灵须护肝片对急性酒精性肝损伤的保护作用

綦 菲，陈丽艳，孙银玲，王伟明（黑龙江省中医药科学院中药所，哈尔滨150036）

灵须护肝片对急性酒精性肝损伤的保护作用

綦 菲，陈丽艳，孙银玲，王伟明*通信作者：王伟明，博士，研究员，硕士研究生导师，电话－（0451）55665478，电子信箱－zyyjy＠163.com
（黑龙江省中医药科学院中药所，哈尔滨150036）

目的 研究灵须护肝片对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。方法 以50％乙醇灌胃方法造成小鼠急性酒精性肝损伤模型，观察血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、肝组织三酰甘油（TG）、丙二醛（MDA）、还原型谷胱甘肽（GSH）的水平。结果 与模型对照组相比，阳性对照组、灵须护肝片中、高剂量组均可降低血清中ALT、AST的活性及肝组织中TG、MDA的含量（P＜0.05），提高肝组织中GSH的含量（P＜0.05）。结论 灵须护肝片对小鼠急性酒精性肝损伤具有保护作用，可显著降低ALT、AST活性，升高GSH含量，调节TG、MDA含量。

灵须护肝片；酒精性肝损伤；小鼠

酒精性肝病（alcoholic liver disease，ALD）是指由于大量长期饮酒导致的肝脏疾病，是我国常见的肝脏疾病之一，包括酒精性脂肪肝、肝炎、肝纤维化和肝硬化等类型［1-2］。其致病因素比较单一，通常是由于长期大量饮酒导致的。近年来，酒精性肝病的发病率逐年增加，严重威胁着人类的健康。据估计，全世界约有1 500万～2 000万人酗酒，这些人中10％～20％有不同程度的酒精性肝病［3］，因此，酒精性肝损伤的防治也成为人们关注的焦点。灵须护肝片是我院近年来研制开发的对酒精性肝损伤具有保护作用的保健食品，配方中所用的灵芝、玉米须等药材均为药食同源的中药，在解酒护肝的同时又起到补益身体、增强机体免疫力的作用。实验通过建立小鼠急性酒精性肝损伤模型，研究了灵须护肝片对酒精性肝损伤的保护作用。

1 材料

1.1 实验动物 72只雄性KM小鼠（长春亿斯实验动物技术有限责任公司，许可证号：SCXK-〔吉〕2013-0014，清洁级），体质量（20±2）g。

1.2 仪器与试药 10V-AC型半自动生化仪（韩国SECOMAN株式会社）；Infinite M200 Pro酶标仪（Tecan）；Sorvall ST 16高性能离心机（Thermo Fisher）；灵须护肝片（黑龙江省中医药科学院制剂室自制，批号131102）；葵花牌护肝片（黑龙江葵花药业股份有限公司，批号201310043）；三酰甘油（TG）试剂盒（北京北化康泰临床试剂有限公司）；丙二醛（MDA）试剂盒、还原型谷胱甘肽（GSH）试剂盒、谷草转氨酶（AST）试剂盒、谷丙转氨酶（ALT）试剂盒（南京建成生物工程研究所）。

2 方法

2.1 分组与给药［4-5］KM小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、阳性对照组（葵花护肝片）、灵须护肝片低剂量组（1.17 g/kg）、中剂量组（2.34 g/kg）、高剂量组（4.68 g/kg），每组12只，空白对照组和模型对照组给予等量蒸馏水，1次/d。连续灌胃给药30 d，第30天模型对照组、阳性对照组及各给药组1次灌胃给予50％乙醇，灌胃量为12mL/kg BW，禁食16 h，小鼠摘眼球取血，分离血清，脱臼处死，取出肝脏，－80℃保存。

2.2 检查指标及方法 采用微板法测定小鼠血清中ALT、AST活性，采用半自动生化仪检测小鼠肝脏组织中TG、MDA、GSH含量。

2.3 统计学处理 实验结果采用SPSS Statistics 19统计软件进行分析，结果以均数±标准差（±s）表示，用方差分析进行统计学检验。

3 结果

3.1 对血清AST、ALT活性的影响 与模型对照组比较，阳性对照组、灵须护肝片中、高剂量组血清中AST活性显著降低（P＜0.05）；阳性对照组、灵须护肝片低、中、高剂量组血清 ALT活性显著降低（P＜0.05），灵须护肝片高剂量组与阳性对照组间无统计学意义。见表1。

3.2 对肝组织TG、MDA、GSH含量的影响 与模型对照组比较，阳性对照组、灵须护肝片中、高剂量组肝组织中 TG、MDA含量显著降低（P＜0.05或P＜0.01），且灵须护肝片中剂量组对MDA的下调作用显著高于阳性对照组（P＜0.05），灵须护肝片中、高剂量组及阳性对照组肝组织中GSH含量显著提高（P＜0.05），与阳性对照组间无统计学意义。见表2。

