高纯度(98．5% )夫沙那韦-d4的合成*

时　磊，沈加林，沈小明，吕爱娟，陈礼勤(．南京地质矿产研究所，江苏南京　006; ．南京靖龙医药技术有限公司，江苏南京　800)

高纯度(98．5% )夫沙那韦-d4的合成*

时磊1，沈加林1，沈小明1，吕爱娟1，陈礼勤2
(1．南京地质矿产研究所，江苏南京210016; 2．南京靖龙医药技术有限公司，江苏南京211800)

摘要:以硝基苯-d5为原料，经还原、保护、磺酰化、脱保护、氧化和亲核取代反应制得中间体——对硝基苯磺酰氯-d4(7)。以(2R，3S) -N-叔丁氧羰基-3-氨基-1，2-环氧-4-苯基丁烷为原料，经开环反应制得(1S，2R) -N-［1-苯甲基-2-羟基-3-(异丁胺基)丙基］氨甲酸叔丁酯(9) ; 9与7经磺化反应合成(2R，3S) -N-［(3-氨基-2-羟基-4-苯基)丁基］-N-异丁基-4-硝基苯磺酰胺盐酸盐-d4(10) ; 10依次经酰化、磷酰化、加氢还原和醋酸钙成盐反应合成了夫沙那韦-d4，总收率33%，纯度98．5%，其结构经1H NMR和EI-MS确证。

关键词:药物中间体;夫沙那韦-d4;合成

夫沙那韦钙盐［(1S，2R) -3-(4-氨基苯磺酰基) (2-甲基丙基)氨基-1-苯甲基-2-膦酰氧基-丙基-氨基甲酸(3S)四氢-3-呋喃酯钙盐(Ⅰ)］是由英国GSK和美国Vertex公司共同研发的高效蛋白酶抑制剂［1－2］。Ⅰ既可直接用于艾滋病治疗，也是合成安普那韦的前体药物［3－4］。Ⅰ水溶性良好，不良反应少［5－6］。

高纯度夫沙那韦-d4(14)可作为Ⅰ的内标，用于其生物利用率和药物代谢的研究［7］。目前，Ⅰ的相关合成工艺较为成熟，但14的合成报道相对较少。胡娟等［1］以L-苯丙氨酸为原料，经11步反应合成了Ⅰ，总收率10%。该路线反应时间长、产率低、后处理复杂。Emile等［8］以(2S，3S) -N-叔丁氧羰基-3-氨基-1，2-环氧-4-苯基丁烷为原料，成功合成了安普那韦，但未介绍羟基磷酰化的方法。Smiles等［9］以五氯化磷作磷酰化试剂，将对硝基苯磺酸转化为对硝基苯磺酰氯，产率高，操作简单。

Scheme 1

在此基础上，本文设计了一条简便、经济、条件温和的合成14的反应路线。以硝基苯-d5(1)为原料，经还原、保护、磺酰化、脱保护、氧化和亲核取代反应制得中间体——对硝基苯磺酰氯-d4(7)。以(2R，3S) -N-叔丁氧羰基-3-氨基-1，2-环氧-4-苯基丁烷(8)为原料，经开环反应制得(1S，2R) -N-［1-苯甲基-2-羟基-3-(异丁胺基)丙基］氨甲酸叔丁酯(9) ; 9与7经磺化反应合成(2R，3S) -N-［(3-氨基-2-羟基-4-苯基)丁基］-N-异丁基-4-硝基苯磺酰胺盐酸盐-d4(10) ; 10依次经酰化、磷酰化、加氢还原和醋酸钙成盐反应合成了14(Scheme 1)，总收率33%，纯度98．5%，其结构经1H NMR和EI-MS确证。

1　实验部分

1．1仪器与试剂

Buchi Melting Point B-545型熔点仪(温度未校正) ; Bruker-300 MHz型核磁共振仪(CDCl3为溶剂，TMS为内标) ; Agilent 1100型高效液相色谱仪。

