老年胶质瘤患者术后组织中乙醛脱氢酶、Musashi-1和血管内皮生长因子表达的临床意义

侯晓峰 (武威市人民医院神经外科，甘肃 武威 733000)

胶质瘤病变发展过程中常出现多种蛋白的表达失调。乙醛脱氢酶-1(ALDH1)在肿瘤的发生、血管生成和细胞增殖中起到重要的促进作用〔1〕。Musashi-1是一种保守的神经RNA结合蛋白，可在祖细胞中表达，也被认为是干细胞的标志物，近来研究认为其可能与多种癌症相关〔2〕。血管内皮生长因子(VEGF)是最经典的血管内皮生长因子，对肿瘤和新生组织中的血管形成有重要价值〔3〕。本实验探讨胶质瘤老年患者术后肿瘤组织中ALDH1、Musashi-1和VEGF的表达及三者的关系。

1 材料与方法

1.1 材料 我院2012年1月至2013年4月胶质瘤老年患者术后组织86例作为观察组，其中男44例，女42例，年龄60～87(平均67.5)岁。纳入均符合世界卫生组织(WHO)中的诊断标准，并进行分级，其中Ⅰ级10例，Ⅱ级25例，Ⅲ级30例，Ⅳ级21例。患者术前均未进行任何放化疗。收集60例脑出血血肿清除术后周围正常的脑组织作为对照组，其中男30例，女30例，年龄60 ～85(平均64.3)岁。

1.2 免疫组织化学方法检测ALDH1、Musashi-1和VEGF蛋白的表达 ALDH1、Musashi-1和VEGF蛋白的浓缩液均购自武汉博士德生物工程有限公司，应用不同比例的稀释后摸索适应的条件，选择最理想的浓度进行正式实验。3种蛋白的检测应用免疫组化二步法，操作中严格质量控制。

1.3 结果判定标准 ALDH1、Musashi-1和VEGF蛋白的表达均定位于细胞质，以细胞质内染成棕黄色颗粒样物质为阳性表达，随机计数10个典型的高倍视野区域(400倍)，取其平均值，以阳性细胞≥25%为阳性表达，以阳性细胞＜25%为阴性表达。

1.4 统计学方法 应用SAS6.12软件进行χ2检验和线性相关分析。

2 结果

2.1 ALDH1、Musashi-1和VEGF在观察组和对照组中的表达观察组中ALDH1、Musashi-1和VEGF表达的阳性率明显高于对照组(P ＜0.000 1)，见表1。

2.2 观察组不同临床特征中ALDH1、Musashi-1和VEGF表达阳性率的比较 观察组中ALDH1、Musashi-1和VEGF表达的阳性率与肿瘤直径、分级及Ki67增殖指数密切相关，见表2。

2.3 观察组中ALDH1、Musashi-1和VEGF表达的关系 观察组中 ALDH1 和 Musashi-1(r=0.45，P=0.034 1)、ALDH1 和VEGF(r=0.49，P=0.013 5)、Musashi-1 和 VEGF(r=0.46，P=0.016 5)的表达均呈正相关性。

表1 ALDH1、Musashi-1和VEGF在观察组和对照组中的阳性表达〔n(%)〕

表2 观察组不同临床特征中ALDH1、Musashi-1和VEGF表达阳性率的比较〔n(%)〕

3 讨论

胶质瘤进展过程中血管增生活跃。胶质瘤中血管生成不仅是肿瘤生长的重要支持成分，也是肿瘤分级的重要病理基础。ALDH1是人体干细胞的标志，主要表达于起源的细胞，尤其是增殖活跃的上皮细胞。ALDH1可以对活化的血管内皮细胞的增殖和新生有重要作用。也有观点认为ALDH1的作用可能具有多向性，即不仅参与细胞的活化、增殖，也参与肿瘤的血管生成和转移〔4，5〕。Musashi-1是一类在神经系统特异表达的RNA结合蛋白，最早在果蝇中发现，后来研究发现Musashi-1在增殖活跃的细胞中表达增高〔6，7〕。有学者通过双标记免疫组化方法检测胃增殖性疾病中 Musashi-1的表达，结果显示Musashi-1主要表达在胃窦部的增殖细胞区域，并认为Musashi-1高表达在肿瘤进展对促进增殖有重要作用〔8〕。

ALDH1、Musashi-1对恶变细胞的增殖活性明显升高，也使两种蛋白对多向分化潜能细胞的诱导作用增强〔9，10〕，此机制也是肿瘤细胞恶变的重要机制，胶质瘤作为恶性程度较高的肿瘤，细胞分化及细胞形态更趋于祖细胞，因此ALDH1、Musashi-1的表达明显升高。ALDH1、Musashi-1和VEGF联合检测可能为临床上判断生物学行为提供重要的支持。本实验提示ALDH1和Musashi-1是重要的血管生成促进因子，其作用途径是通过活化VEGF实现的。ALDH1、Musashi-1高表达时使肿瘤细胞产生VEGF增多，促进CD34、CD105阳性的肿瘤新生血管的生成，加速肿瘤生长及侵袭作用。但是关于 ALDH1、Musashi-1和VEGF具体作用机制尚有待更多基础实验研究证实。

1 张海涛，金美善，石爱平，等.肿瘤干细胞标记物ALDH1在非浸润性膀胱癌组织中的表达及其临床意义〔J〕.吉林大学学报(医学版)，2013;39(2):326-8.

2 杨爱萍，姜 藻，陈 静.Musashi-1、Ki67的表达与食管鳞癌的临床意义〔J〕.中国现代医生，2009;47(32):58-61.

3 Matsune S.Allergic rhinitis and vascular endothelial growth factor〔J〕.J Nippon Med Sch，2012;79(3):170-5.

4 Schwartz T，Stark A，Pang J，et al.Expression of aldehyde dehydrogenase 1 as a marker of mammary stem cells in benign and malignant breast lesions of Ghanaian women〔J〕.Cancer，2013;119(3):488-94.

5 张海谱，单保恩，艾 军，等.ALDH1和CD55表达在乳腺癌预后评估中的意义〔J〕.解放军医学杂志，2010;35(1):20-3.

6 张建东，周志华，徐桂芳，等.早期胃印戒细胞癌内肿瘤干细胞分布的病理学研究〔J〕.中国肿瘤，2012;21(4):316-9.

7 徐启英，刘冰洁，李小平.子宫内膜癌干细胞研究进展〔J〕.实用妇产科杂志，2012;28(8):627-9.

8 Akasaka Y，Sakawa Y，Fujita K，et al.Expression of a candidate marker for progenitor cells，Musashi-1，in the proliferative regions of human antrum and its decreased expression in intestinal metaplasia〔J〕.Histopathology，2005;47(4):348-56.

9 黄江生.胆总管腺癌Musashi-1和ALDH1表达及其临床病理意义〔J〕.中国现代医学杂志，2011;21(35):4409-11.

10 毕小恺，吴诚义，韩明利，等.乳腺癌中ALDH1的表达与其分子亚型及ABCG2的关系〔J〕.中国普通外科杂志，2011;20(11):1225-7.