苦荞茶对D-半乳糖所致衰老小鼠MDA和MAO影响的实验研究

邓洋 张利霞

(包头医学院公共卫生学院，014060)

苦荞茶对D-半乳糖所致衰老小鼠MDA和MAO影响的实验研究

邓洋 张利霞

(包头医学院公共卫生学院，014060)

目的 研究苦荞茶对D-半乳糖所致衰老小鼠丙二醛(MDA)和单胺氧化酶(MAO)的影响，探讨苦荞茶的抗氧化作用。方法 将60只小鼠按体质量随机分为5组(正常对照组，模型对照组，苦荞茶低、中、高剂量组)。正常对照组注射生理盐水，其余组注射D-半乳糖；正常对照组和模型对照组每日用凉白开水灌胃(5 g/kg)，苦荞茶低、中和高剂量组分别按照苦荞茶2.5 g/kg、5.0 g/kg、10.0 g/kg的量进行灌胃。实验结束后测定各组MDA和MAO含量。结果 模型对照组小鼠MDA均高于正常对照组和苦荞茶各剂量组(P＜0.05)；正常对照组的MAO低于衰老模型组(P＜0.05)。结论 苦荞茶可对D-半乳糖造成衰老小鼠的MDA和MAO含量升高有一定抑制作用，具有抗氧化功能。

苦荞茶；MDA；MAO；D-半乳糖

荞麦又名乌麦、三角麦、花麦，属双子叶植物。常见的有甜荞和苦荞两种，其中苦荞的营养价值和药用价值都要高于甜荞。研究表明苦荞黄酮具有较强的清除自由基的能力，其中清除超氧化阴离子自由基的能力要强于茶多酚[1]。本研究通过建立D-半乳糖衰老动物模型，探讨苦荞茶对于衰老模型小鼠的丙二醛(mlondialdehyde，MDA)和单胺氧化酶(monoamine oxidase，MAO)含量有无影响及其影响程度，从而探讨苦荞茶的抗衰老作用。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物 实验动物为昆明种健康雄性小鼠，体质量(20.89±2.62)g，购自内蒙古大学实验动物中心，为清洁级动物。

1.1.2 试剂与仪器 D-半乳糖(美国Amresco公司)、丙二醛检测试剂盒、单胺氧化酶检测试剂盒、考马斯亮兰蛋白测定试剂盒(以上试剂盒源于南京建成生物工程研究所)、苦荞茶(包头市娜其格尔食品有限公司)。T6新悦分光光度计、电光分析天平TG328A、TU-1810紫外可见分光光度计等。

1.2 动物分组及处理 将60只健康昆明种雄性小鼠按体质量随机分为5组，每组12只，分别为正常对照组、模型对照组、苦荞茶低剂量组、苦荞茶中剂量组和苦荞茶高剂量组。实验期间正常对照组每日皮下注射生理盐水(0.05 g/kg)，其余组每日皮下注射D-半乳糖(0.05 g/kg)连续6周；正常对照组和模型对照组每日用凉白开水进行灌胃(5 g/kg)，苦荞茶低、中和高剂量组分别按照苦荞茶2.5 g/kg、5 g/kg、10 g/kg的量进行灌胃，连续进行6周。处死动物后，取小鼠的肝和胃组织测定MDA和MAO含量。

1.3 数据处理及统计分析 实验所有数据以(x±s)表示，采用SPSS 17.0统计软件进行分析，用单因素方差分析比较其组间差异。

2 实验结果

2.1 实验动物的一般情况 实验前，各组小鼠毛色白，有光泽，精神状态良好，体质量间没有差异。随着造模进行，正常对照组小鼠的一般情况良好，模型对照组小鼠出现行动缓慢，精神萎靡，毛发不均，个别小鼠有尾部断落情况，苦荞茶各剂量组外观和表现介于正常对照组和模型对照组之间。

2.2 各组小鼠体质量变化(表1) 在实验进程中各组小鼠体质量逐渐增加，正常对照组与苦荞茶3个剂量组之间平均体质量差异无统计学意义(P＞0.05)，而模型组与其他4组之间的平均体质量差异有统计学意义(P＜0.05)，说明D-半乳糖对小鼠体质量增长有明显影响。

