虾过敏原Pen a1抗原表位的关键氨基酸分析

牟慧 高美须 李淑荣 王志东 潘家荣　赵杰 支玉香 李树锦 赵鑫

1引言

虾蟹和鱼类因其味道鲜美，营养丰富，被广大民众所喜爱。但是虾类隶属于国际粮农组织（FAO）公布的八大类食物过敏原中的甲壳类过敏原＼[1＼]，虾过敏问题一直以来广受关注。研究表明， 虾中主要过敏原是Pen a1，分子量36 kDa，是一种原肌球蛋白＼[2＼]。在食物过敏中，过敏原中的抗原表位即抗原决定簇起重要作用＼[3，4＼]。2002年，Ayuso等＼[5＼]利用交叠肽合成法，用患者的过敏血清鉴定出Pen a1中有5个IgE结合区，共8个线性抗原表位，见表1。表位主要由5～20个氨基酸组成，其中每个氨基酸在表位中所起的作用均不同。有些氨基酸残基在表位中起关键作用，这些特定氨基酸的存在对蛋白质构象起了关键性的作用，其发生变化会引起蛋白质的功能降低甚至丧失＼[5＼]，即核心氨基酸或者关键氨基酸残基。因此，如何定位出过敏原中的关键氨基酸，并了解它们的作用机理， 对脱敏具有重要意义。

目前， 已经有很多关于关键氨基酸的研究。筛选关键氨基酸的方法主要有两种，一是对所有过敏原进行序列比对，找出其中表位区域所共有的氨基酸或氨基酸组合。Emoto等＼[6＼]通过序列比对的方法分析了腹足类及双壳类动物之间的交互作用。Liang等＼[7＼]对3种蟹原肌球蛋白进行序列比对，分析其同源性超过99.2%。二是将表位区域的氨基酸进行定向突变，通过检测突变后表位区域的致敏性来筛选。早在1996年，Ikagawa等＼[8＼]就利用氨基酸替代的方法，分析单个氨基酸取代对雪松花粉过敏原Cry j1表位活性的影响。Lehrer 等＼[9＼] 发现将Pen a1的特定位置的氨基酸取代，将会使其抗原决定簇完全丧失免疫原性。何晓阳等＼[10＼]利用定点突变的方法分析出了对人体尼古丁代谢酶CYP2A6和CYP2A13的关键氨基酸残基。Zheng等＼[11＼]通过将虾原肌球蛋白与人和猪的序列对比，利用变异氨基酸取代的方法，分析出F和S为peptide10的关键氨基酸。Cheng等＼[12＼]采用丙氨酸逐个替代的方法，分析筛选出了真菌主要过敏原Pen ch18 的关键氨基酸。

1引言

虾蟹和鱼类因其味道鲜美，营养丰富，被广大民众所喜爱。但是虾类隶属于国际粮农组织（FAO）公布的八大类食物过敏原中的甲壳类过敏原＼[1＼]，虾过敏问题一直以来广受关注。研究表明， 虾中主要过敏原是Pen a1，分子量36 kDa，是一种原肌球蛋白＼[2＼]。在食物过敏中，过敏原中的抗原表位即抗原决定簇起重要作用＼[3，4＼]。2002年，Ayuso等＼[5＼]利用交叠肽合成法，用患者的过敏血清鉴定出Pen a1中有5个IgE结合区，共8个线性抗原表位，见表1。表位主要由5～20个氨基酸组成，其中每个氨基酸在表位中所起的作用均不同。有些氨基酸残基在表位中起关键作用，这些特定氨基酸的存在对蛋白质构象起了关键性的作用，其发生变化会引起蛋白质的功能降低甚至丧失＼[5＼]，即核心氨基酸或者关键氨基酸残基。因此，如何定位出过敏原中的关键氨基酸，并了解它们的作用机理， 对脱敏具有重要意义。

目前， 已经有很多关于关键氨基酸的研究。筛选关键氨基酸的方法主要有两种，一是对所有过敏原进行序列比对，找出其中表位区域所共有的氨基酸或氨基酸组合。Emoto等＼[6＼]通过序列比对的方法分析了腹足类及双壳类动物之间的交互作用。Liang等＼[7＼]对3种蟹原肌球蛋白进行序列比对，分析其同源性超过99.2%。二是将表位区域的氨基酸进行定向突变，通过检测突变后表位区域的致敏性来筛选。早在1996年，Ikagawa等＼[8＼]就利用氨基酸替代的方法，分析单个氨基酸取代对雪松花粉过敏原Cry j1表位活性的影响。Lehrer 等＼[9＼] 发现将Pen a1的特定位置的氨基酸取代，将会使其抗原决定簇完全丧失免疫原性。何晓阳等＼[10＼]利用定点突变的方法分析出了对人体尼古丁代谢酶CYP2A6和CYP2A13的关键氨基酸残基。Zheng等＼[11＼]通过将虾原肌球蛋白与人和猪的序列对比，利用变异氨基酸取代的方法，分析出F和S为peptide10的关键氨基酸。Cheng等＼[12＼]采用丙氨酸逐个替代的方法，分析筛选出了真菌主要过敏原Pen ch18 的关键氨基酸。

1引言

虾蟹和鱼类因其味道鲜美，营养丰富，被广大民众所喜爱。但是虾类隶属于国际粮农组织（FAO）公布的八大类食物过敏原中的甲壳类过敏原＼[1＼]，虾过敏问题一直以来广受关注。研究表明， 虾中主要过敏原是Pen a1，分子量36 kDa，是一种原肌球蛋白＼[2＼]。在食物过敏中，过敏原中的抗原表位即抗原决定簇起重要作用＼[3，4＼]。2002年，Ayuso等＼[5＼]利用交叠肽合成法，用患者的过敏血清鉴定出Pen a1中有5个IgE结合区，共8个线性抗原表位，见表1。表位主要由5～20个氨基酸组成，其中每个氨基酸在表位中所起的作用均不同。有些氨基酸残基在表位中起关键作用，这些特定氨基酸的存在对蛋白质构象起了关键性的作用，其发生变化会引起蛋白质的功能降低甚至丧失＼[5＼]，即核心氨基酸或者关键氨基酸残基。因此，如何定位出过敏原中的关键氨基酸，并了解它们的作用机理， 对脱敏具有重要意义。

目前， 已经有很多关于关键氨基酸的研究。筛选关键氨基酸的方法主要有两种，一是对所有过敏原进行序列比对，找出其中表位区域所共有的氨基酸或氨基酸组合。Emoto等＼[6＼]通过序列比对的方法分析了腹足类及双壳类动物之间的交互作用。Liang等＼[7＼]对3种蟹原肌球蛋白进行序列比对，分析其同源性超过99.2%。二是将表位区域的氨基酸进行定向突变，通过检测突变后表位区域的致敏性来筛选。早在1996年，Ikagawa等＼[8＼]就利用氨基酸替代的方法，分析单个氨基酸取代对雪松花粉过敏原Cry j1表位活性的影响。Lehrer 等＼[9＼] 发现将Pen a1的特定位置的氨基酸取代，将会使其抗原决定簇完全丧失免疫原性。何晓阳等＼[10＼]利用定点突变的方法分析出了对人体尼古丁代谢酶CYP2A6和CYP2A13的关键氨基酸残基。Zheng等＼[11＼]通过将虾原肌球蛋白与人和猪的序列对比，利用变异氨基酸取代的方法，分析出F和S为peptide10的关键氨基酸。Cheng等＼[12＼]采用丙氨酸逐个替代的方法，分析筛选出了真菌主要过敏原Pen ch18 的关键氨基酸。