组织病理诊断中应用免疫组化技术的价值分析

【摘要】 目的 对组织病理诊断中应用免疫组化技术的应用价值进行探讨分析。方法 将56例肿瘤患者随机分为观察组和对照组，对照组患者运用活检穿刺法，观察组患者运用免疫组化法，对比两种方法阳性率。结果 观察组的阳性率显著高于对照组（P＜0.05）。结论 应用免疫组化技术进行组织病理诊断，能够提高阳性率，可推广。

【文献标识码】B

【文章编号】1674-9308（2015）05-0177-01

doi：10.3969/j.issn.1674-9308.2015.05.147

作者单位：130021长春，吉林省肿瘤医院

通讯作者：吴巍，E-mail：wuwei123@163.com

Analysis on Using Immunohistochemistry Technique in Tissue Pathology Diagnosis

GUO Haiyan　GUO Lili　WANG Zhisheng WU Wei, The tumor hospital of Jilin Province, Changchun 130021, China

[Abstract] Objective　To explore the application value of analysis of histopathologic diagnosis in immunohistochemical technique. Methods 56 cases of tumor patients were randomly divided into observation group and control group, the control group patientsby biopsy method, the observation group patients using immunohistochemistry method, the positive rate of comparison of two methods. Results The positive rate of the observation group was significantly higher than that of the control group (P<0.05). Conclusion Immunohistochemical technique for histopathological diagnosis, can improve the positive rate, can be extended.

[Key words] Immunohistochemical technique, Pathological diagnosis, Positive rate

随着各种抗体新用途的不断增多以及新型抗体种类的不断增加，在病理诊断中，免疫组化技术在对肿瘤进行诊断、鉴别、分类以及预后判断等方面发挥着重要作用 [1]。但免疫组化技术具有一定局限性，为将免疫组化技术在组织病理诊断中的作用充分发挥出来，需要对免疫组化原理、技术进行深入研究。笔者对组织病理诊断中应用免疫组化技术的价值进行探讨，报告如下：

1　资料与方法

1.1　一般资料

选取我院2010年2月～2013年2月收治的56例肿瘤患者作为研究对象，所有患者均符合WHO制定的诊断标准。随机分为观察组和对照组，每组各28例，其中，男36例，女20例，年龄24～62岁，平均年龄（41.1±3.6）岁；平均病程8个月；15例肝细胞肝癌，35例转移性肿瘤，4例肝内胆管癌，2例血管瘤；两组患者以上四项资料对比无显著性差异（P＞0.05），具有可比性。

1.2　方法

对照组患者给予穿刺活检；观察组患者给予免疫组化技术，详细步骤如下：

使用试剂主要包括10%中性缓冲甲醛固定液、透明液、脱水液、蒸馏水、浸蜡液、中性树胶以及UltrasenSitiveTM SP试剂等。首先固定切片：每例患者取一块规格为1 cm×2 cm×0.2 cm的组织，使用10%中性缓冲甲醛固定液固定2 h，使用透明液透明1 h，脱水液脱水1 h，浸蜡液1 h，然后使用石蜡包埋，运用常规切片法进行切片，厚度约为2 μm；免疫组化染色：固定好切片脱蜡处理后，使用3%双氧水在室温下孵育十分钟，然后使用蒸馏水洗涤三分钟，三次后，再使用高压锅修复两分钟，将高压锅温度控制为110℃；使用PBS洗涤五分钟，三次后，放置37℃室温下孵育两个小时，再次使用PBS进行洗涤，并加入UltrasenSitiveTM SP试剂；使用37℃孵育后，DAB显色，运用蒸馏水进行冲洗；最后使用中性树胶进行封固。

1.3　阳性诊断标准 [2]

阳性：免疫组化染色为棕黄色。

1.4　统计学分析

采用SPSS17.0软件进行数据的统计与分析，计数资料采用χ 2检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2　结果

观察组：经免疫组化染色后，患者细胞结构为变异型性，其中，24例患者AFP（α-Fetoprotein）和Glypican-3为阳性，阳性率为85.7%，同于手术检查结果；对照组：14例患者AFP（α-Fetoprotein）和Glypican-3为阳性，阳性率为50.0%，观察组的阳性率显著高于对照组（P＜0.05）。

3　讨论

在病理诊断中，免疫组织化学技术是其中的一种常用法，对各种肿瘤进行诊断的准确率较高。免疫组织化学染色为一种新型的病理技术，其操作受到环境因素影响较大，如易受到固定剂、抗原修复、切片、时间、温度以及人为等方面因素影响，进而导致病理诊断结果出现误诊。因此，为有效提高诊断正确率，需要严格根据以下标准进行操作：（1）组织固定：在组织固定中，主要使用10%中性缓冲甲醛固定液，与甲醛固定液相比，其具有固定好、固定时间久的优点，且在三个月内，其阳性率较稳定；（2）烤片：适宜放置到60℃～68℃的恒温箱内进行加热，避免温度过高；（3）抗原修复：时间控制到8分钟内，喷汽后约两分钟，将锅端开，使切片自然冷却，开始染色；（4）染色：免疫组织化学染色时，需要对苏木素进行复染，避免复染程度过深，如过深，会给染色比较浅的阳性细胞覆盖，对正确诊断产生影响 [3]。

另外，免疫组化显色属于一种酶促反应，能够与抗原抗体复合物的碱性磷酸酶、过氧化物酶和底物发生反应，形成有颜色复合物，在组织与细胞抗原位置进行沉淀。但由于组织标本来源不同，其抗原含量也不同，且细胞分化不同，显色反应时间也不同，进行染色时，需要注意以下几个方面：（1）染色过程中，要保持切片处于湿润状态；（2）孵育时，要合理控制孵育盒内蒸馏水量；（3）加抗体时主要选择单克隆抗体；（4）进行孵育时，要保证孵育盒的平整，保证抗体液体的均匀性，防止抗体液体流入组织内，导致出现假阴性。

本组研究中，观察组运用免疫组化法，对照组运用活检穿刺法，结果表明，观察组的阳性率显著高于对照组（P＜0.05）。

综上所述，在组织病理诊断中应用免疫组化技术，能够有效提高阳性率，可在临床中广泛推广。