胸苷酸合成酶和谷胱甘肽-S-转移酶π在食管鳞癌中的临床应用

闫海山

胸苷酸合成酶和谷胱甘肽-S-转移酶π在食管鳞癌中的临床应用

闫海山

目的 观察食管鳞癌患者胸苷酸合成酶(TS)以及谷胱甘肽-S-转移酶π(GST-π)表达情况, 总结此类表达的临床意义。方法 48例食管鳞癌石蜡标本作为研究组, 48例正常食管黏膜组织作为对照组, 以免疫组化法对两组实施检测, 观察TS与GST-π在两组中的表达情况。结果 研究组的TS、GST-π阳性表达率分别为43.75%、52.08%, 对照组则分别为18.75%、79.17%, 研究组的TS阳性表达率显著高于对照组(P<0.05), GST-π阳性表达率则明显低于对照组(P<0.05)；研究组高分化鳞癌TS阳性表达率低于中-低分化鳞癌(P<0.05)。结论 TS与GST-π可以有效判别是否发生食管鳞癌。

食管鳞癌；胸苷酸合成酶；谷胱甘肽-S-转移酶π；临床意义

目前, 临床研究者主要通过免疫组化法对肿瘤标志物进行检测, 以掌握食管鳞癌的发作情况。本院此次对TS与GST-π进行免疫组化分析, 比较其在食管鳞癌及正常食管黏膜组织中的差异, 现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2010年10月～2012年10月间在本院行手术切除治疗的48例食管鳞癌患者的石蜡标本作为研究组, 男41例, 女7例, 年龄36～75岁, 平均年龄(57.5±6.2)岁。肿瘤部位如下：5例为上段食管鳞癌, 27例为中段食管鳞癌, 16例为下段食管鳞癌；组织学分化为高分化鳞癌14例,中分化鳞癌24例, 低分化鳞癌10例；肿瘤分期如下：2例为Ⅰ期食管鳞癌, 24例为Ⅱ期食管鳞癌, 16例为Ⅲ期食管鳞癌, 6例为Ⅳ期食管鳞癌。另取48例正常食管黏膜组织标本作为对照组, 均选自食管鳞癌5 cm以上部位, 男39例, 女9例；年龄38～72岁, 平均年龄(56.8±6.5)岁。两组患者一般资料比较, 差异无统计学意义(P>0.05), 具有可比性。

1.2 方法 选择鼠抗人单克隆抗体, PV-9000试剂盒实施免疫组化法检验, 具体的步骤如下：①对腊片标本进行切割, 每片厚度为4～5 μm；采用多聚赖酸氨对玻片进行处理, 将切割好的标本固定于其上, 以二甲苯进行脱蜡处理, 以梯度浓度乙醇实施水化处理；以3% H2O2对其进行10 min的孵育, 然后将其取出, 置于TBS缓冲液, 进行清洗(3次, 2 min/次)。②TS实施热抗原修复：将玻片置于柠檬酸钠溶液(浓度为10 mmol/L, pH值为6.0)之中, 并放在电饭煲中进行30 min的加热处理；处理完成后, 取出冷却,冷却至室温, 再以TBS缓冲液对其加以清洗(3次, 2 min/次),滴加一抗。GST-π不进行此番处理。③将滴加一抗后的玻片置于冰箱(4℃)中, 孵育1夜；取出玻片, 使其恢复到室温, 再行TBS缓冲液清洗(3次, 2 min/次)。④依次将试剂1、试剂2滴加到玻片上, 分别进行20 min的孵育及3次TBS冲洗；冲洗后, 置于DBA显色试剂盒中, 5～10 min后, 在显微镜下对显色结果进行观察。以苏木素进行复染, 盐酸乙醇进行分化, 并实施脱水、透明及封片处理, 之后, 将其放置在光镜下进行观察。

1.3 临床评价标准 阳性：胞浆、胞核二者中有其一或者全部呈现出棕褐色颗粒；强阳性(计3分)：胞浆、胞核二者中有其一或者全部呈现出深棕色颗粒；弱阳性(计1分)：胞浆、胞核二者中有其一或全部呈现出淡黄色颗粒；中度阳性(计2分)：介于强阳性与弱阳性之间。

