金线莲组织培养(简报)

李洪林，杨 波

（中国科学院 武汉植物园，湖北 武汉 430074）

1 植物名称及材料类别 金线莲（原变种）Anoectochilus roxburghii茎段。

2 培养条件 （1）侧芽诱导培养基：1/2MS + 6-BA 1.5 mg·L-1（单位下同）+ NAA 0.2；（2）丛生芽诱导及增殖培养基：1/2MS + 6-BA 2.0 + NAA 0.5 + 香蕉100 g·L-1；（3）生根培养基：1/2MS + IBA 1.0+ NAA 0.5 +AC（活性炭）0.2 g·L-1。以上培养基蔗糖浓度（1）、（2）为 3.0%，（3）为 2.0%；琼脂 6 g·L-1，pH 5.8，培养温度为（25±2）℃，连续光照12 h·d-1，光照度为2 000 lx。

3 生长与分化情况

3.1 侧芽诱导培养 金线莲当年生带节茎段从母株上采下，切成2～3 cm长，自来水冲洗1～2 h后，用75%酒精消毒30 s，无菌水冲洗3次，再用0.1%升汞溶液（加1滴吐温）消毒8 min，无菌水冲洗5～6次，在超净台上用消毒滤纸吸干表面水分，带一个芽点切一段，接种到培养基（1）中。15 d左右茎节处开始萌动，逐渐长出红色幼芽（图1-A,B）。

3.2 幼芽继代与增殖培养 将获得的侧芽切分成小植株，转接入新鲜培养基（2）中进行继代增殖培养，35～40 d为1个继代增殖周期，一般由1个侧芽可增殖形成3～5个侧芽；以后随着继代次数的增加，增殖速度渐加快，增殖系数可达6～8倍（图1-C）。30 d后在侧芽处长出新的丛生芽。将丛生芽转接到新鲜培养基（3）中，进行壮苗生根培养。

3.3 壮苗与生根培养 将丛生芽接入到新鲜培养基（3）中，20～30 d时开始壮苗（图1-D,E）。再将丛生芽切成单个苗，将高3 cm的植株接入到（3）号培养基中进行生根培养。30 d时幼苗生根率达90%，根长2～3 cm，根数可达3～4条(图1-F)。

3.4 炼苗与移栽 移栽时特别注意要提前将瓶盖打开，让组培苗适应一下外界的环境，2 d后再将小苗取出，洗净根部琼脂，栽入滤水性良好的细兰石与碳渣的混合基质中，盖膜保湿，保持环境温度20～25 ℃，成活率可达95%（图1-G）。

4 意义与进展 金线莲Anoectochilus roxburghii即花叶开唇兰，又名金线兰等，属兰科开唇兰属多年生草本植物，分布地域较狭窄，主要产于中国、印度、斯里兰卡等几个亚洲国家[1]，在我国主要分布于福建、台湾、广东、海南、浙江等省份[2]。

本试验的金线莲变种全草具有较高的药用价值，属多年生珍稀中草药[3-4]，性味甘平，具有清热凉血，除湿解毒、止痛、镇咳等功效，对糖尿病、肾炎、风湿性关节炎、毒蛇咬伤、口疮等均有显著疗效，尤其对小儿惊风发烧有特效[5]，民间使用广泛，有“药王”、“金草”、“神药”、“乌人参”等美称。通过分析测定还发现，金线莲含有牛磺酸（TAU）。牛磺酸具有抗衰老、调节人体生理机能之功效。金线莲不仅是珍贵药材，而且其株形小巧优美，网状叶脉呈金黄色，是室内的观叶花卉珍品[6]。金线莲在自然界的蕴藏量稀少，1990年被主产该药材的福建省政府列为濒危药用植物[7]。金线莲具有很高的开发利用价值，但其野生资源不能满足市场所需。利用组织培养技术快速繁殖金线莲，可有效保护野生资源，且解决中药材来源匮乏的问题，满足市场需求。

图1 金线莲茎段组织培养过程Fig.1 Various stages of tissue culture using stems of Anoectochilus roxburghii

[1] 广东省植物研究所.海南植物志(第四卷)[M].北京: 科学出版社, 1977: 203-204.

[2] 黄小凤,周志东,杨成,袁志永,蔡楚雄,刘世平.珍稀药用植物金线莲及其栽培技术[J].广东农业科学, 2005(5): 80-81.

[3] 钟爱清,林丛发.金线莲组培苗栽培技术[J].闽东农业科技, 2008(2): 12-13.

[4] 邱年永.台湾药用植物之宝金线莲[J].明医通药, 1992,8: 30-32.

[5] 赖万玉,赖万年.金线莲在海南岛的种植发展前景[J].上海农业学报, 2005,21(1): 92-94.

[6] 高燕,白燕冰,赵云翔.金线莲组织培养几种培养基的筛选[J].热带农业科技, 2004,27(3): 12-14.

[7] 范子南,肖华山,范晓红,吴文珊.金线莲的组织培养研究[J].福建师范大学学报(自然科学版), 1997,13(2): 82-87.