轻度认知障碍和阿尔茨海默病血、尿β2-MG及尿mALB水平观察

谢冰许顺江王学义张睿王岚崔冬生

·短著述·

轻度认知障碍和阿尔茨海默病血、尿β2-MG及尿mALB水平观察

谢冰*许顺江*王学义△※张睿*王岚※崔冬生*

β2微球蛋白 微量白蛋白 轻度认知障碍阿尔茨海默病 肾功能

轻度认知障碍（mild cognitive impairment，MCI）是介于正常衰老和痴呆之间的一种中间状态，是一种认知障碍症候群。与年龄和教育程度匹配的正常老人相比，患者存在轻度认知功能减退，但日常能力没有受到明显影响。随着社会的老龄化，MCI已成为近年来研究阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）的热点问题[1]。文献报道慢性肾脏病患者存在认知功能损害[2-4]。然而，认知功能障碍患者是否存在早期肾功能改变，目前尚未见报道。目前通常采用血肌酐（creatinine，Cr）、尿素氮（blood urea ni⁃trogen，BUN）、尿蛋白等指标对患者的肾功能进行评估，但这些指标的改变往往提示肾脏病变已进展到一定程度。因此，本研究选择血清和尿液β2-微球蛋白（β2-microglobu⁃lin，β2-MG）以及尿液微量白蛋白（microalbumin，mALB）等更为敏感的指标来观察MCI和AD患者是否存在早期肾功能改变，并探讨这些指标与认知功能的相关性。

1 对象与方法

1.1 研究对象MCI组来自2010年12月至2012年12月河北省老年期痴呆发病因素调查中确诊的MCI患者。纳入标准：①年龄＞60岁；②符合国际MCI工作组标准（有认知功能减退的主诉或有知情人提供临床显著的认知功能减退；有记忆减退的客观检查证据；日常生活能力良好，日常生活能力量表＜26分；无痴呆）[5]；③根据既往史，3个月内未采取临床治疗措施；④听力及视力无明显障碍，能够顺利完成问卷调查。排除帕金森病、糖尿病、高血压、肿瘤、肾脏疾病、免疫系统疾病、血液系统疾病及脑外伤等患者。最终MCI组共计67例，其中男性32例，女性35例，年龄61～88岁，平均（67.45±5.02）岁。

AD组来自2011年1月至2012年12月在河北医科大学第一医院住院的AD患者。纳入标准：①年龄＞60岁；②符合《美国精神障碍诊断与统计手册第四版》（Diagnostic and Sta⁃tistical Manual of Mental Disorders,Fourth Edition，DSM-Ⅳ）中AD的诊断标准；③根据既往史，3个月内未采取临床治疗措施；④听力及视力无明显障碍，能够顺利完成问卷调查。排除标准同MCI组。最终AD组共计53例患者，其中男性26例，女性27例，年龄62～84岁，平均（68.98±5.69）岁。

对照者来自于2010年12月至2012年12月河北省老年期痴呆发病相关危险因素调查。纳入标准：①年龄＞60岁；②认知功能正常，通过量表初筛和临床评估不符合上述MCI和AD的入组标准；③根据既往史，3个月内未采取临床治疗措施；④听力及视力无明显障碍，能够顺利完成问卷调查。排除标准同MCI组。对照组共计82名，其中男性46名，女性36名，年龄60～87岁，平均（70.15±5.38）岁。

以上三组研究对象年龄（F=0.397,P=0.543）、性别（χ2= 1.196，P=0.550）及教育程度（χ2=4.452,P=0.189）差异无统计学意义。所有研究对象均签署知情同意书。

1.2 研究方法

1.2.1 认知功能评估 由神经科医生采用简易智能状态检查量表（mini-mental state examination，MMSE）和蒙特利尔认知评估量表（Montreal cognitive assessment，MoCA）对所有受试者进行认知功能评价。满足以下两个条件者定义为认知功能障碍：MMSE评分文盲8～20分，小学文化程度21～23分，中学及以上24～27分；同时MoCA得分＜26分[6]。