1.4 统计学方法 采用SPSS12.0统计学软件对数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差()表示, 采用t检验；计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 TS表达 研究组48例中21例为阳性, 表达率为43.75%；对照组48例中9例为阳性, 表达率为18.75%；两者阳性表达率比较, 研究组显著高于对照组(χ2=6.98, P<0.05)。高分化鳞癌阳性表达率为21.43%(3/14), 中-低分化鳞癌为52.94%(18/34), 前者明显低于后者, 差异具有统计学意义(χ2=4.00, P<0.05)。

2.2 GST-π表达 研究组48例中25例为阳性, 表达率为52.08%；对照组48例中38例为阳性, 表达率为79.17%；研究组阳性表达率明显比对照组低(χ2=7.81, P<0.05)。高分化鳞癌阳性表达率为64.29%(9/14), 中-低分化鳞癌为50.00% (17/34), 高分化鳞癌与中-低分化鳞癌之间差异无统计学意义(χ2=0.82, P>0.05)。

3 讨论

当前, 食管癌特效化疗药物主要包括5-氟尿嘧啶(5-FU)、紫杉醇以及顺铂, 其中, 胸苷酸合成酶是5-氟尿嘧啶的主要分子靶点, 而谷胱甘肽-S-转移酶π是顺铂的介导。近年来, 为掌握食管鳞癌特效治疗方案, 国内外研究者将研究的目光转向TS与GST-π, 针对其表达结果以及预后效果开展了诸多研究, 成为指导食管鳞癌治疗的重要资料［1］。

研究发现, 胸苷酸合成酶对于叶酸盐的代谢功能具有重要价值, 它可以对脱氧尿苷酸进行催化, 使其甲基化, 变为具备DNA合成及修复功能的脱氧胸苷酸［2］。本院此次对48例食管鳞癌患者标本及48例正常食管黏膜标本进行免疫组化分析, 结果显示, 食管鳞癌标本TS的阳性表达率显著高于正常组织的表达率(P<0.05), 且中-低分化鳞癌阳性表达率明显高于高分化(P<0.05)。这一结果说明, TS蛋白的具体表达状况可以作为5-FU的敏感度筛选标准, 以便于为高敏感者实现特效治疗, 低敏感者实现其他药物的治疗。

GST是一类兼具解毒作用以及蛋白质结合效能的同工酶, 包括α、μ、π等13种酶, 其中, GST-π和肿瘤之间的关系尤为密切, 受到相关研究者的大力关注。GST-π既可以顺利地与抗癌症药物顺铂相互结合, 将其从患者细胞中移出, 还能够将氧自由基清除, 以便于降低放化疗方案本身对癌症患者的损害。食管鳞癌标本GST-π的阳性表达率低于正常食管黏膜组织(P<0.05)。证明GST-π的确具有重要的临床表达意义。

就目前来看, 部分临床研究者还针对食管鳞癌患者TS以及GST-π在年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤T分期、淋巴结转移情况方面的表达差异实施了探究, 提出男性患者的TS阳性表达率显著高于女性患者(P<0.05), 而不同的年龄、肿瘤部位、肿瘤T分期以及淋巴结转移情况差异无统计学意义(P>0.05)。GST-π在这几方面的阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05)。此次研究因条件限制, 而未展开对此方面的研究,以后还将逐步健全。

综上所述, 食管鳞癌标本的TS阳性表达率明显高于正常食管鳞癌组织表达率, 差异具有统计学意义(P<0.05), TS以及GST-π可作为医师为食管鳞癌患者实施临床诊断及用药的参考指标。

［1］ 唐悦,龚光明,柳璐璐,等.GST-π表达水平与人食管鳞癌耐顺铂的关系研究.中国现代医学杂志, 2014, 24(8):30-34.

［2］ 吴慧,樊青霞,陈奎生.食管鳞癌组织GST-π和TOPO-Ⅱ表达及其相关性研究.中华肿瘤防治杂志, 2010, 17(9):669-672.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.12.026

2015-03-12］

458030 鹤壁市人民医院肿瘤内科