所用试剂均为分析纯。

1．2合成

(1)苯胺-d5(2)的合成

在反应瓶中加入1 12．0 g(0．1 mol)和MeOH 120 mL，搅拌使其溶解;氮气保护下加入甲酸铵30．7 g(0．49 mmol)，于室温反应5 min。加入10% Pd/C 1．2 g，回流反应15 min。冷却至室温，抽滤，滤饼用甲醇洗涤，合并滤液和洗液，常压蒸馏得无色油状液体2 8．8 g，收率98．3 %。

(2)乙酰苯胺-d5(3)的合成

在反应瓶中加入2 8．8 g(89．8 mmol)，冰浴冷却，氮气保护下加入乙酸酐20．2 g (197．8 mmol)，搅拌下于室温反应2．5 h。冷却至室温，用饱和NaHCO3溶液(约50 mL)调至pH 7，用CH2Cl2(3×80 mL)萃取，合并萃取液，用饱和食盐水(150 mL)洗涤，无水Na2SO4干燥，蒸除溶剂得白色晶体3 12．5 g，收率99．2%，m．p．113℃～115℃。

(3)对乙酰胺基苯磺酰氯-d4(4)的合成

在反应瓶中加入3 6．0 g(42．9 mmol)，冰盐浴冷却，氮气保护下滴加氯磺酸53．6 g (460 mmol)，滴毕，于室温反应3 h［TLC检测，展开剂: V(乙酸乙酯)∶V(石油醚) = 1∶1］。冷却至15℃，搅拌下将反应液缓慢加入冰水中，析出大量白色固体，抽滤，滤饼用水(50 mL)洗涤，干燥得白色固体4 6．7 g，收率65．7%，m．p．147℃～149 ℃;1H NMR δ: 2．18(s，3H，CH3)。

(4)对氨基苯磺酸-d4(5)的合成

在反应瓶中加入4 13．0 g(57 mmol)和10% NaOH溶液300 mL，搅拌下于95℃反应3 h。冷却至室温，于15℃用10%HCl(约25 ml)调至pH 1～2，折出固体。抽滤，滤饼用5℃～8℃冷水(20 mL)洗涤，干燥得白色固体5 8．3 g，收率87．0%，m．p．279℃～281℃。

(5)对硝基苯磺酸-d4(6)的合成

在反应瓶中加入5 0．7 g(4 mmol)和冰醋酸5．6 mL，搅拌使其溶解;冰浴冷却，氮气保护下加入30% H2O25．6 mL，回流(80℃)反应4．5 h ［TLC检测，展开剂: V (2%氯化氢的甲醇溶液)∶V(二氯甲烷) = 1∶2］。冷却至室温，蒸除溶剂，残余物干燥得黄色固体6(不纯化，直接投入下一步反应) 0．76 g，m．p．107℃～112℃; EIMS m/z(%) : 205．0(8)，206．0(100)，207．0 (8)，208．0(5)。

(6) 7的合成

在反应瓶中加入6 0．5 g(2．4 mmol)和1，2-二氯乙烷7 mL，搅拌使其溶解;氮气保护下加入五氯化磷1．0 g(4．8 mmol)，于65℃反应2．5 h。冷却至室温，蒸除溶剂，残余物干燥得黄色固体7 0．51 g，收率94．3%，m．p．75℃～80℃; EI-MS m/z(%) : 223．0(11)，224．0(100)，225．0(9)，226．0(6)。

(7) 9的合成

在反应瓶中加入8 1．2 g(5 mmol，纯度＞99 %)和无水乙醇15 mL，搅拌使其溶解;加入异丁胺6．6 mL(7．5 mmol)，氮气保护下回流(78℃)反应1 h。冷却至室温，减压蒸除溶剂得白色固体9 1．53 g，收率99．8%。

