黑果枸杞水浸液对中华鳑鲏及草金鱼抗缺氧能力的影响

□ 谈永萍 魏智清

黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr)系茄科枸杞属多年生植物，分布于我国西北各省区及内蒙古、西藏等地区，是民族医药中的常用药材。黑果枸杞所含化学成分包括多糖、花色苷、原花青素、甜菜碱、黄酮、类黄酮、多酚类、挥发油类、矿物质、维生素类及多种氨基酸等多种营养成分。大量研究表明，黑果枸杞具有抗疲劳、降血糖、抗氧化、降血脂、延缓衰老、抗动脉硬化、增强非特异性免疫等生理药理作用 。其中有研究表明黑果枸色素、甜菜碱对小鼠具有显著的抗缺氧、抗疲劳作用。尚未见有关黑果枸杞对鱼类抗缺氧影响的报道。为此，本实验以中华鳑鲏、草金鱼为实验动物，探讨黑果枸杞水浸液对鱼类抗缺氧能力的影响，为进一步开发黑果枸杞提供科学依据。

一、材料与方法

(一)实验材料。去氧水:将自来水煮沸后盛入一容器并加盖密封，自然冷却后即为去氧水。实验时水温为15℃～18℃。经美国维赛YSI手持式多参数仪水质检测仪测定，此去氧水溶解氧为(0.97～1.29)mg/L，低于同温度范围经静置的自来水的溶解氧(2.69～2.88)mg/L。黑果枸杞:由宁夏农林科学院提供的黑果枸杞成熟干燥果实。实验鱼均购于银川市西夏区同心路鱼市，购回的中华鳑鲏和草金鱼将除去死、弱个体，在经曝气处理后的水中暂养24h，禁食，待适应水环境后，选择游泳活泼的个体进行实验。中华鳑鲏(Rhodeus sinensis Gunther)体质量为(0.24 ±0.06)g，体长为(2.89 ±0.14)cm，草金鱼(Carassius auratus)体质量为(0.35 ±0.08)g，体长为(3.70 ±0.21)cm。

(二)实验方法。

1.黑果枸杞水浸液的制备。称取干品黑果枸杞1g，加200mL热开水浸泡30min，然后用滤纸过滤得到黑果枸杞水浸液。

2.密闭缺氧实验。

(1)黑果枸杞水浸液对中华鳑鲏缺氧存活时间的影响。把中华鳑鲏分成7组，每组10条，用300mL锥形瓶作为容器。对照组装满去氧水，放入10条中华鳑鲏;将实验组中华鳑鲏分别放入盛有 7.5、8、8.5、9、9.5、10mL 的黑果枸杞水浸液的锥形瓶中并全部用去氧水稀释至瓶口，用保鲜膜密封瓶口，瓶内不留气泡，观察并记录瓶中每条中华鳑鲏的死亡时间，以探讨黑果枸杞水浸液对中华鳑鲏抗缺氧能力的影响。本实验重复3次。

(2)黑果枸杞水浸液对草金鱼缺氧存活时间的影响。把草金鱼分成6组，每组5条，用300mL锥形瓶作为容器。对照组装满去氧水，放入5条草金鱼;将实验组草金鱼分别放入盛有 7.5、8、8.5、9、9.5mL 的黑果枸杞水浸液的锥形瓶中并全部用去氧水稀释至瓶口，用保鲜膜密封瓶口，瓶内不留气泡，观察并记录瓶中每条草金鱼的死亡时间，以探讨黑果枸杞水浸液对草金鱼抗缺氧能力的影响。本实验重复3次。

3.数据处理。实验数据用Mean±SD，表示，采用SPSS.19软件进行方差分析，P﹤0.05为差异显著 ，P﹤0.01为差异极显著。存活时间延长率(%)=(实验组平均存活时间-对照组平均存活时间)/对照组平均存活时间×100%。

二、结果

表1 黑果枸杞水浸液对中华鳑鲏缺氧存活时间的影响(Mean±SD，n=30)

(一)黑果枸杞水浸液对中华鳑鲏抗缺氧能力的影响。中华鳑鲏在密闭缺氧条件下不同浓度的黑果枸杞水浸液中的存活时间见表1。从表1中的结果可以看出，实验组3、4与对照组相比均有显著差异(P＜0.05)，实验组5存活时间最长，达到了125min，与对照组相比有极显著差异(P＜0.01)，即中华鳑鲏在相同剂量的缺氧水加入8.5、9mL黑果枸杞水浸液，其缺氧存活时间显著延长。实验组1、2、6与对照组相比无显著性差异(P＞0.05)。即中华鳑鲏在相同剂量的缺氧水加入 7.5、8.0、10.0mL 黑果枸杞水浸液，其缺氧存活时间无明显延长。

(二)黑果枸杞水浸液对草金鱼抗缺氧能力的影响。草金鱼在密闭缺氧条件下不同浓度的黑果枸杞水浸液中的存活时间见表2。

表2 黑果枸杞水浸液对草金鱼缺氧存活时间的影响(Mean±SD ，n=15)

从表2中的结果可以看出，实验组3、4与对照组相比均有显著差异(P ＜0.05)，实验组3存活时间最长，达到了156min。即草金鱼在相同剂量的缺氧水加入8.5、9mL黑果枸杞水浸液，其缺氧存活时间显著延长。实验组1、2、5与对照组相比无显著性差异(P＞0.05)，草金鱼在相同剂量的缺氧水加入 7.5、8.0、9.5mL 黑果枸杞水浸液无明显变化。

以上实验结果显示，不同剂量的黑果枸杞水浸液均可延长中华鳑鲏、草金鱼的存活时间，有的剂量达到显著差异(P＜0.05)或极显著差异(P＜0.01)。表明一定剂量的黑果枸杞水浸液可显著提高鱼类的抗缺氧能力。

三、分析与讨论

近年来的研究证实黑果枸杞含有多糖、花色苷色素、甜菜碱、原青花素、黄酮等多种营养成分，具有抗疲劳、耐缺氧、抗氧化、降血糖等作用。黑果枸杞中多糖能够减轻小白鼠自由基的生成，促进体内脂质过氧化物的清除。维持高含量的肝糖原和肌糖原，它们是大强度耐力运动的主要来源之一。能够减少运动后血乳酸的堆积，延缓疲劳发生。闫亚美等对黑果枸杞与5种果蔬(葡萄、树莓、紫甘蓝、蓝莓和紫薯)中花色苷组成及体外抗氧化活性的比较研究，证实黑果枸杞总花色苷含量最高，其抗氧化活性的能力最强，增加延缓运动性疲劳和体能恢复的效果。吴秀香等就葡萄籽原花青素的耐缺氧作用、宝丽等就欧洲越桔花青素的耐缺氧作用进行了实验研究，认为原花青素的耐缺氧作用机制可能与增加大脑供血、降低心脑耗氧量、清除自由基和抑制脂质过氧化等作用有关。盐酸甜菜碱，其化学结构与胆碱相似，作为甲基供体，在机体代谢中有着重要作用，具有减缓肿瘤的形成、降低应激反应、改善食欲等作用。朱玉云等的研究结果显示，能明显延长异丙肾上腺素所致急性心肌缺氧小鼠的存活时间，甜菜碱对心肌缺血缺氧具有改善和保护作用。

本实验结果表明，添加一定浓度的黑果枸杞水浸液能明显延长中华鳑鲏和草金鱼在常压密闭缺氧条件下的存活时间，提高其抗缺氧能力，因黑果枸杞中含有丰富的活性物质，具有抗缺氧、耐疲劳等作用。

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