CD34、α-SMA在宫颈鳞状上皮内瘤变间质中的表达及意义

张静 张亚静830000新疆医科大学附属中医医院病理科

CD34、α-SMA在宫颈鳞状上皮内瘤变间质中的表达及意义

张静 张亚静
830000新疆医科大学附属中医医院病理科

目的：探讨CD34、α-SMA宫颈鳞状上皮内瘤变间质中的表达及意义。方法：用免疫组化方法检测CINⅠ组15例，CINⅡ组28例，CINⅢ组34例，正常宫颈组织23例中CD34、α-SMA的表达情况。结果：CD34阳性表达率正常宫颈组织100％（23/23）、CINⅠ100％（15/15）、CINⅡ82.14％（23/28）、CINⅢ79.41％（27/34），CINⅢ、CINⅡ的CD34阳性表达率低于CINⅠ及正常宫颈组织（P＜0.05）。α-SMA阳性表达率正常宫颈组织0％（0/23）、CINⅠ13.33％（2/15）、CINⅡ78.57％（22/28）、CINⅢ88.24％（30/34）。CINⅢ、CINⅡ组织中α-SMA的阳性表达率高于CINⅠ、正常宫颈组织（P＜0.01）。结论：宫颈肿瘤形成过程中，肿瘤的间质发生了变化。检测CD34和α-SMA有助于宫颈鳞状上皮内瘤变的诊断。

宫颈鳞状上皮内瘤变；CD34、α-SMA；免疫组化

最新研究表明，肿瘤的发生、发展并非由肿瘤实质单方面决定，而是由肿瘤实质、间质两者相互作用决定的，肿瘤性间质细胞有免疫细胞、肌纤维母细胞等很多种，在这些间质细胞中，最重要的是肌纤维母细胞。研究表明，肿瘤性间质的肌纤维母细胞主要来自于活化的获得平滑肌表型的纤维母细胞，纤维母细胞是组织间质细胞中的未定向细胞，能够向肿瘤相关纤维母细胞分化。CD34是标记纤维母细胞的，α-SMA是标记肌纤维母细胞的。本研究对宫颈鳞状上皮内瘤变间质中的CD34、α-SMA进行检测，观察肿瘤形成过程间质是否发生变化，研究其意义。

资料与方法

本院活检及手术切除宫颈组织标本，其中CINⅠ15例，CINⅡ28例，CINⅢ34例，正常宫颈组织23例。

方法：标本收集后，首先使用10％甲醛固定，然后进行石蜡包埋，包埋完成后将其切成4 μm切片，连续切成3张，行免疫组化染色及HE染色。免疫组化染色采用S-P法，在操作的过程中严格按照操作规范进行，以PBS代替一抗作为阴性对照，以已知阳性的肿瘤标本作为阳性对照。免疫组化染色主要步骤：①石蜡切片脱蜡至蒸馏水。②PBS 洗3 min×2。③3％H2O2室温孵育5～10 min，消除内源性H2O2酶活性。④蒸馏水洗，PBS浸泡5 min。⑤切片抗原修复。⑥滴加封闭用血清（5％～10％正常三羊血清）。室温10 min。⑦倾出血清，加入一抗或一抗工作液，4℃水箱过夜和37℃孵育60 min。⑧PBS冲洗3 min× 2。⑨加生物素标记二抗，37℃孵育10～30 min。⑩PBS冲洗3 min×2。○11每张切片加链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶溶液，10 min。○12PBS冲洗，3 min× 3。○13每张切片加新鲜配制的DAB溶液，显微镜下观察3～10 min。○14自来水充分洗蒸馏水洗5～10 s。○15苏木素复染。○16梯度乙醇脱水、二甲苯透明，树胶封固。

结果判定：在实验结果中，如果发现间质细胞胞质内有棕黄色颗粒，则表示结果为阳性，如果没有发现棕黄色颗粒，则结果为阴性，CD34主要表达在纤维母细胞，α-SMA主要表达在肌纤维母细胞。