表1 灵须护肝片对小鼠血清AST、ALT活性的影响（±s，n＝12）U/L

表1 灵须护肝片对小鼠血清AST、ALT活性的影响（±s，n＝12）U/L

注：与模型对照组比较，＃P＜0.05，＃＃P＜0.01，与阳性对照组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01

组别AST ALT空白对照组 44.63±12.40＃＃ 38.57±6.30＃＃模型对照组 90.80±18.17 75.22±7.01阳性对照组 56.24±13.16＃＃ 47.61±10.63灵须护肝片低剂量组 81.78±18.38△△ 64.35±8.77＃△△灵须护肝片中剂量组 68.48±14.90＃△ 54.10±8.89＃＃△灵须护肝片高剂量组 61.39±14.06＃＃ 46.21±9.44＃＃

表2 灵须护肝片对小鼠肝组织TG、MDA、GSH含量的影响（±s，n＝12）

表2 灵须护肝片对小鼠肝组织TG、MDA、GSH含量的影响（±s，n＝12）

注：与模型对照组比较，＃P＜0.05，＃＃P＜0.01，与阳性对照组比较，△P＜0.05

组 别 TG/（mmol/L）MDA/（nmol/mg）GSH/（g/L）空白对照组 3.97±2.56＃＃ 4.37±0.89＃＃ 2.20±0.46＃＃模型对照组 10.35±3.75 8.23±1.48 1.67±0.29阳性对照组 5.40±1.85＃＃ 6.83±0.46＃＃ 2.08±0.29＃＃灵须护肝片低剂量组9.69±1.80 7.60±1.26 1.93±0.41灵须护肝片中剂量组6.42±1.10＃＃ 5.81±1.38＃＃△ 2.03±0.34＃灵须护肝片高剂量组7.74±2.30＃＃ 7.10±1.21＃ 2.34±0.43＃＃

4 讨论

人体摄入酒精后，有90％～95％的乙醇在肝脏代谢［6］，在乙醇脱氢酶（ADH）和微粒体乙醇氧化酶系的作用下转变为乙醛，乙醛再氧化为乙酸［7］。肝脏内ADH和乙醛脱氢酶（ALDH）在辅酶Ⅰ（NAD＋）参与下对乙醇正常的生理代谢共同发挥作用［8］。H＋从底物上转移到NAD（氧化型辅酶Ⅰ），使其转变为NADH（还原型辅酶Ⅰ），NADH与NAD比值的升高可抑制线粒体三羧酸循环，使肝内脂肪酸代谢发生障碍，脂肪在肝细胞中堆积，最终导致脂肪肝的形成。ALT和AST是存在肝细胞浆和线粒体中的转氨酶，其活性的升高反映了肝细胞损伤的严重程度［9-10］。研究［11］发现，灵须护肝片可以显著降低血清中ALT和AST的活性，从而对肝细胞起到一定的保护作用，减轻肝细胞的损伤程度，灵须护肝片同时又可以升高肝脏中GSH含量。GSH是存在于肝细胞中的一种具有解毒功能的肽类，能清除体内的氧自由基，保护肝脏的合成。灵须护肝片对肝脏TG、MDA含量的调节作用，提示其可以减少脂肪在肝脏内的堆积，减轻细胞膜的损伤。上述研究表明，灵须护肝片对酒精性肝损伤能起到一定的保护作用。

Protective effect of Lingxu liver-protecting tablets on alcohol-induced liver injury

QIFei，CHEN Liyan，SUN Yinling，WANGWeiming*
（TCM Institute，Heilongjiang Traditional Chinese Medcine Academy of Sciences，Harbin 150036，China）

Objective To investigate the protective effectof Lingxu liver-protecting tablets on alcohol-induced acute liver injury inmice.M ethods The acute liver injury animalmodel was established in mice by 50％alcohol gavage.Activities of serum of alanine aminotransferase（ALT），aspartate aminotrans-ferase（AST），contentof triglyceride（TG），malondialdehyde （MDA），glutathione（GSH）in liver homogenatewere all studied.Results Compared with themodel control group，the positive control group，middle and high dosage of Lingxu liver-protecting tablets significantly decreased the activities of serum ALT and AST and the content of liver TG and MDA（P＜0.05），increased the content of liver GSH（P＜0.05）.Conclusion Lingxu liver-protecting tablets showed protective effects against acute liver injury induced by alcohol in mice.It can significantly reduce the activity of ALT and AST，increase the content of GSH，and regulate the content of TG and MDA.

Lingxu liver-protecting tablets；alcoholic liver injury；mice

book=232,ebook=18

R285.5

A

2095－6258（2015）02－0232－03

10.13463/j.cnki.cczyy.2015.02.005

綦 菲（1986－），女，硕士研究生，助理研究员，主要从事中药新药及保健食品的研究与开发。