用于红花注射液生产的红花药材吸光度的质量标准研究

潘红炬胡 美董 礼吴建国李 蓉胡 敏卫天喜史琳莉

（1.广东省佛山市华润顺峰药业有限公司，广东 佛山 528000；2.雅安三九药业有限公司，四川 雅安 625000）

·实验报告·

用于红花注射液生产的红花药材吸光度的质量标准研究

潘红炬1胡 美2△董 礼2吴建国2李 蓉2胡 敏2卫天喜2史琳莉2

（1.广东省佛山市华润顺峰药业有限公司，广东 佛山 528000；2.雅安三九药业有限公司，四川 雅安 625000）

目的建立适用于红花注射液生产的红花原料吸光度的质量标准。方法采用紫外分光光度法，追踪红花注射液生产过程吸光度指标的变化趋势，同时建立红花原料吸光度检测方法，并追踪多批2012年至2014年红花原料吸光度质量情况，建立红花原料的吸光度控制标准。结果红花注射液质量标准中检测的吸光度指标，在工艺过程中不断下降；近3年红花原料吸光度波动较小；当红花原料吸光度大于0.35时，可用于红花注射液的生产。结论红花原料吸光度标准的建立，可从原料源头控制质量，从而保证红花注射液成品吸光度质量稳定。

红花注射液 药材 吸光度

红花注射液具有活血化瘀、消肿止痛的功效，主要用于治疗闭塞性脑血管疾病、冠心病、心肌梗死、脉管炎，临床上对高脂血症、糖尿病并发症、月经不调、类风湿关节炎等疾病，有良好的辅助治疗作用［1］。2012年11月7日，国家食品药品监督管理局颁布执行了红花注射液质量标准［2］（WS3-B-3825-98-2012）。该标准的质量控制项目中，有吸光度控制项，要求成品在（267± 1）nm下检测，吸光度不低于0.5。为控制该指标质量稳定，需要对该指标在生产工艺中的变化以及原料本身的质量进行认识，并制定相应的质量标准。红花注射液原料为菊科植物红花（Carthamus tinctorius L.）。红花药材为活血化瘀的主要中药之一，用于治疗冠心病、脑血栓等心脑血管疾病［3］。红花药材国家标准中也对吸光度进行了控制［4］，但该标准控制的吸光度波长为518 nm，与红花注射液吸光度波长不一致，不能直观反映用于红花注射液的红花药材质量。本文将从红花注射液工艺过程吸光度变化进行跟踪，建立红花药材吸光度检测方法，从而制定适合红花注射液生产的红花药材吸光度标准，为企业的内控标准制定提供依据。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂 中药中试平台提取自动化系统（浙远自动化工程技术有限公司）、安瓿联动灌封中试系统（楚天科技股份有限公司）、紫外-可见分光光度计（岛津UV-2600）、电子天平（Satarius，BS244S）、高速中药粉碎

△通信作者（电子邮箱：humei@ya999.com）机（XFB-200，吉首市中诚制药机械厂）；水为纯化水。

1.2 药材 红花药材（新疆，吉木萨尔，雅安三九药业红花GAP基地），每年样品各取5批。2012年至2014年红花（7月采收），晒干，净选后真空包装，放于4℃冰箱冷藏保存。标本存放于雅安三九药业有限公司，标本存放室。

1.3 工艺过程吸光度变化 监测点根据2012年国家食品药品监督管理局颁布的红花注射液质量标准（WS3-B-3825-98-2012）中制法，选择10个关键质量监测点，见表1。

表1 红花注射液生产过程关键监控点

1.4 检测方法 取监控加工药液，用纯化水将药液稀释至0.5 g/mL生药量浓度，再用1%盐酸调pH至（7.0±0.1），过滤，取续滤液，作供试品。按照红花注射液质量标准（WS3-B-3825-98-2012）吸光度检测项下方法，检测供试品吸光度，记录，即得。

1.5 药材吸光度方法建立 1）检测法。取红花药材置硅胶干燥器中干燥24 h，研成细粉［4］。取药粉约2.50 g，分别置三角烧瓶中，精密加水50 mL，称定质量。连接冷凝管，置沸水浴中，加热2 h，取出放冷，称定质量，以水补足减失质量。过滤，精密量取续滤液2 mL置500 mL容量瓶中，加水至刻度，摇匀，作为供试品溶液。照紫外-可见分光光度法，以水为空白，（267±1）nm下，测定供试品（267±1）nm处吸光度，记录，即得。2）重复性实验。取红花药材细粉6份，照1）项下第1步检测法测定吸光度，计算RSD为1.87%，表明方法重复性良好。3）稳定性实验。取重复性试验后样，于0 h、2 h、4 h、8h、24 h照1）项下第1步检测法测定吸光度，计算RSD为0.4%，表明样品在24 h内稳定。

