佟 丽
(河北省丰宁县土城镇人民政府,河北丰宁 068350)
生物碱提取方法及作用研究进展
佟 丽
(河北省丰宁县土城镇人民政府,河北丰宁 068350)
1.1 超声波提取
超声波提取法一般作为生物碱的辅助提取法,它的3个理论依据是超声波热学机理、超声波机械机制和空化作用。在超声场中,物料吸收声能,温度升高,有效成分溶解加速,超声空化产生的瞬间高压造成生物细胞壁及整个生物体破裂,同时,超声波产生的振动作用加强了胞内物质的释放、扩散及溶解。被浸提的物质在被破碎瞬间,生物活性保持不变,同时,能提高破碎速度和提取率。王忠华等分别采用超声波辅助提取法和摇床振荡(浸提)法提取浙贝母生物碱,经比较尽管超声波法提取的生物碱获得率与传统的摇床浸提法相比差异不显著,但该方法更快速,且成本低。
1.2 超声-微波协同萃取技术
超声-微波协同萃取技术及装置是将直接超声振动与开放式微波两种作用方式相结合,充分利用超声波振动的空穴作用以及微波的高能作用,克服了常规超声波和微波萃取之不足。具有速度快、能耗小、溶剂用量小,回收率高等优点外,还有利于极性和热不稳定性组分的萃取,避免长时间高温高压条件下萃取或合成反应引起的分解,从而不破坏所萃取的有机物分子的结构。
1.3 超临界流体萃取
超临界萃取技术是利用超临界流体所具有的特殊溶解能力,进行天然植物有效成分提取,超临界流体在具有较高的溶解能力的同时,还具有较高的传质速率、较好的流动性能和很快到达平衡的能力。其原理是利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响,而实现对极性大小、沸点高低和分子量大小不同的组分间的选择性分离。而且,由于温度和压力在临界点附近的微小变化能够引起溶解能力的显著变化,这使得超临界流体具有良好的可调节性和选择性。赵宋亮等利用超临界CO2流体萃取菊三七中的总生物碱,提取率为索氏提取法的1.5倍,耗时却仅为常规法的1/2。
2.1 对淋巴细胞的影响
童鲲等通过岩黄连总生物碱对小鼠免疫功能的影响的研究得出岩黄连总生物碱增强T细胞产生IL-2和IFN-的水平。李建国等通过建立DNFB诱发的小鼠ACD模型,以不同剂量的氧化苦参碱对小鼠腹腔进行注射。腹腔注射氧化苦参碱能明显提高小鼠外周血中CD4+、CD25+T细胞的数量,即氧化苦参碱对免疫系统的影响呈双向作用,氧化苦参碱是一种双向免疫调节剂。伍斌等研究氧化苦参碱(OMT)对淋巴细胞增殖和调节性T细胞(Tr)数量的影响,结果表明,OMT对小鼠淋巴结T细胞增殖呈双向作用;腹腔注射OMT能明显提高小鼠外周血中CD4+、CD25+T细胞数量;提示:OMT是一种双向免疫调节剂。
2.2 对免疫器官的影响
动物的免疫器官主要是脾脏和胸腺,家禽还包括法氏囊。免疫器官的脏器系数是衡量机体免疫功能的重要指标。有研究表明,甘肃棘豆生物碱部位能显著增强KM小鼠脾指数、胸腺指数及脾细胞增值率。
2.3 对细胞因子的影响
细胞因子(Cytkoine,CK)是由活化的免疫细胞和某些基质细胞分泌的,介导和调节免疫、炎症反应的小分子多肽。细胞因子具有多种调节免疫应答功能,其种类繁多,目前,广泛研究的细胞因子达60多种,包括白细胞介素(IL)、集落刺激因子(CFS)、干扰素(IFN)、肿瘤坏死因子(TNF)、生长因子、趋化性因子等。通过研究白毛藤生物碱对小鼠脾脏细胞因子mRNA表达的影响,采用RT-PRC技术检测了IL-2、IL-12、IFN-γ和TNF-α、mRNA表达,实验结果表明白毛藤生物碱能提高IL-2、IL-12、TNF-α及IFN-γmNRA表达水平。
生物碱的提取方法很多,以上只综述了其中的几种。一种好的提取方法不仅要求有较高的回收率,而且要保证该提取物的生物活性不发生变化。通过以上综述可知应用半仿生提取生物碱的报道还较少,但是,该方法较为符合药物的在胃肠吸收、代谢,从而使提取的生物碱能发挥最大的药效。超声波提取法通过瞬时超声波破碎,被浸提的物质在被破碎瞬间,生物活性保持不变。还有就是酶提取法,该方法反应条件温和,效率高,也是生物碱提取的首选之一。生物碱的提取必须做到标准化和规范化,由此才能为研究其作用机制及结构与功能之间关系提供可靠的保障。
生物碱是一种新型的免疫调节剂,可作用于T 细胞、B 细胞、巨噬细胞等主要免疫活性细胞,调节机体的细胞免疫功能和体液免疫功能。从所报道的研究结果来看,不同的生物碱对免疫调节不尽相同,同一生物碱对免疫细胞的影响也不同,后者说明有些生物碱是双向免疫调节剂。近年来,国内外学者多从免疫增强效应方面对中药提取物进行实验研究,从而忽视了其免疫抑制效应,随着自身免疫病不断增多,就要求开发高效低毒的中药免疫抑制剂。所以生物碱的双向免疫调节显示了优势,将为此提供可能。