统计学方法：对本研究中所获得的所有数据资料均使用SPSS 15统计包进行统计学分析和处理，P＜0.05为差异有统计学意义。

结果

CD34阳性细胞主要位于间质内的纤维母细胞的胞质内，其CD34阳性率在正常组100％（23/23）、CINⅠ100％（15/15）、CINⅡ82.14％（23/28）、CINⅢ79.41％（27/ 34）。CINⅢ、CINⅡ的阳性率低于CINⅠ及正常组（P＜0.05）。α-SMA阳性细胞主要位于间质内的肌纤维母细胞，阳性率正常组0％（0/23）、CINⅠ 13.33％（2/ 15）、 CIN Ⅱ 78.57％（22/28）、 CIN Ⅲ88.24％（30/34）。CINⅢ、CINⅡ的阳性率高于CINⅠ、正常组（P＜0.01）。

讨论

肿瘤间质肌纤维母细胞可促进永生上皮的转化，会刺激上皮的增殖和恶性转化，促进肿瘤生长[1]，促进肿瘤血管形成。肌纤维母细胞的免疫学表型为α-SMA[2]，多在创伤、炎症、肿瘤等病理状态下发生活化[3]。有学者通过研究发现，与正常的前列腺间质相比，在前列腺癌反应性间质中，超过50％的细胞为肌纤维母细胞。

在本研究中，结果发现CD34阳性细胞主要位于间质内的纤维母细胞胞质内（属于未活化状态），随着宫颈癌由CINⅠ→CINⅡ→CINⅢ→宫颈癌的逐渐进展，CD34表达缺失。α-SMA阳性细胞主要位于间质内的肌纤维母细胞（属于活化状态），而随着病变进展，α-SMA表达获得。所以可以观察到随着病变的进展，间质中的纤维母细胞和肌纤维母细胞的一种转化过程，有助于宫颈鳞状上皮内瘤变的诊断。

综上所述，成熟的肌纤维母细胞能够分泌细胞因子及产生细胞外基质形成肿瘤生长所必需的微环境，从而促进肿瘤的生长、浸润、转移，肌纤维母细胞对肿瘤的早期诊断具有重要的意义[4-5]。

[1]衣明，黄荣，张金锋，等，肌纤维母细胞及在肿瘤间质中激活的纤维母细胞[J].中国组织工程研究与临床康复，2011，15 （10）：1871-1874.

[2]王行富，张声.肿瘤间质纤维母细胞的促血管形成作用[J].国际病理科学与临床杂志，2008，28（1）：49-52.

[3]居杰，邱双健.肿瘤相关纤维母细胞的研究进展[J].中国癌症杂志，2007，17（10）： 819-823.

[4]Farrow B，Rowley D，Dang T，et al.Characterization of tumor-derived pancreatic stellate cells[J].J Surg Res，2009，157（1）：96-102.

[5]Paner GP，Shen SS，Lapetino S，et al.Diagnostic utility of antibody to smoothelin in the distinction of muscularis propria from muscularis mucosae of the urinary bladder：a potential ancillary tool in the pathologic staging of invasive urothelial carcinoma[J].Am J Surg Pathol，2009，33（1）：91-98.

Expression and significance of CD34，α-SMA in mesenchyme of cervical squamous intraepithelial neoplasia

Zhang Jing，Zhang Yajing
Department of Pathology，the Traditional Chinese Medicine Hospital Affiliated to Xinjiang Medical University 830000

Objective：To explore the expression and significance of CD34，α-SMA in mesenchyme of cervical squamous intraepithelial neoplasia.Methods：Immunohistochemical method was applied to detect the expression of CD34，α-SMA in CINⅠGroup of 15 cases，CINⅡgroup of 28 cases，CINⅢgroup of 34 cases and normal cervical tissues of 23 cases.Results：The positive expression rates of CD34 in normal cervical tissues was 100％（23/23），CINⅠwas 100％（15/15），CINⅡwas 82.14％（23/28），CIN Ⅲwas 79.41％（27/34），the positive expression rate of CD34 in CINⅢand CINⅡwas lower than CINⅠand normal cervical tissues（P＜0.05）.The positive expression rate of α-SMA in normal cervical tissue was 0％（0/23），CINⅠwas 13.33％（2/15），CIN Ⅱwas 78.57％（22/28），CINⅢwas 88.24％（30/34）.The positive expression rate of α-SMA in CINⅢ，CINⅡwas higher than CINⅠand the normal cervical tissues（P＜0.01）.Conclusion：In the forming process of cervix neoplasms，tumor interstitial was changed.Detection of CD34 and α-SMA was helpful in the diagnosis of cervical squamous intraepithelial neoplasia.

Cervical squamous intraepithelial neoplasia；CD34，α-SMA；Immunohistochemistry

10.3969/j.issn.1007-614x.2015.16.72