1.6 药材质量检测 见图1。取红花药材，照1.6第1步检测法测定吸光度，267 nm处为红花中黄酮类成分特征吸收峰。

图1 红花药材提取液紫外吸收光谱（200~300 nm）

2 结 果

2.1 工艺过程吸光度变化 见图2。在中试平台，按红花注射液标准制法生产3批红花注射液，检测10个工艺点样品吸光度，以工艺点为横坐标，吸光度为纵坐标作图。结果示红花注射液生产过程，吸光度逐渐下降，未出现上升，说明工艺过程不会造成对（267±1）nm吸光度有贡献的化学成分增加；要保证产品吸光度质量，控制红花药材吸光度是关键控制点之一。

图2 红花注射液工艺过程吸光度变化规律（n=3）

2.2 3年内红花药材质量检测 见表2。结果示2012年、2013年、2014年 3年内红花药材吸光度值在0.37～0.40之间，吸光度批间波动较小。

2.3 近3年药材吸光度质量控制分析 见图3。结果示最近3年药材吸光度质量稳定，均在平均值±2δ范围内；表明GAP基地生产的红花药材吸光度质量稳定。

表2 3年红花药材吸光度检测结果

图3 近3年红花药材吸光度质量控制图

3 讨 论

关于（267±1）nm处吸光度质量控制的意义，王常铭等［5］在红花注射液质量标准的研究中通过红花注射液对ADP诱导家兔血小板聚集影响的实验已经证实——红花注射液在 （267±1）nm处吸光度能够反映红花注射液的内在质量，因此选择（267±1）nm处吸光度作为红花药材的控制标准，具有质量控制意义。

红花注射液中的黄酮类成分为有效成分［6］。大多数黄酮类化合物分子中存在桂皮酰基和苯甲酰基组成的交叉共轭体系，其紫外光谱200~400 nm的区域内存在两个紫外吸收带，峰带Ⅰ （300~400 nm）和峰带Ⅱ（220~300 nm）［7］。说明红花注射液质量标准中 （267± 1）nm吸光度控制，实际是控制的黄酮类及其他具有苯甲酰基的的化学成分含量。

研究以 （267±1）nm吸光度追踪工艺过程中化学成分的变化，发现在整个工艺过程中，未出现吸光度的升高，说明在工艺过程中对（267±1）nm吸光度有贡献的化学成分无显著产生，提示原料的吸光度质量将决定红花注射液成品的吸光度质量，因此控制原料的吸光度稳定和质量下限，将有助于保证红花注射液成品质量。

检测2012年至2014年红花药材吸光度，显示红花药材年内批间波动较小；比较最近3年药材吸光度水平，显示近3年药材吸光度无显著性差异 （P＞0.05）；根据近3年的15批红花药材吸光度质量作质量控制图，发现15批原料质量波动都在质量警戒范围（±2δ）；结合工艺过程吸光度的损失率，认为原料吸光度应不低于0.35，能保证红花注射液成品吸光度质量合格。

综上研究和讨论，本研究建立红花药材吸光度检测方法及控制限度，可作为企业生产红花注射液的内控标准，也可作为评价红花药材质量的依据。

［1］ 田代华.实用中药辞典［M］.上卷.北京：人民卫生出版社，2002：812.

［2］ 中国食品药品监督管理局.WS3-B-3825-98-2012红花注射液质量标准［S］.2012.

［3］ 武永刚，李雪莹，王苏丽，等.红花黄色素化学成分及对心脑血管作用研究进展［J］.齐鲁药事，2011，30（8）：481-484.

［4］ 国家药典委员会.中华人民共和国药典（2010版一部）［M］.北京：中国医药科技出版社，2010：141.

［5］ 王常铭，窦爱兰，王天玲，等.红花注射液质量标准的研究［J］.中成药研究，1982，5（1）：17-19.

［6］ 刘倩，陈晨，戴忠，等.红花注射液有效成分的确定及不同厂家中量效关系的比较［J］.药物分析杂志，2012，32（7）：1158.

［7］ 姚新生.天然药物化学［M］.北京：人民卫生出版社，2001：184-186.

R289.5

A

1004-745X（2015）07-1197-03

10.3969/j.issn.1004-745X.2015.07.026

2015-01-05）