，适合中药制剂的多指标质量评价模式的要求，可以用于控制冠脉康胶囊的质量。目前，一测多评法在中药制剂质量评价中的探索已涉及多种剂型，包括胶囊剂、片剂、丸剂、口服液、颗粒剂、注射液及外用软膏等，其中以胶囊和片剂居多。药物组成从1味（如新清宁片、银杏叶胶囊、丹参注射液）到17味（如大败毒胶囊）不等，含1-3味中药的制剂占多数［7-10］。

2010年，孔晶晶等［11］首次采用一测多评法测定多种不同类型成分的含量，重点探讨了不同类型化合物之间一测多评法的准确性和可行性。结果表明，其计算值与实测值间无显著性差异，可以在缺少对照品的情况下用于连翘中不同类型成分间的定量评价研究。这一探索扩大了一测多评法的适用范围，更适用于成分复杂多样的中药的质量控制，因此，同行学者相继在其它中药材赤芍、虎杖、补骨脂、鱼腥草、款冬花等建立不同类型成分间的相对校正因子中做了进一步的探索研究。

2012年，赵君颖等［12］首次以中药材炮制品酒黄连、萸黄连、姜黄连为研究对象进行了一测多评法的探索研究，结果表明，此方法快捷、经济，可作为黄连不同炮制品的质量检测方法。

2012年，安士影［13］等首次以中药材提取物紫锥菊提取物为研究对象，用一测多评法对市售国内紫锥菊提取物中多酚的含量进行了测定，为其综合质量评价提供研究依据。

到2014年6月，一测多评法在提取物中的应用有大黄地上部位提取物的质量控制研究、金银花提取物中6种有机酸类成分的测定、丹参水溶性提取物中4个水溶性成分的含量测定、银杏叶提取物中7种黄酮类成分的含量测定。

3 一测多评法在保健食品中的应用

2009年，魏峰等［14］首次以保健食品中6种大豆异黄酮类成分为对象进行了相关方法的探索和研究，结果表明，其结果与常规的含量测定方法测得的结果基本一致，可用于含大豆异黄酮类保健食品的质量控制。若能将经济、实用、快速、高效的一测多评法拓展应用到食品行业，在规范食品市场、减少假冒伪劣食品等方面将有很大的发展空间。

4 一测多评法在优化提取工艺中的应用

2011年，汪坤等［15］首次应用一测多评法测定黄连中表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱的含量，以优选黄连最佳提取工艺，之后又在优选黄芩提取工艺［16］、优选关黄柏生物碱的超声提取工艺中得到应用［17］。

5 一测多评法结合指纹图谱的应用

一测多评法的研究思路侧重从量上阐明主要成分或药效成分间的相互关系，是对指纹图谱数据进一步定量挖掘分析，这正好可以弥补中药指纹图谱技术模糊性的缺陷。2012年，林芳等［18］首次将一测多评法与指纹图谱结合起来，对杜仲进行了质量控制研究。2013年，何兵等［19］也将一测多评法结合指纹图谱应用在对鱼腥草的质量评价研究中。这两种方法的结合有望成为适合中药特点的质量评价模式，但目前该方向的探索研究还较少，且不够深入，怎样将指纹图谱与一测多评更完美地结合起来仍需进一步的研究。

6 待测成分色谱峰的定位方法

应用一测多评法的关键问题之一是如何准确定位待测成分色谱峰。目前，常见的色谱峰定位方法有以下几种：（1）保留时间差法。假定待测成分与内参物的保留时间差值恒定，以此来定位待测成分［1，6，7，16］。此法适用性较低，应用较少，不建议采用。（2）相对保留时间法。假定待测成分与内参物的保留时间比值恒定，以此来定位待测成分［8-12］。在一测多评法研究中，大部分研究者采用此法，此法误差相对较小，为首选方法。（3）紫外光谱辅助法.对比待测成分的光谱图与标准谱图的方法，此法常结合相对保留时间法，可进一步提高定位准确度［20］。但此方法必须配备二极管阵列检测器，且结构相似光谱图差异较小者或无明显特征峰者无法使用此法，在应用时会受到限制。（4）质谱辅助法.对比待测成分的母离子、碎片离子等质谱信息和标准质谱信息的方法［13，14］。此法定位准确度较高，但必须与质谱仪联用，仪器价格、运行成本较高，因此目前采用的也很少。（5）定性对照品法.使用少量对照品对待测成分进行一一定位［21］，此法定位准确，检测成本也显著降低，但仍需提供所有的对照品，缺一不可，因此，本法未完全解决对照品的限制，应用很少，未能得到大面积推广。（6）双标线性校正法.在相同分析条件下，利用两种对照品建立多组分在不同液相色谱系统或不同色谱柱上保留时间的线性关系［5，19，22］。该方法由王龙星等［22］为了提高色谱指纹图谱保留时间重现性而首次提出，2012年，由何兵等［5］应用于一测多评法的色谱峰定位，结果表明，该方法明显优于相对保留时间法。此方法用一个定量对照品和一个定性对照品进行保留时间两点线性校正，不会显著增加对照品成本，定位又优于应用广泛的相对保留时间法，因此，该定位方法可能协助一测多评法以获更广的应用前景。

