对遗传性肾病综合征的基因诊断研究与讨论

刘俊泽

对遗传性肾病综合征的基因诊断研究与讨论

刘俊泽

研究讨论遗传性肾病综合征的基因诊断。采用靶序列捕获测序技术对遗传性肾病的病症进行诊断与治疗。遗传性肾病综合征的治疗方案较为复杂，而常规的治疗方案没有明显的效果，如激素和免疫抑制剂。所以，对该类疾病的定义、分子遗传学分类、临床特征以及肾脏病理等相关进展需要进行理解和明确。采用靶序列捕获测序技术，可以一次性对遗传性NS进行检测、诊断和治疗。采用靶序列捕获测序技术对遗传性肾病进行诊断，可以帮助对遗传性肾病综合征的常见分子生物学、临床及病理特征等进行研究，并且为建立遗传性肾病综合征的基因提供诊断依据。

遗传性；肾病综合征；基因诊断

肾小球滤过屏障组成蛋白的编码基因或其他相关基因突变所致的肾病综合征称为遗传性肾病综合征，在临床上大多表现为激素耐药型肾病综合征，大约在10年以后有30%～40%患儿的病情会发展为终末期肾病。隐居有无家族史，可以将疾病分为家族性和散发性两类，依据发病年龄可以分为先天型、婴儿型、儿童型、青少年型和成人型肾病综合征，依据有无其他系统受累则可分为非系统性（又称孤立性）和系统性肾病综合征。此类疾病的病理类型主要为：局灶节段性肾小球硬化以及弥漫性系膜硬化。

近些年来，随着经济和科技的发展，促进了分子生物学技术的快速发展，现阶段，大约有18个与遗传性肾病综合征有关的基因被克隆和定位，在这些基因编码蛋白中，存在大量的肾小球裂孔膈膜蛋白分子或足细胞分子。其中一些基因编码蛋白为肾小球基膜结构分子，另外还有一些基因编码蛋白是足细胞发育和维持功能所必需的转录因子或蛋白酶，除此之外还存在一些基因编码产物为溶酶体、线粒体蛋白或DNA核小体重组调节子。截止目前为止，18个与遗传性肾病综合征有关的基因中，有7个基因的突变被证实与非系统性或称孤立性遗传性肾病综合征有关系，有10个基因的突变被证实与系统性遗传性肾病综合征有关系。其中肿瘤基因突变除可以引起Denys-Drash综合征和Frasier综合征之外，还可能引起孤立性先天性肾病综合征或者激素耐药型肾病综合征[1-3]。而LAMB2的突变不但可以引起Pierson综合征，而且可以引发孤立性先天性肾病综合征。所以，明确不同基因突变导致的遗传性肾病综合征，可以根据不同致病基因判断遗传性肾病综合征，从而可以进一步进行分子分型，有助于在临床中对此类疾病进行正确的诊断，同时制定出有针对性的治疗方法。

1　遗传性肾病综合征主要组成

非系统性又称孤立性遗传性肾病综合征，主要包括：先天性肾病综合征、婴儿型肾病综合征、儿童型肾病综合征、青少年型肾病综合征、以及成人型肾病综合征。系统性遗传性肾病综合征主要包括：Denys-Drash综合征、Frasier综合征、Pierson综合征、指甲髌骨综合征、Fabry病、Schimke免疫－骨发育不良以及肌阵挛－肾衰综合征。传性肾病综合征的治疗方案较为复杂，而常规的治疗方案没有明显的效果，所以，对该类疾病的定义、分子遗传学分类、临床特征以及肾脏病理等相关进展需要进行理解和明确。采用靶序列捕获测序技术，可以一次性对遗传性NS进行检测、诊断和治疗。

2　遗传性肾病综合征的检测、诊断

2.1遗传性肾病综合征检测

采用靶序列捕获测序技术，可以一次性对遗传性NS进行检测、诊断和治疗。2013年首次采用靶序列捕获测序技术进行检测SRNS的致病基因。这项研究通过PCR和Sanger测序法检测基因变异，结果显示，采用靶序列捕获测序技术可以检测出遗传性肾病综合征的致病基因变异，具有良好的敏感度[4]。在检测中因为筛选标准过于严格，导致有1个基因变异被排出，但是实际上被排出的基因也属于遗传性肾病综合征的致病变异基因。除此之外，采用靶序列捕获测序技术筛选出来的可能致病的基因变异经过研究和检验，全部被证实为属于致病的基因变异，同时检测结果显示无假阳性。靶序列捕获测序技术主要是针对全部的靶基因进行设计互补探针，之后通过利用探针进行捕获靶基因，最后利用二代测序技术对捕获的靶基因进行更深层次的测序。靶序列捕获测序技术可以对NPHSl、NPHS2、CD2AP等多个遗传性肾病综合证致病变异基因进行检测，检测的时间在48小时以下，因此采用靶序列捕获测序技术不但准确性高而且费用较低。

