IL-1、IL-6、TNF-α在慢性酒精性中毒大鼠肝脏的表达

王雪敏 杨 昆 李琦军 赵艳军 靳 杰 田 勇 常智忠

(石家庄市第三医院急诊科，河北 石家庄 050011)

IL-1、IL-6、TNF-α在慢性酒精性中毒大鼠肝脏的表达

王雪敏 杨 昆 李琦军 赵艳军 靳 杰 田 勇 常智忠

(石家庄市第三医院急诊科，河北 石家庄 050011)

目的 探讨慢性酒精中毒对大鼠肝脏白细胞介素(IL)-1、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α表达的影响。方法 采用酒精灌胃加高脂饲料法形成慢性酒精性肝损伤雄性SD大鼠模型，血清谷酰转肽酶(GGT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)和血清丙氨酸转氨酶 (ALT)水平为基础参考指标。40只SD大鼠随机分为正常对照组、酒精模型组，每组20只。应用Western印迹方法检测SD大鼠肝组织中IL-1、IL-6、TNF-α表达情况。结果慢性酒精中毒大鼠血清 GGT、ALT、AST水平较正常对照组显著升高(P＜0.05)，肝组织 IL-1、IL-6、TNF-α较正常对照组显著升高(P＜0.01)。结论慢性酒精中毒的SD大鼠血清、肝组织IL-1、IL-6、TNF-α表达明显升高，造成肝脏损伤，严重可发展至肝硬化。

慢性酒精中毒;肝损害;谷酰转肽酶;天门冬氨酸转氨酶;血清丙氨酸转氨酶

在我国，酒精性肝损伤(ALD)呈年轻化增长趋势，同时，由慢性酒精中毒导致的肝硬化、周围神经病变、脑损伤及死亡率逐年增加〔1～3〕。本研究通过观察慢性酒精中毒大鼠、肝脏组织中白细胞介素(IL)-1、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α表达情况，探讨IL-1、IL-6、TNF-α在ALD发生发展中的作用。

1 材料与方法

1.1 动物 选取SPF级SD雄性大鼠，体重88～104 g，中国医学科学院动物繁殖场提供。高脂饲料为标准饲料+1%胆固醇、10%玉米油、5%猪油，由河北医科大学动物实验中心提供。

1.2 试剂与仪器 52%衡水老白干为河北衡水老白干酿酒(集团)有限公司出品;血清谷酰转肽酶(GGT)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)检测试剂盒购自上海生工有限公司;IL-1、IL-6、TNF-α活性检测试剂购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

1.3 给药、分组 SD大鼠给予正常适应性喂养1 w后，将40只大鼠随机分为实验组(慢性酒精中毒组)、对照组。实验组给予52%衡水老白干白酒定时灌胃，0.2 ml/10 g，1次/d，连续14 d;对照组给予等量蒸馏水定时灌胃，连续14 d;两组均给予高脂饮食，末次灌胃后12 h禁食，于灌胃后24 h经眼眶采血，处死后立即取肝脏组织标本进行检测。

1.4 血清GGT、AST和ALT水平检测 采集血液常温静置30 min后，3 000 r/min离心10 min，取血清按照试剂盒说明书检测 GGT、AST、ALT 水平。

1.5 IL-1、IL-6、TNF-α活性水平检测 取大鼠肝脏组织40 mg，严格按照试剂盒步骤进行检测。

1.6 统计学方法 应用SPSS18.0软件行t检验。

2 结果

2.1 两组大鼠血清GGT、AST和ALT水平 实验组大鼠血清GGT〔(7.64±1.72)U/L〕、AST〔(163.59±8.57)U/L〕和 ALT〔(196.44±9.80)U/L〕水平明显高于对照组。提示实验动物模型成功。

2.2 Western印迹方法检测两组肝脏组织中IL-1、IL-6、TNF-α水平 实验组大鼠肝脏组织 IL-1〔(14.51±1.54)ng/L〕、IL-6〔(64.20±2.94)ng/L〕、TNF-α〔(78.39±5.16)ng/L〕显著高于对照组〔(4.35±0.67)ng/L、(21.84± 1.03)ng/L、(13.87 ±2.35)ng/L〕(P＜0.05)。

3 讨论

慢性酒精中毒可导致肝脏脂质代谢异常，ALD可引起肝脏细胞脂质过氧化反应。研究显示，通过药物降低急性酒精中毒大鼠TNF-α水平，可有效防止ALD进一步发展〔4〕。GGT、AST和ALT常作为诊断ALD的指标〔5〕。由于长期饮酒导致ALD，多种通路启动引起细胞因子分泌增加，形成肝脏细胞炎症、坏死、纤维化等〔6，7〕。本研究中慢性酒精中毒SD大鼠肝脏组织IL-1、IL-6、TNF-α均较正常对照组升高，提示酒精造成的肝损害有多种炎性因子参与，导致炎症细胞因子增加，导致肝功能异常，其中TNF-α是促进炎症发展的关键因子，与IL-6相互激发，加重肝细胞损伤〔4，8〕。慢性酒精中毒不仅引起肝脏损害，还引起慢性酒精中毒性周围神经病〔9，10〕，因此慢性酒精中毒应引起高度重视，预防出现多脏器损伤。

1 徐正婕，陆论根.酒精性肝病的流行病学和自然史〔J〕.中国处方药，2010;94(1):32-4.

2 麦国钊，任醒华，黄俊杰，等.慢性酒精中毒患者的临床特点与神经电生理分析〔J〕.海南医学院学报，2012;18(7):902-3.

3 刘 箐，周国平.甲钴胺联合还原型谷胱甘肽治疗慢性酒精中毒性周围神经病疗效观察〔J〕.脑与神经疾病杂志，2012;20(2):149-51.

4 曾 明，王金萍，丁媛媛，等.可舒胶囊对酒精性肝损伤大鼠血清中NF-κB 和 TNF-α 的影响〔J〕.东南国防医药，2013;15(1):23-5.

5 金凤影.γ-谷氨酰转肽酶(GGT)的测定对酒精性肝炎的诊断价值〔J〕.中国实用医药，2009;4(13):149-50.

6 Watanahe T，Jono H，Han J，et al.Synergistic activation of NF-κB by nontypeable haemophilus influenzae and tumor necrosis factor-α〔J〕.Proc Natl Acad Sci USA，2004;101(10):3563-8.

7 陈博婷，薛 挥.NF-κB的结构和功能研究及与酒精性肝病的关系〔J〕.胃肠病学和肝病学杂志，2009;18(1):78-82.

8 曾 明，丁媛媛，王金萍，等.可舒胶囊对酒精性肝损伤小鼠肝组织Caspase-3与 Caspase-8活性的影响 .〔J〕中国医药导报，2013;10(27):22-4.

9 李 昊，张拥波.慢性酒精中毒致亚急性联合变性的临床探讨〔J〕.中国社区医师(医师版)，2011;13(13):199-200.

10 王东升，王长海，沈 通，等.46例慢性酒精中毒致周围神经损害的临床诊治体会〔J〕.黑龙江医药，2011;24(4):637-8.

R57

A

1005-9202(2015)09-2377-02;

10.3969/j.issn.1005-9202.2015.09.029

王雪敏(1969-)，女，副主任医师，主要从事急诊医学研究。

〔2013-10-11修回〕

(编辑 袁左鸣)

·消化、呼吸系统疾病·