7 小结

一测多评法是一种方便、经济、高效的含量测定方法，它解决了中药对照品匮乏的瓶颈问题，实现了中药及其制剂的多组分定量，降低了实际生产中的检测成本，提高了中药及其制剂的质量标准，符合中药质量控制和评价模式的发展趋势，对推动中药现代化具有重要意义。

［1］王智民，高慧敏，付雪涛，等.一测多评法中药质量评价模式方法学研究［J］.中国中药杂志，2006，31（23）：1925-1928.

［2］王智民，钱忠直，张启伟，等.一测多评法建立的技术指南［J］.中国中药杂志，2011，36（6）：657-658.

［3］陆兔林，石上梅，蔡宝昌，等.基于一测多评的中药多成分定量研究进展［J］.中草药，2012，43（12）：2525-2529.

［4］高慧敏，宋宗华，王智民，等.适合中药特点的质量评价模式-QAMS研究概述［J］.中国中药杂志，2012，37（10）：405-416.

［5］何兵，杨世艳，张燕.一测多评中待测成分校正和定位的新方法研究［J］.药学学报，2012，47（12）：1653-1659.

［6］邹桂欣，尤献民，张颖，等.一测多评法在冠脉康胶囊多种成分检测中的应用研究［J］.中国中药杂志，2008，33（15）：1828-1831.

［7］李安平，杨锡，丁永辉，等.一测多评HPLC法测定丹参注射液中7个水溶性成分含量［J］.药物分析杂志，2012，32 （9）：1534-1540.

［8］付滢舟，冯有龙，曹玲，等.一测多评法测定速效救心丸中冰片的含量［J］.药物分析杂志，2012，32（5）：775-778.

［9］吉丽娜，冯伟红，王智民，等.一测多评法与外标法测定三黄片中4种黄芩黄酮类成分［J］.中成药，2012，34（11）：2128-2133.

［10］张亚非，王雪，毕宇安，等.一测多评法测定热毒宁注射液中9 种成分［J］.中草药，2013，44（22）：3162-3169.

［11］孔晶晶，朱晶晶，王智民，等.一测多评法测定连翘中多种不同类型成分的含量［J］.中国药学杂志，2010，45（17）：1301-1304.

［12］赵君颖，汪坤，张振凌.一测多评法比较不同黄连炮制品中4种生物碱的含量［J］.中国实验方剂学杂志，2012，18（18）：11-13.

［13］安士影，胡玉梅，苗宏伟，等.市售国内紫锥菊提取物质量评价［J］.中国中药杂志，2012，37（22）：3406-3410.

［14］魏锋，李启艳，马玲云，等.对照品替代法同时测定中药和保健食品中6种大豆异黄酮类成分的含量［J］.药物分析杂志，2009，29（5）：725-730.

［15］汪坤，张振凌，贾秀梅.一测多评法优选黄连最佳提取工艺［J］.中国实验方剂学杂志，2011，17（24）：9-11.

［16］于蓓蓓，吕凌，于宗渊，等.药效学结合正交试验优选黄芩提取工艺［J］.中国中药杂志，2013，38（24）：4314-4318.

［17］宋俊英，赵平鸽，蒋亚奇.一测多评法优选黄柏生物碱的超声提取工艺［J］.中华中医药学刊，2013，31（9）：2054-2056.

［18］林芳，王云红，万丽，等.一测多评法结合指纹图谱对杜仲质量控制的研究［J］.中国实验方剂学杂志，2012，18（13）：78-82.

［19］何兵，刘艳，田吉，等.指纹图谱结合一测多评模式在中药鱼腥草质量评价中的应用研究［J］.中国中药杂志，2013，38（16）：2682-2689.

［20］黄山君，杨琪伟，石燕红，等.一测多评法测定白芍中芍药苷与芍药内酯苷的含量［J］.中国中药杂志，2011，36（6）：780-783.

［21］王跃生，饶毅，魏慧珍，等.HPLC-“内标”多控法测定四逆散中芍药苷柚皮苷橙皮苷甘草酸和新橙皮苷［J］.中草药，2008，39（9）：1316-1319.

［22］孙磊，金红宇，逄瑜，等.双标多测法-双标线性校正技术用于色谱峰的定性［J］.药物分析杂志，2013，33（8）：1424-1430.

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1004-6879（2015）02-0157-03

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