亚低温治疗缺氧缺血性脑病新生儿中基质金属蛋白酶-9及行为神经评分的变化及意义

姚爱敏 夏丽娟 李建玲 司志梅 姚亮 杨红静 王叶青

亚低温治疗缺氧缺血性脑病新生儿中基质金属蛋白酶-9及行为神经评分的变化及意义

姚爱敏 夏丽娟 李建玲 司志梅 姚亮 杨红静 王叶青

目的 观察选择性头部亚低温治疗新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)中水平基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及行为神经评分(NBNA)的变化。方法 50例中重度HIE患儿, 随机分为常规治疗组和亚低温治疗组, 各25例, 分别在入院时和入院后3、14 d采集静脉血, 收集血清应用ELISA法检测MMP-9的水平；同时比较两组患儿同时间点的NBNA评分。结果 入院时两组MMP-9比较及NBNA评分比较差异无统计学意义(P＞0.05)；3 d后常规组MMP-9继续升高而亚低温组无明显变化, 亚低温组NBNA无明显变化而常规组继续降低；14 d后两组MMP-9均下降, 但亚低温组明显低于常规组, 两组NBNA评分均增加, 而亚低温组明显高于常规组；血清MMP-9水平与NBNA评分呈显著负相关(r1=-0.825, r2=-0.846, r3=-0.857, P＜0.05)。结论 选择性头部亚低温治疗可通过抑制MMP-9的水平而有效降低缺氧缺血后脑损伤的程度, 进而改善患儿行为神经能力。

亚低温治疗；行为神经评分；基质金属蛋白酶-9；新生儿；缺氧缺血性脑病

研究已证实亚低温可抑制氧自由基的连锁反应, 减少氧自由基的生成, 而MMP-9通过氧自由基等炎性介质激活, 本研究通过检测MMP-9及行为神经评分在选择性头部亚低温治疗中的变化, 并比较二者的相关性, 探讨局部亚低温治疗在治疗缺氧缺血性脑病时对MMP-9及新生儿行为神经评分的影响［1-3］。

1 资料与方法

1.1 一般资料 实验研究对象来源于2013年10月～2014年6月在保定市妇幼保健院新生儿重症监护中心(NICU)收治的中重度HIE新生儿50例, 因重度窒息并发HIE于生后6 h内入院(生后5 min Apgar评分≤5分, 生后短时间内有临床神经系统症状和体征)。随机将患儿分成常规组和亚低温组, 各25例；两组间胎龄、体重、性别比例、Apgar评分、入院时血气pH值等病例资料比较差异无统计学意义(P＞0.05), 具有可比性。见表1。排除标准：先天畸形、颅内出血、贫血、严重宫内、产时感染等。治疗均经家属同意,治疗方案经保定市妇幼保健院伦理委员会批准。

1.2 方法 选择性亚低温治疗组除按HIE常规治疗外,在入院时采用选择性头部亚低温治疗, 应用半导体循环水降温仪将降温帽包裹于患儿头部, 水温控制在6～12℃, 将皮肤温度探头固定在前额正中, 使体表皮肤温度维持在(33.5±0.5)℃, 肛温(34.0±0.5)℃, 持续治疗72 h, 停止亚低温治疗后自然复温, 必要时远红外辐射台复温, 复温速度0.2～0.5℃/h.24 h复温至36.5℃左右。常规治疗组除不予局部亚低温治疗外, 余治疗与亚低温组相同。所有患儿在入院时、第3 天(即亚低温治疗满72 h)、第14天采集静脉血1 ml, 注入普通试管.3 000 r/min离心10 min, 取血清置于-70℃冰箱保存, 应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中MMP-9的水平, 操作严格按照试剂盒说明书进行。

1.3 试剂盒与仪器 MMP-9的ELISA试剂盒由北京博凌科为生物科技有限公司生产, 实验仪器由河北大学职工医学院实验室提供。亚低温治疗仪系长春市长江科技中心生产。

1.4 观察指标 检测血清MMP-9水平及NBNA评分：在室温(25～27℃)、半暗的安静环境中, 由1名经过训练的新生儿科医师采用鲍秀兰制定的20项新生儿行为神经测查法对所有入选患儿于入院时和治疗3、14 d后进行NBNA评分。

1. 5 统计学方法 采用SPSS13.0统计学软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差(±s)表示, 采用t检验。指标的相关性分析采用直线相关分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

入院时两组MMP-9比较及NBNA评分比较差异无统计学意义(P＞0.05)；3 d后常规组MMP-9继续升高而亚低温组无明显变化, 亚低温组NBNA无明显变化而常规组继续降低；14 d后两组MMP-9均下降, 但亚低温组明显低于常规组, 两组NBNA评分均增加, 而亚低温组明显高于常规组；血清MMP-9水平与NBNA评分呈显著负相关(r1=-0.825, r2= -0.846, r3=-0.857, P＜0.05)。

3 讨论

HIE是由于围生期窒息导致的脑部缺氧缺血性损害, 发病机制复杂, 病理过程包括原发性损伤和再灌注损伤。而自由基连锁反应是脑缺血再灌注损伤的核心环节。近来研究表明, 脑缺血再灌注后, 氧自由基及炎性介质产生增多, 激活MMP-9, 对细胞外基质造成不良影响, 从而破坏血脑屏障的完整性, 导致神经元及脑细胞方面的损伤 。

目前认为NBNA评分在早期发现新生儿脑损伤及预测后遗症方面具有良好的敏感性及特异性［3］, 目前规定NBNA满分40分, ≥35分为正常, ＜35分为异常。本文两组新生儿入院时NBNA评分比较差异无统计学意义(P＞0.05)；治疗3 d后常规治疗组NBNA评分较前继续降低, 而亚低温治疗组较前无明显变化；治疗14 d后两组NBNA评分均上升, 但与常规治疗组比较亚低温治疗组上升幅度明显, 差异有统计学意义(P＜0.05)。研究进一步将NSE与NBNA评分进行相关性分析,结果显示NSE水平变化与NBNA评分呈明显负相关(r1=-0.825, r2=-0.846, r3=-0.857, P＜0.05)。

综上所述, 结果提示局部亚低温治疗具有神经保护作用, 对脑功能恢复有促进作用, 且在观察时间段内MMP-9与NBNA评分呈明显负相关性, 支持MMP-9的水平变化可以反应亚低温治疗的疗效。研究中发现两组患儿NBNA评分均值仍低于35分, 说明对于中、重度HIE患儿仍需进行后期康复训练指导, 这对于减轻和预防HIE后遗症, 提高患儿生存质量有积极作用, 值得临床推广。

［1］ 孙梦思, 赵玲. 亚低温治疗新生儿缺氧缺血性脑损伤的研究进展.江西医学院学报.2003.143(2):123-125.

［2］ 毛玲, 查运红, 梅元武.基质金属蛋白酶-9与脑缺血血脑屏障损伤的关系.国际神经病学神经外科学杂志.2006.33(1):96-97.

［3］ 崔彦存, 刘翠青, 李莉, 等.头部亚低温对新生儿缺氧缺血性脑病氧化应激损伤和行为神经评分的影响.中国新生儿科杂志.2012.27(3):153-156.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.06.062

2014-10-29］

071000 保定市妇幼保健院新生儿科(姚爱敏

李建玲 司志梅 姚亮 王叶青)；易县疾病控制中心(夏丽娟)；曲阳县人民医院儿科(杨红静)