消渴丸对GK大鼠心、肾影响的研究

邹 琦 刘菊妍 吴燕梅 周 杰

(1广州白云山中一药业有限公司，广州，510530;2广州医药集团有限公司，广州，510530)

消渴丸为口服降糖药，具有益气养阴、清热生津的功效，临床主要用于2型糖尿病，大量研究表明消渴丸对糖尿病具有良好的控制作用[1－3]。消渴丸由格列本脲和中药组分组成，格列本脲为磺脲类降糖药，降糖作用已被研究证实，然而中药组分在组方中发挥着何种作用却未见相关报道，为此，笔者选用自发性2型糖尿病大鼠－GK大鼠为研究对象进行了系列的研究，旨在发现消渴丸中药组分在消渴丸组方中发挥的作用。

1 材料

1.1 实验动物 Wistar大鼠:13只，SPF级，雄性，180～220 g，GK 大鼠:90 只，SPF 级，雄性，180 ～220 g，均从上海斯莱克实验动物有限公司购入，实验动物质量合格证号:0066092、0066093。

1.2 受试品 消渴丸、消渴丸中药组分、格列本脲，广州白云山中一药业有限公司提供，批号M01084，消渴丸由葛根、地黄、黄芪、天花粉、玉米须、南五味子、山药、格列本脲组成，每10丸含格列本脲2.5 mg。消渴丸中药组分由葛根、地黄、黄芪、天花粉、玉米须、南五味子、山药组成，不含格列本脲。

1.3 试剂 血脂测定试剂盒(购自北京利得曼生化技术有限公司904281HY);血糖试纸(日本 ARKRAY Factory Inc生产)。

1.4 主要仪器 GT－1640型血糖仪(日本京都);ASP 300全密封自动脱水机(Leica公司);石蜡包埋机(Leica公司);Microm HM400平推式切片机(德国MICROM)。JVC TK－C1381摄像仪(日本 JVC);电镜(日立HITACHI电子显微镜)。

2 方法

2.1 剂量设计 消渴丸高、中、低剂量分别设定为2.8、1.4、0.7 g(11.2、5.6、2.8 丸)/kg，相当于成人临床使用量[7.5 g/(人·d)]的4、2、1倍。消渴丸中药组分高、中剂量组分别设定为2.8、1.4 g(11.2、5.6、2.8丸)/kg、格列本脲高、中剂量组分别设定为2.8、1.4 mg/kg，相当于成人临床使用量[7.5 mg/(人·d)]的4、2倍。为便于表述消渴丸中药组分在以下叙述中称之为“消渴丸A”。

2.2 分组、实验 选取检疫合格的Wistar大鼠13只，GK大鼠90只，8～10周龄。GK大鼠先用高脂饲料饲养2周诱发高血糖，挑选随机血糖高于11.1 mmol/L的GK大鼠80只用于本实验，剩余10只GK大鼠淘汰;Wistar大鼠常规饲养。2周后选取Wistar大鼠为空白组，GK大鼠根据随机血糖浓度分为8组，即模型组、消渴丸高、中、低剂量组，消渴丸A高、中剂量组、格列本脲高、中剂量组，每组10只GK大鼠。分组后各试验组按设定剂量每天灌胃给药1次，连续24周，给药容积10 mL/kg，空白组、模型组按相同条件灌服等容积的0.5%羧甲基纤维素钠(CMC－Na)。于给药第24周末所有大鼠处死后取大鼠心脏、肾脏，取出的心脏、肾脏用于组织形态学检查和电镜超微结构观察[4－6]。