1.2.2 标本采集与处理 血液标本采集：所有受试者于清晨8时空腹采集静脉血3 mL于促凝管中，4℃离心15 min（转速3000 r/min）后分装血清，-86℃冰箱保存待检。尿液标本采集：所有受试者将膀胱尿排尽后饮水300～500 mL，收集饮水后1 h内全部尿液，充分混匀并准确称量尿量，离心15 min（转速3000 r/min）后取上清分装，-86℃冰箱保存待检。

1.2.3 β2-MG、mALB和BUN、Cr实验室检测 β2-MG和mALB采用放射免疫定量分析方法测定[7]，检测试剂盒购于北京北方生物技术研究所（试剂批号：20130820），采用北京核海高科技术开发公司γ免疫分析仪进行检测（型号：HH6003）。BUN和Cr的检测采用脲素酶速率、苦味酸速率法（试剂购于贝克曼公司，批号：Z310221，Z304216），由Beckman Dxc 800全自动生化分析仪检测。实验过程严格遵守说明书。

1.3 统计学方法用SPSS 17.0进行统计分析。各组间认知功能比较和β2-MG、mALB水平的比较采用方差分析，LSD法进行两两比较。采用Pearson相关分别分析β2-MG、mALB水平与认知功能的相关性。检验水准α为0.05，双侧检验。

2 结果

2.1 各组认知功能检查结果MCI组、AD组和对照组之间MMSE分值（F=5.177，P=0.007）和MoCA分值（F=86.986，P＜0.001）差异均具有统计学意义，经两两比较，MCI组和AD组患者MMSE和MoCA得分较对照组均降低（P＜0.05），见表1。

2.2 各组血清和尿液β2-MG及尿液mALB水平MCI组、AD组与对照组三者之间血清β2-MG（F=18.476，P＜0.001）、尿液β2-MG（F=17.273，P＜0.001）和尿液mALB（F=12.587，P＜0.001）水平的差异均具有统计学意义。AD组血清β2-MG水平较MCI组升高（P＜0.001），差异具有统计学意义。BUN和Cr在三组之间差异无统计学意义。见表2。

2.3 血清和尿液β2-MG及尿液mALB水平与认知功能的相关性 MCI组患者的MMSE和MoCA得分与血清β2-MG、尿液β2-MG和尿液mALB水平均未见统计学相关（均P＞0.05）。AD患者的MMSE（r=-0.272，P=0.034）和MoCA得分（r=-0.309，P=0.015）与血清β2-MG水平呈负相关；MMSE（r=-0.279，P=0.041）和MoCA得分（r=-0.355，P= 0.010）与尿液β2-MG水平呈负相关；AD患者的MMSE（r=-0.348，P=0.006）和MoCA得分（r=-0.618，P＜0.001）与尿液mALB水平呈负相关。见表3。

表1 MCI组、AD组和对照组MMSE和MoCA得分（±s）

表1 MCI组、AD组和对照组MMSE和MoCA得分（±s）

1）与对照组比较，经LSD-t检验，P＜0.05；2）与MCI组比较，经LSD-t检验，P＜0.05

M o C A 2 4 . 1 5 ± 2 . 3 81)1 7 . 3 1 ± 2 . 2 81)2)2 7 . 8 1 ± 2 . 8 9组别M C I组A D组对照组n 6 7 5 3 8 2 M M S E 2 7 . 0 2 ± 2 . 5 11)1 9 . 3 8 ± 2 . 1 11)2)2 8 . 6 8 ± 3 . 0 2

