早产儿应用rhEPO治疗支气管肺发育不良前后血液中IL-1β、TNF-α变化及意义

莫炜明 姚 臻 赵善和 潘竑旭 肖 波

支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia，BPD)，是一种常见于早产儿的慢性肺部疾病，死亡率比较高，幸存者往往伴有认知与行为障碍等后遗症。目前，BPD的发病机制还不是太清晰，可能与肺不成熟、感染、氧中毒等因素有关[1]。近年来，早产儿的BPD发病率在逐年上升，临床上一般使用rhEPO治疗早产儿支气管肺发育不良，rhEPO具有抗氧化、抗感染、抗凋亡、促进血管生成等作用，对早产儿肺部有很好的保护作用[2]。本院为了进一步证实rhEPO对BPD的治疗效果，选取80例患儿为研究对象，进行研究，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 随机选取2014年1月～2014年12月以来广西壮族自治区南溪山医院收治的80例早产儿患者，按照治疗方法的不同将他们均分为2组，即rhEPO组与非rhEPO组(n=40)；其中男 50例，女 30例；日龄 1～7d，吸氧＞72h，体质量900～1800g。所有患儿均排除呼吸道感染、严重先天性心脏病及中枢神经系统畸形等[3]；本组研究的所有患儿均征得其家长同意，并签订了知情同意书；所有患儿在性别、日龄、体质量方面差异无统计学意义，具有可比性。

1.2 仪器及设备 -20℃冰箱采用青岛Haier牌冰箱，加样器由宁波市镇海玻璃仪器厂生产（生产型号：108），氧浓度测定仪采用法斯达（无锡）公司生产的FO-2氧浓度检测仪，IL-1β、TNF-α检测试剂盒由北京中杉金桥生物技术公司代购。

1.3 标本采集 所有入选患儿在吸氧 1h、3d、7d3次采集血液。所有标本离心处理，3000r/min，10min，取上清液400μL放于 -20℃冰箱冻存备检[4]。

1.4 方法 给予 rhEPO 组患儿 1，3，5d 分别注射 rhEPO 500IU/kg，非rhEPO组患儿给予1，3，5d分别注射0.9%氯化钠0.5mL/次，其他治疗方法与rhEPO组相同；采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)对上述不同时间点所采集的血液标本进行IL-1β和TNF-α质量浓度的检测。具体步骤：首先取出存好的标本，在常温下将它融化为液体，按照说明书设置标准的抗体浓度；加入适量的稀释抗体标准和标本100μL至相应的孔内，然后封住反应孔，室温下放置120min；按洗涤方法洗板；除空白板以外，每板都应该按要求加入酶联物，按照要求在室温下放置具体时间，画出标准曲线，计算出血清样本的表达水平。需要注意的是整个操作过程最好由一人操作，以便减少误差[5]。

1.5 统计学方法 本次调查所有数据均采用软件SPSS 16.0进行统计分析，正态计量资料采用“”表示，组间比较采用t检验，P＜0.05为，2组数据差异具有统计学意义。

2 结果

在治疗的过程中，观察患儿血液中IL-1β、TNF-α的表达情况，发现rhEPO组患儿血液中IL-1β、TNF-α浓度明显低于非rhEPO组患儿，差异具有统计学意义（P＜0.05)。见表1。

表1 2组患儿血液中IL -1β、TNF-α的表达比较

3 讨论

支气管肺发育不良比较常见于较低体质量的早产儿，引发此病的原因可能与宫内感染以及高浓度辅助供氧有关。分娩过早，产妇会发生不同程度的绒毛膜羊膜炎，这样患儿易受肺部感染，影响患儿的微血管发育和肺泡化进程。另外，早产儿的抗氧化能力比较弱，如果吸入高浓度的氧气或者炎症反应等都可能引发氧化应激，从而损伤肺组织，影响肺的正常发育。

研究表明BPD与炎症反应有着密切的关系，而IL-1β和TNF-α是启动炎症反应的关键细胞因子[6]。TNF-α对肺有很强的毒性，它可以聚集炎症细胞、促使其他炎症细胞的产生，增强是炎症因子危害程度。IL-1β是肺损伤中另一个重要的炎症介质，它与TNF-α有相同机制的危害作用[7]。

rhEPO能有效的减少肺细胞损伤，增加肺组织的蛋白再生，对人体肺部有很好的保护作用。有研究表明rhEPO能有效的减轻高氧导致肺组织炎症损伤，改善肺部发育。高氧损伤肺主要表现为过度炎症反应和血管内皮细胞、肺泡上皮细胞凋亡，而rhEPO能有效的减少肺细胞凋亡、抑制炎症反应有保护作用[8]。所以近年来，临床一般采用rhEPO来治疗BPD。

本次研究中，经过7d的治疗，rhEPO组患儿血液中的IL-1β、TNF-α浓度明显低于非rhEPO组患儿，所以说rhEPO能减少炎症因子IL-1β和TNF-α表达，减少早产儿BPD发生率，从而减少患儿住院时间，降低医疗成本及患儿死亡率。

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[5] 刘漫君，张华，赵日红.重组人促红细胞生成素对宫内炎性暴露和高氧肺损伤新生大鼠细胞凋亡及PI3K表达的影响[J].临床儿科杂志,2013,31(2)：180-181.

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[8] 王伟.宫内炎性暴露对胎鼠及早产大鼠肺细胞凋亡的影响[J].临床医学，2009，29(10)：107-108.