(8) (2R，3S) -N-［(3-氨基-2-羟基-4-苯基)丁基］-N-异丁基-4-硝基苯磺酰胺盐酸盐-d4(10)的合成

在反应瓶中加入9 1．27 g(3．8 mmol)和干燥甲苯9 mL，搅拌使其溶解;氮气保护下于80℃滴加三乙胺0．42 g(4．2 mmol)，滴毕，于90℃缓慢滴加7 1．0 g(4．5 mmol)的甲苯(4 mL)溶液，滴毕，反应2 h(TLC检测)。降温至80℃，缓慢滴加浓盐酸0．4 mL，滴毕，回流反应1 h。加入浓盐酸0．3 mL，反应0．5 h。蒸除溶剂，残余物加入乙酸乙酯6 mL，于60℃反应0．5 h。冰浴冷却，析出大量白色固体，抽滤，滤饼用冷乙酸乙酯(3 mL)洗涤，干燥得白色固体10 1．4 g，收率80．5%。

(9) (1S，2R) -3-(4-硝基苯磺酰基) (2-甲基丙基)氨基-1-苯甲基-2-羟基-丙基-氨基甲酸(3S)四氢-3-呋喃酯-d4(11)的合成

在反应瓶中加入三光气(BTC) 0．56 g(1．9 mmol)的二氯甲烷(15 mL)溶液，冰浴冷却至0℃～5℃;氮气保护下加入(S) -3-羟基四氢呋喃0．5 g(5．7 mmol)和三乙胺0．57 g(5．7 mmol)，于室温反应3 h。减压蒸除溶剂，残余物用二氯甲烷(50 mL)溶解，加入10 2．3 g(5 mmol)，于10℃滴加三乙胺1．4 g(14 mmol)，于室温反应1 h;回流反应1 h(TLC检测)。减压蒸除溶剂，残余物加水30 mL，用二氯甲烷(3×25 mL)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(10 mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液蒸干后用混合溶剂［V(乙酸乙酯)∶V(乙醇) =4∶1，16 mL］重结晶得白色固体11 2．2 g，收率82．1%;H NMR δ: 7．25(m，5H，ArH)，4．96～4．79(m，1H)，4．11(m，1H)，3．89～3．65(m，4H)，3．49～3．3(m，2H)，3．18～2．70(m，5H)，2．60～2．49(m，1H)，2．11～1．87 (m，3H)，1．30～1．15(m，1H)，0．94～0．85(m，6H，CH3)。

(10) (1S，2R) -3-(4-硝基苯磺酰基) (2-甲基丙基)氨基-1-苯甲基-2-膦酰氧基-丙基-氨基甲酸(3S)四氢-3-呋喃酯-d4(12)的合成

在反应瓶中加入11 1．0 g(1．9 mmol)和干燥吡啶50 mL，搅拌使其溶解;冰浴冷却至0℃～5℃，氮气保护下加入三氯氧磷1．72 g (11．2 mmol)，于室温反应2．5 h(TLC检测)。冰浴冷却至5℃，加水20 mL，用甲基异丁基酮(3×30 mL)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(25 mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液蒸干后用甲基异丁基酮(50 mL)溶解，于室温滴加6 mol·L－1盐酸2 mL，滴毕，剧烈搅拌下于50℃反应2．5 h。冷却至室温，加水20 mL，静置分层，水相用甲基异丁基酮(2×30 mL)萃取，合并有机相，用饱和食盐水(20 mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液蒸干得淡黄色固体12 1．0 g，收率84．7%。

(11) (1S，2R) -3-(4-氨基苯磺酰基) (2-甲基丙基)氨基-1-苯甲基-2-膦酰氧基-丙基-氨基甲酸(3S)四氢-3-呋喃酯-d4(13)的合成

在反应瓶中加入12 0．3 g(0．5 mmol)和甲醇7．5 mL，搅拌使其溶解;加入10%Pd/C 0．15 g，常压下通入氢气，于室温反应5 h［TLC检测，展开剂: V(二氯甲烷)∶V(甲醇) = 4∶1，醋酸2～3滴］。过滤，滤饼用甲醇(10 mL)洗涤，合并滤液和洗液，减压蒸除溶剂，剩余物干燥得白色固体13 0．27 g，收率91．5 %。

