丹蛭降糖胶囊对糖尿病肾病大鼠治疗作用的观察

郭呈林，方朝晖，江 婷，杨 慧

(1.安徽中医药大学 中医内科学教研室，安徽 合肥 230038;2.安徽中医药大学第一附属医院 内分泌科，安徽 合肥230031)

糖尿病肾病是糖尿病常见并发症之一，其作为糖尿病最常见的微血管并发症，已成为终末期肾病最常见的病因。糖尿病肾病的发病机制复杂，大量的临床及实验研究表明代谢紊乱慢性高血糖是导致糖尿病肾病的主要原因，蛋白尿也是导致肾脏病变进行性发展的重要危险因素，开始可以是间歇性蛋白尿，后逐渐加重变为持续性蛋白尿，由于长期的蛋白尿及糖尿病本身蛋白质代谢失调，最终可死于尿毒症。因此严格的控制血糖、降低蛋白尿量可使DN发生率明显降低。

中医认为糖尿病肾病是在消渴病气虚阴津亏损，燥热偏盛的基本病机基础上，病久血行不畅、血脉瘀滞。气虚阴亏为本，瘀血为病理产物，又复为致病因素，中医通过中药复方，辩证论治，采用益气养阴活血方治疗糖尿病肾病。本文旨在探讨益气养阴活血方丹蛭降糖胶囊对糖尿病肾病大鼠的治疗作用，探讨其药物作用机制，为其应用于临床治疗糖尿病肾病提供可靠的依据。

1 材料与方法

1.1 动物与试剂 选择健康雄性成年SD大鼠80只，体质量(350±40)g，安徽省医学科学研究所实验动物中心提供，皖实动准字第03号;饲养环境:安徽中医药大学动物实验中心，按分笼饲养，室内通风及光线良好，温度湿度适宜;益气养阴活血制剂方选丹蛭降糖胶囊(太子参、丹皮、生地黄、泽泻、菟丝子、水蛭组成)由安徽中医药大学第一附属医院药物制剂中心提供，皖药制字 Z20080016，批号:20110104。

1.2 分组与造模 将80只大鼠随机分为A、B、C、D、E 5组，每组16只，高脂饲料喂养，不限摄水。A组假手术对照组，B～E组行单侧肾脏结扎手术后STZ腹腔注射，手术实验大鼠禁食12 h，注射戊巴比妥钠溶液进行麻醉［1］。确认麻醉后A组大鼠切开皮肤及肌层后再行缝合，B～E组沿肾蒂同时结扎肾脏动静脉及输尿管。术后2周，各组大鼠禁食18h后A组大鼠一次性注射同等剂量的柠檬酸缓冲液，B～E组一次性腹腔注射1%链脲佐菌素溶液55 mg/kg，具体给药量为每100 g体质量0.55 ml，注射后大鼠自由摄食摄水。造模完成72h后，经尾静脉采血测血糖。造模成功标准:①空腹血糖≥16.65 mmol/L;②尿糖强阳性;③尿量大于对照组的50%，即DN模型成立［2］。造模结束后，A组大鼠剩余14只，B组大鼠剩余13只，C组大鼠剩余13只，D组大鼠剩余12只，E组大鼠剩余13只，脱落原因主要为造模技术不熟练、造模不成功等。喂养1周后检测各组大鼠空腹血糖、糖化血红蛋白，留取各组大鼠尿量，测量24 h尿蛋白量。

1.3 治疗方法 假手术组A组、模型对照组B组分别予以2ml蒸馏水灌胃，C、D、E组分别为中药低剂量1.5 g生药/kg、中剂量组3 g生药/kg、高剂量组6 g生药/kg，于给药6周末采用葡萄糖氧化酶法检测大鼠空腹血糖、免疫凝胶扩散法测糖化血红蛋白，代谢笼收集大鼠24 h尿液，计算24 h尿量及24 h尿蛋白定量。治疗结束后，A组大鼠剩余13只，B组大鼠剩余10只，C组大鼠剩余11只，D组大鼠剩余11只，E组大鼠剩余12只，脱落及死亡原因主要为高血糖引起的代谢紊乱导致脏器衰竭等。

1.4 统计学处理统计方法所得数据均经SPSS 17.0统计软件多组间方差分析，以均数±标准差(±s)表示，多组间采用F检验，两两比较采用q检验。

2 结果

2.1 益气养阴活血中药制剂对糖尿病肾病大鼠一般情况的影响 给药6周后与模型对照组比较，中药低、中、高剂量组大鼠精神状态好于模型对照组，较少竖毛，活动较好，有白内障出现(中药低剂量组3只、中药中剂量组1只、中药高剂量组2只)，低于模型组4只;同时与模型组比较，中药中、高剂量组均能明显增加体质量，有差异性(P＜0.05)。

表1 各组糖尿病肾病大鼠体质量变化的比较(g)

