盐城市2013年手足口病病原学特征分析*

王 瑶，陈国清，邵荣标，许晓庆

（盐城市疾病预防控制中心，江苏224000）

手足口病（hand,foot and mouth disease,HFMD）是一种常见多发传染病，全球流行，多发生于婴幼儿，由多种肠道病毒感染引起的相同临床症候群。临床上多以发热和手、足、口腔、臀部等部位皮疹或疱疹为主要特征。少数重症病例可累及中枢神经系统，引发心肌炎、无菌性脑膜脑炎、神经源性肺水肿等严重并发症甚至死亡[1-2]。自1957年首次报道手足口病以来[3]，CVA16和EV71成为手足口病的主要病原[4]。2013年对盐城地区各县市区手足口病监测病例进行病原学检测及特征分析，发现盐城地区肠道病毒株在病原谱的构成上发生了很大变化，为肠道病毒病原学的研究和国内手足口病的防控提供参考经验。

1 资料与方法

1.1 一般资料 盐城各县市区被传染病门诊诊断为手足口病患儿（诊断标准参照卫生部颁布的《手足口病诊疗指南》2010版），征得家长同意，采集患儿的咽拭子和肛拭子。所有患儿标本的采集时间均在发病3天内，并在冷藏的条件下，采集后48h内送到本实验室。

1.2 方法 （1）核酸提取：用QIAamp Viral RNA Mini kit(QIAGEN,德国)提取病毒 RNA。（2）实时荧光RT-PCR检测：采用肠道病毒实时荧光RT-PCR检测试剂盒，配置25μL反应体系，用ABI7500荧光定量PCR仪进行反应。在试验条件均成立的前提下，按照试剂盒提供的Ct值判断标准对核酸样本进行判断。（3） 试剂：QIAamp Viral RNA Mini kit(QIAGEN,德国)；无水乙醇；肠道病毒通用、EV71和CVA16(1+2型)以及CVA6实时荧光RT-PCR检测试剂盒（江苏硕世生物科技有限公司）。

1.3 统计学处理 统计学分析数据用SPSS15.0软件计算，采用χ2检验分析结果。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 基本资料 共采集疑似手足口患儿491例，其中男321例，女170例，男女性别比1.9︰1。其中临床重症病例26例中，男18例，女8例，男女性别比2.25∶1。重症病例在性别构成间差异无统计学意义(χ2=0.18，P＞0.05)，在年龄组间比较差异有统计学意义 (χ2=18.38，P＜0.01)，其中 0～3 岁组的重症病例较高，见表1。

表1 2013年盐城市手足口病例性别年龄构成

2.2 标本EVU/EV71/CVA16/CVA6荧光RT-PCR结果 患儿491例标本中，共检出肠道病毒核酸阳性193例（39.31%）中，EV71型35例（18.13%），CVA16型35例（18.13%），CVA6型96例（49.74%），其他未分型27例（13.99%）。EV71与CVA16病例之间发病比较差异无统计学意义（χ2=3.36，P＞0.05），CVA6与EV71、CVA16病例之间发病比较，差异有统计学意义（χ2=62.9，P＜0.01）。临床重症病例 14例中，EV71型3例，CVA16型为0例，CVA6型9例，未分型2例，CVA6与EV71、CVA16三者发病比较，差异有统计学意义（χ2=8.0，P＜0.05），见表 2、3。

表2 盐城市2013年手足口病原EV71/CVA16荧光PCR结果

表3 盐城市2013年手足口病原CVA6普通病例与重症病例分型情况比较

3 讨 论

手足口病是某些不同血清型肠道病毒感染而引起的一种常见急性传染病。引起手足口病的肠道病毒有20多种，其中以CVA16和EV71型最为常见。CVA16型与EV71型有着类似的基因结构[5]，但两者引起的疾病程度却有所区别，前者引起手足口病病一般症状，预后较好。后者更易导致心肌炎、神经源性肺水肿、脑干脑炎、急性迟缓性麻痹等并发症，易导致患儿死亡[6]。本研究除检测到常见的EV71和CVA16外，尚检测到大量的CVA6型肠道病毒。

本次研究发现，2013年盐城地区手足口病多发生于5岁以内儿童，与国内报道基本一致。其中1～4岁年龄组发病数最高，这可能与该年龄段幼儿好动、不懂卫生且机体免疫力较低而容易被感染有关。3岁以下幼童易出现重症病例。在确诊的193例患儿中，EV71和CVA16感染的病例只占其中的一小部分。而CVA6型成为优势流行株，且成为重症手足口病的主要病原体，使引起手足口病在传统病原谱上，普通病例和重症病例的构成发生了很大变化。即由以往常见的EV71和CVA16型转变为CVA6型。近年来,国外也有肠道病毒CVA6致病的报道，如2008年芬兰手足口病爆发流行时发现病原体中有CVA6[7]，患者除有手足口病的症状外，部分患者出现神经系统症状，还有一部分患者在恢复期伴有脱甲[8]。本次研究发现盐城地区手足口病的病原体除EV71、CVA16和CVA6型外，还有不能分型的其他肠道病毒。这些未分型的非优势株同样引起重症手足口病，在14例重症病例中占14.28%。

目前，关于CVA6在手足口病中的作用还不十分清楚，在日本和台湾CVA6与疱疹性咽峡炎的爆发相关。令人关注的是新加坡报告CVA6在引起手足口病中，与CVA16和EV71同等重要[9]。CVA6是否会成为区域性手足口病的重要病原，需要进一步检测和观察。现在国内外尚无针对性的疫苗和特异性的治疗手段，因此早发现、早隔离治疗是预防和控制该病的关键。分子生物学方法对于手足口病的快速检测显得尤为重要。手足口病不是一种陌生的疾病，在不同时期、不同地区发生手足口病具有不同的流行特征，临床特征也存在差异，因此对于病原体的研究具有重要意义。

[1]吴艳.1359例手足口病流行病学分析［J］.中国热带医学,2006,6(4):607.

[2]王晓华,李文琳.小儿手足口病1602例报告［J］.中华流行病学杂志,2001,22(4):272.

[3]Robinson CR,Doane FW,Rhodes AJ.Report of an outbreak of febrile illness with pharyngeal lesions and exanthem:Toronto,summer 1957;isolation of group A Coxsackie virus［J］.Can Med Assoc J,1958,79(8):615-621.

[4]Chatproedprai S,Theanboonlers A,Korkong S,et al.Clinical and molecular characterization of hand-foot-and-mouth disease in Thailand,2008-2009［J］.Jpn J Infect Dis,2010,63(4):229-233.

[5]Mcminn PC.An overview of the evolution of enterovirus 71 and its clinical and public health significance［J］.FEMS Microbiol Rev,2002,26(1):91-107.

[6]周丽玲.肠道病毒71型与手足口病的研究进展［J］.中国妇幼保健,2013,28(3):562-564.

[7]Blomqvist S,Klemola P,Kaijalainen S,et al.Co-circulation of coxsackieviruses A6 and A10 in hand,foot and mouth disease outbreak in Finland［J］.J Clin Virol,2010,48(1):49-54.

[8]Osterback R,Vuorinen T,Linna M,et al.Coxsackievirus a6 and hand,foot,and mouth disease,Finland［J］.Emerg Infect Dis,2009,15(9):1485-1488.

[9]Ang LW,Koh BK,Chan KP,et al.Epidemiology and control of hand,foot and mouth disease in Singapore,2001-2007［J］.Ann Acad Med Singapore,2009,38(2):106-112.