(12) 14的合成

在反应瓶中加入13 0．5 g(0．9 mmol)和甲醇10 mL，搅拌使其溶解;滴加一水合醋酸钙0．27 g (1．7 mmol)的水(2 mL)溶液，滴毕，于室温反应15 min。用5% NaOH溶液调至pH 8～9，析出大量白色固体，加水2 mL，搅拌10 min;抽滤，滤饼用50%乙醇洗涤，干燥得白色固体14 0．34 g，收率64．2%，纯度＞98．5%，同位素丰度98．2%;1H NMR δ: 7．36～7．28(m，5H)，4．96～4．79 (m，1H)，4．49(m，1H)，4．29～4．16(m，1H)，3．89～3．55(m，4H)，3．42～3．33(m，2H)，3．16～2．90(m，3H)，2．75～2．60 (m，1H)， 2．11～1．85(m，2．5H)，1．30～1．15(m，0．5H)，0．85～0．79(m，6H) ; EI-MS m/z(%) : 587．1 (7)，588．1(100)，589．1(30)，590．1(10)。波谱数据与文献［1］一致。

2　结果与讨论

首次以1原料，合成了高同位素丰度的7。用Pd/C-甲酸铵替代常规的Pd/C-H2还原硝基，反应更迅速，产率更高。氯磺酸与3发生亲电取代反应时应适当控制温度，避免因反应过于剧烈而导致氘原子丢失。用30% H2O2氧化氨基时，需用TLC即时监控，反应时间过长，副产物大量增加，难以纯化。

使用三光气取代羰基二咪唑进行酰化反应，大大缩短了反应时间，提高了产率。最后使用一水合醋酸钙水溶液成盐，只需调至pH为弱碱性，并多次重结晶达到高纯度和高同位素丰度。整个合成路线操作简便，所有步骤均只需重结晶提纯。

参考文献

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·综合评述·

Synthesis of High Purity(98．5%) Fosamprenavir-d4

SHI Lei1，SHEN Jia-lin1，SHEN Xiao-ming1，LÜAi-juan1，CHEN Li-qin2
(1．Nanjing Research Institute of Geology and Mineral Resources，Nanjing 210016，China; 2．Nanjing Jinglong Pharmaceutical Technology Co．，Ltd．，Nanjing 211800，China)

Abstract:An intermediate，p-nitrobenzenesulfonyl chloride-d4(7)，was obtained by reduction，protection，sulfonylation，deprotection，oxidation and nucleophilic substitution，using nitrobenzene-d5as starting material．(1S，2R) -N-［1-benzyl-2-hydroxy-3-(isobutylamine) propyl］tert-butyl carbamate (9) was prepared by ring-opening reaction from (2R，3S) -N-Boc-3-amino-1，2-epoxy-4-phenylbutane．(2R，3S) -N-［(3-amino-2-hydroxy-4-phenyl) butyl］-N-isobutyl-4-nitrobenzene sulphonamide hydrochloride-d4(10) was synthesized by sulfonation reaction of 9 with 7．Fosamprenavir-d4，in total yield of 33% and purity of 98．5%，was synthesized by acylation，phosphorylation，hydrogenation reduction and salification from 10，respectively．The structures were confirmed by1H NMR and EI-MS．

Keywords:drug intermediate; Fosamprenavir-d4; synthesis

作者简介:时磊(1983－)，男，汉族，江苏南京人，硕士，主要从事药物合成和有机分析的研究。E-mail: njdkssl@163．com

*收稿日期:2014-10-30;

修订日期:2015-06-10

中图分类号:O625．75; R914．5

文献标识码:A

DOI:10．15952/j．cnki．cjsc．1005－1511．2015．07．0668