开启余
(江苏盐城工业职业技术学院,江苏 盐城 224005)
实验室与分析
紫外分光光度法测定VC银翘片中维生素C含量
开启余
(江苏盐城工业职业技术学院,江苏 盐城 224005)
采用紫外分光光度法测定维C银翘片中维生素C含量,最大吸收波长为243nm,在pH=6的弱酸性条件下测定吸光度。线性回归方程为:A=0.0040+0.0656C,R2=0.99991。该法操作方便,结果准确,可用于含维C的药片中维生素C的测定。
维C银翘片;紫外 分光光度法;维生素C;测定
VC银翘片是常用的中药复方制剂,主要用于流行性感冒引起的发热头痛、咳嗽、干、咽喉疼痛等。维生素C又称抗坏血酸,是一种人体必需的水溶性维生素,也是一种天然抗氧化剂,能维持机体正常生理功能,广泛参与机体氧化、还原等复杂代谢过程[1]。VC作为维持人体健康的一种主要物质,其功能是多方面的,能抵抗癌症、延长寿命、保护血管、防治动脉硬化、降低吸烟的危害、治疗贫血、提高人体的免疫力等,它在 人体内不能合成,主要从膳食中获取[2]。日常生活中适当地摄入含VC较高的水果和蔬菜对保证人体健康非常重要。
VC纯品为白色无臭结晶,熔点为190~192℃,易溶于水,微溶于丙酮,不溶于油剂。结晶抗坏血酸即维生素C在空气中稳定,但在水溶液中易被空气和其它氧化剂氧化,生成脱氢抗坏血酸;在碱性条件下易分解,见光加速分解;在弱酸条件中较稳定[3]。VC测定的方法很多,一般有荧光法、碘量法、2,6-二氯靛酚滴定法、2,4-二硝基苯肼法和高效液相色谱法[4]。这些方法虽各有特点,但操作过程复杂,所用试剂不稳定,操作程序复杂、费时,仪器贵,速度慢。为此,笔者在文献基础上采用紫外光分光光度法[5]快速测定VC,根据VC对紫外产生吸收,于波长243nm处测定样品溶液吸光度,进而通过工作曲线快速测定样品中VC的含量[6]。此法操作简便、快速、准确,不需基准物质和标定,所用试剂价格低廉、易得,在实际生产中具有重要的实用价值。
1.1 实验仪器与药品
1.1.1 实验仪器
研钵,UV-1801型紫外可见分光光度计,FA1104电子天平,100mL、50mL容量瓶,100mL烧杯,砂芯漏斗,刻度吸管,PHS-3S-酸度计。
1.1.2 药品
维生素C标准溶液:在分析天平上准确称取维生素C(分析纯)10mg,加2mL 10% HCl,混合均匀,加入新煮沸并冷却的蒸馏水定容至100mL棕色容量瓶,摇匀形成100 ☒g·mL-1维生素C标准溶液[7]。
1%盐酸溶液、10%盐酸溶液、0.1mol·L-1NaOH溶液、蒸馏水。
1.2 实验方法
1.2.1 样品预处理
取外购维C银翘片1片,充分研磨并混匀,置于100mL烧杯中,加入少量新煮沸并冷却的蒸馏水和2mL 10%盐酸溶解并过滤,转移到100mL棕色容量瓶中,加入新煮沸并冷却的蒸馏水定容至100mL棕色容量瓶中,备用[8]。
1.2.2 样品中维生素C含量的测定[9]
用吸量管吸取上述样品储备液1mL于50mL容量瓶中,用新煮沸并冷却的蒸馏水稀释,并用1% HCl和0.1mol·L-1NaOH调pH为6,定容至刻度,摇匀,以蒸馏水为参比,在243nm测定吸光度。
2.1 最佳pH值的选择
吸取100 ☒g·mL-1维生素C标准溶液5.00mL于50mL容量瓶中,用1%盐酸溶液和0.1mol·L-1NaOH溶液与新煮沸并冷却的蒸馏水调节pH为1~10定容至刻度,以试剂空白为参比进行测定,结果见图1。经测定pH=6时吸光度最大,所以本实验取pH=6。pH值过高或过低都能使其内酯环水解,使其含量下降,也可进一步发生脱羧反应而生成糖醛,后者受空气影响而氧化和聚合呈色(一般为深黄色)。
图1 pH值对吸光度的影响
2.2 最佳反应时间
吸取100☒g·mL-1维生素C标准溶液5.00mL于50mL容量瓶中,用1%盐酸溶液和0.1mol·L-1NaOH溶液与新煮沸并冷却的蒸馏水调节pH=6,以试剂空白为参比,在243nm处第2、10、20、30、60、120min处测定吸光度A,结果见图2。从图2中可看出120min时吸光度减小并趋于稳定值。这是由于维生素C极易被空气中的氧气氧化变质,所以测定时应盖上比色皿塞且快速进行测定。
图2 时间对吸光度的影响
2.3 最佳吸收波长测定