3 结果

3.1 消渴丸、消渴丸A、格列本脲对GK大鼠心脏、肾脏组织形态学的影响 试验结果表明:1)空白组及模型组各动物心肌纤维排列整齐，结构清晰完整，染色均匀，闰盘和横纹清晰可见，核呈卵圆形居中，间质血管未见扩张，亦未见炎细胞浸润及间质纤维组织增生。各药物组心肌结构与空白组、模型组相比均未见明显异常。2)空白组各动物肾脏被膜完整，肾小球未见增大或缩小及渗出等变化，肾小管上皮细胞未见水肿性变化，管腔内未见渗出物及管型。肾间质血管未见扩张及炎细胞浸润。模型组各动物肾脏被膜稍增厚，被膜下疏松，肾小球体积略增大，肾小囊未见明显扩张或萎缩;其他各组动物肾脏均有不同程度的改变，主要表现为透明管型的形成、被膜增厚，个别动物肾小球及肾小管间少量炎细胞浸润等变化。与模型组比较，除格列本脲组外其他各给药组试验动物病变程度均有一定程度减轻，其中消渴丸中剂量组、消渴丸低剂量组、消渴丸A高剂量组肾脏的变化程度稍轻，消渴丸高剂量组稍明显。

3.2 消渴丸、消渴丸A、格列本脲对GK大鼠心脏、肾脏超微结构的影响 实验结果表明:1)各给药组动物的心肌细胞结构与模型对照组比较，心肌超微结构的异常变化都有不同程度地减轻;而消渴丸高剂量组、消渴丸A高剂量组减轻的程度比较明显。2)与模型组相比，各药物组除格列本脲组外均有不同程度的保护作用;而消渴丸高剂量组、消渴丸A高剂量组、消渴丸中剂量组较明显，消渴丸高剂量组尤为显著。见图1、图2。

图1 消渴丸、消渴丸A、格列本脲对GK大鼠心脏超微结构的影响

图2 消渴丸、消渴丸A、格列本脲对GK大鼠肾脏超微结构的影响

4 讨论

GK大鼠是1975年 Goto等人[5]从211个 Wistar大鼠中经口服糖耐量实验选出18个轻度糖耐量减退的大鼠，经反复筛选培养形成的与人类2型糖尿病相似的自发性非肥胖2型糖尿病大鼠。该鼠主要表现为葡萄糖刺激的胰岛素分泌受损、β细胞功能受损等，长期患病后，出现各种并发症和神经系统疾病。Willa Hsueh研究表明[7]GK大鼠是研究2型糖尿病的一种较为理想的国际公认的动物模型。本研究对消渴丸进行了初步的拆方研究，主要考察消渴丸、消渴丸中药组分(消渴丸A)、消渴丸化药组分(格列本脲)对2型糖尿病GK大鼠血心脏和肾脏的影响。

本研究结果表明光镜观察各实验组心肌细胞未见明显差别;光镜观察肾脏被膜增厚，肾小球体积略增大，皮质部小灶性肾小管变性，肾小管间炎细胞浸润;电镜观察心肌细胞发现肌纤维明显减少，模糊、排列疏松，Z线模糊;线粒体聚集，嵴断裂、消失或不发达;电镜观察肾小球毛细血管袢结构基本清晰，基底膜节段性均质增厚，部分较明显;毛细血管周围足细胞足突部分融合，形态短小模糊，表明2型糖尿病大鼠诱发成功，并且还并发了心、肾并发症。

心、肾组织形态和超微结构研究结果表明，消渴丸中药组分、消渴丸对GK大鼠心肾超微结构和肾脏的组织形态均具有明显的保护作用，而格列本脲对上述脏器的保护作用不明显，早有研究表明糖尿病患者久病并发糖尿病心肌病和糖尿病肾病的比例非常高[8]，因此，根据本研究结果可判断，消渴丸中药组分在消渴丸组方中发挥着预防糖尿病心、肾并发症发生的作用。

综上所述，消渴丸中药组分、消渴丸均具有改善GK大鼠心脏、肾脏超微结构的作用，而格列本脲对上述测定指标的影响不明显。根据本研究结果可推断，消渴丸中药组分在消渴丸组方中主要发挥着预防糖尿病心、肾并发症的作用，但其具体的作用机制尚不清晰，值得深入研究。

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