2.3 实验组小鼠肝和胃组织MAO和MDA测定结果比较(表2) 由表2可知模型对照组小鼠肝组织和胃组织的MDA值都是最高的，与正常对照组和苦荞茶各剂量组对比差异有统计学意义(P＜0.05)，表明D-半乳糖可以造成小鼠衰老，而苦荞茶对丙二醛(MDA)含量升高有一定抑制作用；正常对照组的MAO值最低，与衰老模型组相比差异有统计学意义(P＜0.05)，且苦荞茶高剂量组与正常对照组相比差异没有统计学意义(P＞0.05)，表明苦荞茶对小鼠机体的衰老具有抑制作用。

表1 各组小鼠体质量变化(g)

表2 实验各组小鼠肝和胃组织MDA和MAO结果比较

3 讨论

D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠模型是在一定时间内通过对小鼠皮下连续注射D-半乳糖，使机体细胞内的半乳糖浓度增高，在醛糖还原酶催化下，还原成半乳糖醇，该物质不能在细胞内进一步代谢而聚集，从而影响细胞正常的渗透压，导致细胞代谢紊乱，使自由基堆积，从而造成细胞的损伤[2-3]。本实验的小鼠体质量测定显示衰老模型组体质量明显低于其他组，尤其低于正常对照组，有统计学差异，说明D-半乳糖造成了小鼠的衰老。

目前，从分子生物学角度认为衰老是随着年龄的增加，体内抗氧化酶的活性不断下降，导致体内氧自由基不能及时被清除，生成过氧化物，从而引起细胞的衰老和死亡，加速机体的衰老。MDA是过氧化脂质的降解产物，其含量与细胞损伤的程度呈正相关，MDA含量的变化可间接反映组织中氧自由基含量的变化[4]。有研究结果显示苦荞叶提取物中有一定量的抗氧化物质，能有效的清除体内的自由基，具有较好的抗氧化和抗脂质过氧化作用[5]，也有研究结果[6]表明苦荞生物类黄酮对CCL4所致肝脏丙二醛含量的增高有明显的抑制作用。这些与本实验结果都是相符合的。

MAO存在于细胞的线粒体外膜上，参与体内单胺类物质代谢的主要酶类，广泛存在于肝、肾、脑等组织中[7]。MAO是广泛地催化芳香族、脂肪族单胺类氧化脱氨基反应的酶，分为A、B两型，随着年龄的增长MAO-B的含量增加，MAO-B又被称为老化相关酶[8]。MAO可以通过激活神经毒作用，亦或提高H2O2的水平来加速大脑老化[9]；同时单胺类神经递质如5-HT和NE等被MAO氧化分解，促进神经系统老化，减少应激敏感性，使大脑的各种思维活动能力下降[10]。所以MAO是研究衰老的一个重要指标。本实验研究表明，苦荞茶可以降低肝脏和胃中MAO的活性，减少神经毒作用和神经递质的分解，从而起到延缓衰老作用。

苦荞茶可对D-半乳糖造成衰老小鼠的MDA和MAO含量升高有一定抑制作用，具有抗氧化功能。

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[5]王转花，林汝法.苦荞叶提取物对小鼠体内抗氧化酶系的调节[J].药物生物技术，1999，6(4)：208-211.

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[10]李霄凌，周忠光，王志国.脑健冲剂对AD大鼠5-HT和MAO影响的实验研究[J].中医药学报，2005，33(3)：46-47. (收稿日期：2014-02-17)

Objective To study the influence of buckwheat tea on malondialdehyde(MDA)and monoamine oxidase(MAO)of D-galactose induced aging mice，and explore the antioxygenation of buckwheat tea.Methods 60 mice were randomly divided into 5 groups on the basis of body mass(normal control group，model control group，three groups with low，moderate and high dose of buckwheat tea).The normal control group were injected with normal saline，while the other groups with D-galactose.The normal group and the model control group were gavaged daily with cold boiled wate(5.0 g/kg)，and the three groups with low，moderate and high dose of buckwheat tea were gavaged with buckwheat tea by 2.5 g/kg，5.0 g/kg，and 10.0 g/kg.MDA and MAO contents were determined after the experiment.Results MDA of the model control group was higher than that of the normal control group and the three buckwheat tea groups(P＜0.05)；MAO of the normal control group was lower than the aging model group(P＜0.05).Conclusion Buckwheat tea has certain inhibitory effect on increasing MDA and MAO content of D-galactose induced aging mice，which has antioxidant function.

Buckwheat Tea；MDA；MAO；D-galactose

1005-619X(2014)08-0678-03

10.13517/j.cnki.ccm.2014.08.004