2.2 益气养阴活血中药制剂对糖尿病肾病大鼠血糖的影响 模型对照组大鼠血糖和假手术组大鼠血糖比较明显升高，有差异性(P＜0.05);中药低、中、高剂量组大鼠血糖与模型对照组大鼠血糖比较明显降低，有差异性(P＜0.05);中药中、高剂量组降低血糖作用更明显，有显著性差异(P＜0.01)。

表2 各组糖尿病肾病大鼠血糖变化的比较

2.3 益气养阴活血中药制剂对糖尿病肾病大鼠糖化血红蛋白的影响 给药6周后模型对照组大鼠HbA1c和假手术组大鼠HbA1c比较明显升高，有差异性(P＜0.01);中药中剂量组大鼠HbA1c与模型对照组大鼠HbA1c比较明显降低，有差异性(P＜0.05);中药高剂量组降低大鼠HbA1c作用更明显，有显著性差异(P ＜0.01)。

表3 各组糖尿病肾病大鼠糖化血红蛋白的比较

2.4 益气养阴活血中药制剂对糖尿病肾病大鼠尿量变化的影响 给药6周后模型对照组大鼠尿量和假手术组大鼠尿量比较明显升高，有差异性(P＜0.01);中药低、中、高剂量组大鼠尿量与模型对照组大鼠尿量比较明显降低，差异有显著性(P＜0.01)。

表4 各组糖尿病肾病大鼠糖尿量变化的比较

2.5 益气养阴活血中药制剂对糖尿病肾病大鼠24 h尿蛋白量的影响 给药6周后模型对照组大鼠24 h尿蛋白量和假手术组大鼠24 h尿蛋白量比较明显升高，有差异性(P＜0.05);中药中剂量组大鼠24 h尿蛋白量与模型对照组大鼠24 h尿蛋白量比较明显降低，有差异性(P＜0.05);中药高剂量组降低大鼠24 h尿蛋白量降低有显著差异(P＜0.01)。

表5 各组糖尿病肾病大鼠尿蛋白变化的比较(mg/24 h)

3 讨论

本实验发现，益气养阴活血方丹蛭降糖胶囊能改善糖尿病肾病大鼠一般状况、降低其血糖、糖化血红蛋白、控制尿量、减少尿蛋白的排泄，改善大鼠的肾功能。益气养阴活血方丹蛭降糖胶囊在治疗糖尿病肾病方面有明显的作用，其机理可能是以下几方面:①高血糖可引起肾脏病理生理改变，包括糖化产物增加，肾小球滤过率增高，氧化应激增强等都是导致肾小球损害的主要因素，益气养阴活血方丹蛭降糖胶囊通过降低血糖和HbA1c，达到治疗和延缓糖尿病肾病的关键因素。②蛋白尿的产生与肾小球滤过屏障正常的结构遭到破坏有着十分密切的关系，蛋白尿不仅是早期诊断糖尿病肾病的一个重要指标，而且也是导致肾脏病变进行性发展的重要危险因素［3］。益气养阴活血方丹蛭降糖胶囊通过改善糖尿病肾病大鼠多尿、蛋白尿的症状，对肾小球和肾小管的功能起到修复和改善作用。

从中医中药治疗糖尿病肾病分析，糖尿病肾病是在消渴病基础上发展而来，属于中医消渴病肾病范畴，其主要病因有先天禀赋不足、饮食失宜、情志不遂、劳欲过度等。早期病机普遍存在肾气不足，病程迁延气阴两亏，气虚则不能推动血液运行，阴虚则耗伤津液，炼液为痰，渐至血脉瘀阻，形成“微型癓瘕”，引起肾元受损，浊毒内停［4］，发展为消渴血管病变糖尿病肾脏疾病。方中太子参补益脾肾之气;生地黄滋养脾肾之阴;菟丝子补肾固精;丹皮、水蛭活血化瘀、行气通络;泽泻清热祛痰浊。全方阴阳互补，通补兼施，共奏益气养阴、活血化瘀之功。

以往大量研究发现牡丹皮中含有的丹皮多糖既能降低糖尿病模型大鼠的血糖，又可通过影响血流动力学的改变而参与微血管病变的发生，对糖尿病大鼠血管内皮细胞具有一定的保护作用［5］;水蛭中含有水蛭素等多种活性多肽，具有抗血栓，降血脂，降低尿蛋白，减轻肾脏病变的作用［6］;泽泻能利尿，降压，扩张血管，对消除蛋白尿有一定的效果［7］;生地黄中所含的生地黄低聚糖可明显降低四氧嘧啶糖尿病大鼠高血糖水平，减轻大鼠的蛋白尿、提高大鼠血清白蛋白水平、改善肾功能［8］;菟丝子的有效部位菟丝子多糖对糖尿病大鼠具有明显的降糖和降低糖化血清蛋白含量的作用，改善体质量减低等症状［9］;太子参多糖在一定程度上保护模型大鼠胰岛β细胞从而降低血糖［10］。各种药物组方起到降低血糖，治疗糖尿病肾病的作用。

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