2.2遗传性肾病综合征诊断

随着社会经济的发展和科技水平的不断进步，推动了全基因组测序、全外显子组测序、靶序列捕获测序技术和生物信息学分析技术的不断发展和进步，未来将会有越来越多的遗传性肾病综合征的致病基因被发现[5]。对遗传性肾病综合征的基因诊断，需要将传统的策略与新策略进行有效的结合，传统的策略与新策略的结合不但可以帮助提高遗传性肾病综合征基因诊断的敏感度和特异度，而且可以节省时间，降低经济费用，最大限度地满足临床的需要。

采用靶序列捕获测序技术对遗传性肾病综合征的基因进行诊断，虽然具有较高的敏感度和特异度，可以节省时间，降低经济费用，最大限度地满足临床的需要，但是靶序列捕获测序技术只能对已知的致病基因进行检测，而无法对未知的致病基因进行检测。采用靶序列捕获测序技术进行检测，对靶区域不能进行完全的覆盖。靶序列捕获测序技术虽然可以对大部分靶序列进行快速的检测，但是不能对全部的靶序列进行检测。在检测异常的基因拷贝数或者结构异常的染色体时，检测的效率较低。采用靶序列捕获测序技术对遗传性肾病综合征的致病基因进行诊断时，会有假阳性结果的存在。主要是因为，虽然靶序列捕获测序技术可以检测出数量较多的致病基因变异，但是通过使用生物信息学分析技术进行层层筛选，可过滤掉大部分基因变异，从而筛选出可能具有致病性的基因变异。所以，只需要对筛选出的可能具有致病性的基因变异使用PCR和Sanger测序法进行验证。经过PCR和Sanger测序证实，部分致病基因的变异是不存在。

3　结束语

近些年来，随着分子生物学技术的快速发展，在一定程度上提高了人们对遗传性肾病综合征的遗传学特征以及分子发病机制的了解。现阶段采用激素以及免疫抑制剂对大部分已知的由单基因突变导致的遗传性肾病综合征患儿进行治疗，但是治疗的效果并不明显。目前国内和国外对已经确诊的遗传性肾病综合征，都主张不采用激素或者免疫抑制剂进行治疗，而对拟诊的病例必须要谨慎的使用激素和免疫抑制剂。所以对于早发的遗传性肾病综合征，例如先天性肾病综合征、婴儿性肾病综合征，要对其相关的基因进行及时的检测，保证早发的遗传性肾病综合征可以及时的得到明确的诊断，避免进行不必的治疗和过度的治疗，对患者的身体健康和身心健康造成更多的伤害。与此同时要对已经明确的遗传性肾病综合征家属提供相关的遗传咨询，其中包括对产前的基因诊断。

[1] 陈锐. 原发性肾病综合征临床路径(2010年版)[J]. 中国社区医师，2011，12(12)：16.

[2] 张宏文，张琰琴，王芳，等. WT1基因突变致慢性肾功能衰竭1例家系的遗传咨询和产前基因诊断[J]. 中国实用儿科杂志，2011，10(2)：115-117.

[3] 张宏文，丁洁. 先天性肾病综合征的治疗进展[J]. 实用儿科临床杂志，2011，13(5)：373-374.

[4] 赵亮，丁洁，聂红平，等. 儿童Alport综合征眼部表现[J]. 眼科，2011，11(4)：271-274.

[5] 张宏文，丁洁. 遗传性肾病综合征的基因诊断[J]. 临床儿科杂志，2011，12(10)：990-994.

The Discussion of Genetic Research and Diagnosis of Nephrotic Syndrome

LIU Junze, Clinical Laboratory Department of Jilin City Fengman District Hospital, Jilin 132000, China

Study and discuss genetic diagnosis of hereditary nephrotic syndrome. Target sequence capture using genetic sequencing technology nephropathy diagnosis and treatment of disease. Regimen hereditary nephrotic syndrome is more complex, while the conventional regimen no significant effects, such as hormone therapy and immunosuppressive hair hair, so the definition of the class of diseases, molecular genetics classification, clinical features, and kidneys pathology and other related developments need to be understood and clear. Target sequence capture using sequencing techniques, can make a one-time NS for genetic testing, diagnosis and treatment. Using molecular biological methods for the diagnosis of hereditary kidney disease, help biology, clinical and pathological features and other common molecular genetic study of nephrotic syndrome, to establish genetic nephrotic syndrome diagnostic thinking.

Hereditary, Nephrotic syndrome, Genetic diagnosis

R392.1

B

1674-9308（2015）09-0170-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2015.09.147

132000 吉林市丰满区医院检验科