吸取100☒g·mL-1维生素C标准溶液5.00mL于50mL容量瓶中,用1% HCl和0.1mol·L-1NaOH调pH为6,用新煮沸并冷却的蒸馏水稀释至刻度。试剂空白作参比,在UV-1108紫外可见分光光度计上从210~320nm处进行扫描。结果表明最大吸收波长为243nm。紫外吸收光谱图如图3所示。
图3 紫外吸收光谱图
3.1 标准曲线
分别移取100☒g·mL-1维生素C标准溶液0、2.00、3.00、4.00、5.00、6.00mL于6个50mL容量瓶中,即 浓度分别为0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0☒g·mL-1,用1%盐 酸溶液和0.1mol·L-1NaOH溶液与新煮沸并冷却的蒸馏水调节pH=6.0并定容至刻度。快速地用UV-1801型紫外可见分光光度计在243nm波长下测定吸光度值,并绘制标准曲线如图4所示。结果表明维生素C浓度与吸光度成正比,其线性方程为:A=0.0040+0.0656C,R2=0.99991。
图4 维生素C标准曲线
3.2 样品分析结果
对药品标示值中VC含量为49.5 mg·片-1的同一样品进行3次测定,测定结果分别为48.1、48.6、47.9mg·片-1,平均值为4 8.2mg·片-1。
研究表明,维生素C在盐酸介质中有良好的稳定性,且在紫外区有吸收峰,故可采用紫外分光光度法直接测定维生素C,该方法具有待测样品微量、测定简单、快速、准确,不需基准物质标定,所用试剂价格低廉、易得的优势,适用于维生素C快检分析和生产过程中半成品含量测定,可以满足药物分析以及食品工业分析的质量监测与控制,有利于提高工作效率。
[1] 赵连俊.水果中维生素C含量测定的研究[J].当代化工,2008,37(6):672-673.
[2] 王征帆,杨艳丽.恒电流库伦分析法在水果VC含量测定中的应用[J].安徽农业科学,2008,36(10):3941-3942.
[3] 郑京平.水果、蔬菜中维生素C含量的测定—紫外分光光度法快速测定方法探讨[J].光谱实验室,2006,23(4): 731.
[4] 王占文,陈玉銮.磷钼杂多酸光度法测定药物和食品中抗坏血酸[J].分析化学,1991,19(3):357-361.
[5] 何照范,张迪清.保健食品化学及其检测技术[M].北京:中国轻工业出版社,1999:101-102.
[6] 于小萍.分光光度法快速测定蔬菜水果中VC的含量[J].河北化工,2007,30(11):76.
[7] 贾君.5种水果中维生素C含量的测定研究[J].冷饮与速冻食品工业,2004,10(2):33-34.
[8] 刘军鸽.紫外分光光度法测定蔬菜中维生素C含量[J].湖南农业大学学报,1997,23(5):474-476.
[9] 张广元.维生素C片剂的紫外分光光度法测定[J].安庆师范学院学报:自然科学版,2002(3):26-27.
Determination of Vitamin C in VC Fructus Forsythiae Flakes by Ultraviolet Spectrophotometric Method
KAI Qi-yu
(Jiangsu Yancheng Industrial Vocational and Technical College, Yancheng 224005, China)
The ultraviolet spectrophotometric method was used to determine vitamin C in fructus forsythiae flakes, the maximum absorption wavelength was at 243 nm, under the condition of the weak acidic pH=6. Linear regression equation was: A=0.0040+0.0656C, R2=0.99991.
VC frucuts forsythiae f akes; ultraviolet spectrophotometric method; VC; determination
O 657.3
A
1671-9905(2015)04-0041-03
开启余(1965-),副教授,从事分析化学教学与研究,电话:13004494382,E- mail:kaiqiyu196520@163.com
2015-01-27