3 讨论

β2-MG是由100个氨基酸残基组成的单链多肽低分子蛋白。可由肾小球自由滤过，β2-MG约99.9%在近端肾小管重吸收并降解，不会重新进入血液循环。因此，在正常人的血液和尿液中是极微量的。血清β2-MG的升高提示肾小球滤过功能受损或滤过负荷增加，是反映肾小球滤过功能比较灵敏的指标，各种原发或继发性肾小球病变累及肾小球滤过功能时均可使血β2-MG增高，与肾小球滤过率呈负相关。近端肾小管是β2-MG在体内处理的唯一场所，近端肾小管轻度受损时，尿液β2-MG明显增加，而且尿液β2-MG与肾小管重吸收率有关。尿液中β2-MG增高，则提示肾小管近端损害[8-9]。因此β2-MG可以作为早期肾损害的检测指标。尿液中mALB，在生理条件下含量很少。微量白蛋白尿反映肾脏出现异常蛋白质渗漏[10]，一旦滤过屏障受损，mALB滤过量会增多，原尿中mALB含量超过肾小管重吸收的阈值，尿中便可检测出mALB。尿mALB也是反映肾功能损害的敏感指标之一。

表2 三组血清和尿液β2-MG水平以及尿液mALB水平（±s）

表2 三组血清和尿液β2-MG水平以及尿液mALB水平（±s）

1）与对照组比较，经LSD-t检验，P＜0.05；2）与MCI组比较，经LSD-t检验，P＜0.05

组别M C I组A D组对照组n 6 7 5 3 8 2血清β2-M G（m g / L）3 . 4 0 ± 1 . 0 11)4 . 2 2 ± 1 . 4 51)2)2 . 7 9 ± 0 . 8 2尿液β2-M G（m g / h）4 . 1 3 ± 1 . 5 71)4 . 9 9 ± 2 . 0 11)2 . 5 3 ± 0 . 8 7尿液m A L B（μ g / h）3 6 2 . 3 9 ± 1 1 5 . 6 11)3 8 1 . 3 0 ± 1 1 6 . 1 81)2 5 6 . 7 1 ± 9 5 . 6 9 B U N（m m o l / L）4 . 2 4 ± 0 . 8 0 4 . 5 6 ± 1 . 1 0 4 . 1 6 ± 1 . 1 0 C r（m m o l / L）6 7 . 4 7 ± 1 1 . 3 7 6 7 . 1 7 ± 1 4 . 9 4 6 4 . 7 0 ± 1 3 . 8 4

本研究表明，MCI患者和AD患者血清和尿液β2-MG以及尿液中mALB水平均较对照组升高；血清和尿液β2-MG以及尿液中mALB水平均与AD患者的认知功能呈负相关。本文所有对象无帕金森病、糖尿病、高血压、肾脏疾病及免疫系统疾病，且尿蛋白检查阴性，血常规、肝功能正常，排除了可能引起血清和尿液β2-MG以及尿液中mALB水平改变的疾病，其检查结果真实反映了MCI和AD患者肾功能情况。

研究结果说明MCI和AD患者存在早期肾脏功能改变，而且AD组血β2-MG水平高于MCI组，提示血β2-MG水平可能与疾病相关，AD组与MCI组相比尿中β2-MG和mALB的水平虽然差异没有统计学意义，但有增高的趋势。在既往研究中我们发现，同属脑退行性疾病的帕金森病亦有肾功能的改变[11-12]，因此本研究并没有将患有帕金森病患者纳入。Sajjad等[13]研究发现尿白蛋白/肌酐比值增高者在认知功能方面的下降速度是其他人的2～7倍。Seliger等[14]对477例老年慢性肾脏病患者进行长达6年的随访发现，中等程度的肾功能不全可使痴呆的患病风险增加37%。此外，近年来有报道显示，β2-MG可以通过抑制脑组织中β淀粉样蛋白的聚积，防止认知损害的发生，β2-MG水平增高与认知功能损害有关[15-16]。有研究发现早期AD患者存在肾功能的改变[17-18]。本研究也证实在MCI和AD患者中存在肾脏功能的早期改变。但究竟是肾脏疾病引起的认知功能损害还是认知功能损害引起的肾脏功能改变，目前尚不清楚。在未来如何继续研究二者关系是一个值得探讨的问题。

综上所述，MCI和AD患者血清和尿液β2-MG以及尿液mALB水平明显升高，且血中BUN和Cr正常，提示MCI和AD患者存在早期肾功能损害。

[1]Petersen RC.Mild cognitive impairment as a diagnostic entity[J]. J Intern Med,2004,256(3):183-194.

[2]李静,李月春,王宝军,等.慢性肾脏病对认知功能障碍影响的Meta分析[J].疾病监测与控制,2014,12(8):27-30.

[3]魏媛媛,程文荣,梁志锋,等.慢性肾脏病不同分期患者认知功能水平的研究[J].中国血液净化,2013,2(12):66-69.

[4]Romijn MD,van Marum RJ,Emmelot-Vonk MH,et al.Mild chronic kidney disease is associated with cognitive function in patients presenting at a memory clinic[J].Int J Geriatr Psychia⁃ try,2014[2014-11-04].http://dx.doi.org/10.1002/gsp.4226.

[5]黄若燕,唐牟尼,佘生林,等.画钟测验在认知障碍老人中的鉴别作用[J].中国神经精神疾病杂志,2013,39(8):458-462.

[6]孙云闯,秦斌.中文版MoCA和MMSE在诊断遗忘型轻度认知功能障碍中的应用[J].中国神经免疫学和神经病学杂志, 2011,18(2):91-93.

[7]常新剑,任俊宏.放射免疫分析法原理及操作注意事项[J].实用医技杂志,2006,13(12):2172-2173.

[8]马智鸿,黄飚,张珏,等.尿清蛋白、β2微球蛋白的双标记TrFIA法的建立[J].临床检验杂志,2009,27(5):360-362.

[9]李咏梅,张之芬.测定CystatinC和β2-微球蛋白的颗粒增强透射免疫比浊试剂盒抗干扰性能评价[J].临床检验杂志, 2012,3(9):715-717.

[10]潘静,魏明竟.尿液微量白蛋白的研究近况[J].临床检验杂志,2003,21(5):316-317.

[11]崔冬生,顾平,王彦永,等.帕金森病患者血、尿β2微球蛋白变化[J].临床荟萃,2007,22(17):1233-1235.

[12]时军,许顺江,耿媛.帕金森病患者尿白蛋白、α1-微球蛋白变化的临床研究[J].河北医药,2010,32(20):2816-2817.

[13]Sajjad I,Grodstein F,Kang JH,et al.Kidney dysfunction and cognitive decline in women[J].Clin J Am Soc Nephrol,2012,7 (3):437-443.

[14]Seliger SL,Sarnak MJ.Subclinical vascular disease of the brain in dialysis patients[J].Am J Kidney Dis,2007,50(1):8-10.

[15]Ahn M,Kang S,Koo HJ,et al.Nanoporous protein matrix made of amyloid fibrils of β2-microglobulin[J].Biotechnol Prog,2010, 26(6):1759-1764.

[16]Raman B,Ban T,Sakai M,et al.αB-crystallin,a small heat-shock protein,prevents the amyloid fibril growth of an amy⁃loid β-peptide and β2-microglobulin[J].Biochem J,2005,392 (Pt 3):573-581.

[17]Gleichmann M,Zhang Y,Wood WH,et al.Molecular changes in brain aging and Alzheimer's disease are mirrored in experimen⁃tally silenced cortical neuronnetworks[J].Neurobiol Aging,2012, 33(1):205.e1-18.

[18]Soysal P,Isik AT,Buyukaydin B,et al.A comparison of end-stage renal disease and Alzheimer's disease in the elderly through a comprehensive geriatric assessment[J].IntUrol Nephrol,2014,46(8):1627-1632.

R749.16 (

2014-09-04）

A （责任编辑:肖雅妮）

10.3936/j.issn.1002-0152.2015.01.012

* 河北医科大学第一医院中心实验室（石家庄 050031）△河北省脑老化与认知神经科学实验室

※ 河北医科大学第一医院精神卫生科