幽门螺杆菌尿素酶抗体检测的临床应用评价

张 兵，郭运芬，刘孟涓

（1.南充市中心医院检验科·川北医学院第二临床医学院，四川 南充 637000；2.重庆医科大学医学检验系，重庆 400016）

幽门螺杆菌（helicobacter－pylori，Hp）是一种生活于人体胃和十二指肠的螺旋状格兰氏阴性杆菌，是慢性活动性胃炎的主要致病因子。我国幽门螺杆菌（Hp）感染率为40%～90%，平均为59%［1］。95%的十二指肠球部溃疡患者伴Hp感染，而复发性十二指肠溃疡患者几乎100%与Hp感染有关。还有证据表明，Hp与胃溃疡、胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤和胃癌的发生有密切关系［2］，幽门螺杆菌可能是IgA肾病的重要致病抗原［3］。目前确诊HP病原体的方法主要有13C和14C呼吸试验，由于操作繁琐、耗时和具有一定的放射性，不适合做大规模的筛查。本文以14C－呼气试验作为HP诊断的金标准，评价幽门螺杆菌尿素酶抗体检测试剂盒（胶体金法）在检测HP感染临床应用价值。

1 材料和方法

1.1 对象 随机选取临床上有反复腹痛或伴有恶心、呕吐等上消化道症状，4周内未经治疗或已停服抗生素、铋剂、H2受体拮抗剂和质子泵抑制剂等对Hp检测有影响的药物的门诊、住院患者50例，均为2011年1～3月在本院接受检查者，其中男性29例，年龄17～72岁，平均年龄46岁；女性21例，年龄19～68岁，平均年龄49岁。

1.2 仪器和试剂 幽门螺杆菌尿素酶抗体检测试剂盒（胶体金法），由北京康美天鸿生物科技有限公司生产，批号： 010664。有关产品在应用前按相关说明书要求保存备用。

1.3 方法

1.3.114C－尿素呼气试验 患者空腹收集本底气体，随即饮服溶于100ml冷开水中的100mg14C－尿素，每10min收集一次呼气标本，连续收集3小时。收集的气体标本用质谱仪分析，计算14CO2含量。有Hp感染者在口服试液后20min即出现14CO2升高，在100min内持续升高，而无Hp感染者无14CO2呼出。

1.3.2 幽门螺杆菌尿素酶抗体检测试验 采集患者静脉血，常规分离血清。血清标本应为无脂血、无黄疸和溶血。收集的血清贮存－20℃冰柜中冷冻备用。操作步骤：①测试前将待测样本恢复至室温（20℃～30℃）。②取出测试板置于干净的水平台上。③在测试板样品孔中加入100ul（约4滴）待测血浆，室温静置10～15分钟左右观察结果，超过20分钟结果无效。④结果判读标准：阳性（＋）：两条红色线出现。一条是质控线（C），一条是测试线（T）。阴性（－）：仅质控线（C）出现一条红色条带，测试线（T）未出现。无效：质控线（C）未出现红色条带。

1.4 统计学方法 应用SPSS 11.5软件将两种方法阳性和阴性例数做配对χ2检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

50例患者接受以14C－呼气试验和尿素酶抗体检测试验的阳性例数和阴性例数见表1。该试剂盒检测Hp感染的灵敏度为84.62%，特异度为91.67%，假阳性率为8.33%，假阴性率为15.38% ，约登指数为76.29%，观察一致率为88%，机遇一致率为49.92%，kappa值为0.76，总符合率为88%。经配对四格表资料的χ2检验，该试剂盒（胶体金法）与14C－呼气试验相比较，差异无统计学意义（χ2＝0.67，P＞0.05），尚不能认为两种方法检测结果的阳性率不同。

表1 50例患者14C－呼气试验和尿素酶抗体检测试验结果比较（n）Table 1 Results of 14C－breath test and anti－urease antibody from 50patients

3 讨论

Hp感染与上消化道疾病之间的关系越来越受到医学界的重视。1994年世界卫生组织下属的国际癌症研究机构（IARC）已将其列为人类胃癌的Ⅰ类致癌物［4］。1997年Tomb等在世界上首次完成了Hp基因组的全序列测定分析工作，推动了Hp的基因功能、基因变异与疾病关系的研究，同时也为Hp感染相关疾病的研究奠定了坚实的基础［5］。现已证实，幽门螺杆菌是慢性胃炎、消化性溃疡的重要致病因子，亦与胃腺癌和淋巴瘤的发生有关系［6～8］。最近观察到它也和缺铁性贫血、身材矮小、慢性荨麻疹等有关。许多感染是在青春期或儿童期获得的，因而早期的正确诊断至关重要［9］。Hp在人群中的感染率与患者所居住国家或地区的社会经济发达程度有关。如发达国家10岁内感染率仅有3.5%，而在发展中国家10岁即有一半或一半以上的人感染Hp。我国人群Hp感染率接近世界平均水平。国内不同地区Hp感染率从42%～84%不等，平均感染率为54.8%［10］。幽门螺杆菌是一种定植于胃粘膜并可引起胃十二指肠疾病的革兰氏阴性细菌，自1983年通过胃镜取活检标本分离培养成功以来，对Hp感染的诊断已发展出了许多方法，包括有细菌学、病理学、血清学、同位素示踪、分子生物学等方面。但总的讲来，从标本采集的角度看，可以分为侵入性和非侵入性两大类。侵入性方法主要指必需通过胃镜取活检标本检查的方法，是目前消化病学科的常规方法。它包括细菌的分离培养和直接涂片、快速尿素酶试验，药敏试验等。非侵入性方法主要指不通过胃镜取活检标本诊断幽门螺杆菌标本感染的方法。这类方法包括抗体检测、抗原检测、13C／14C－尿素呼气试验等。后者因具有无创、简便、快速、可靠等特点，正逐渐被临床采用。

与14C－尿素尿素呼气试验相比，幽门螺杆菌尿素酶抗体检测试剂盒（胶体金法）实验表该试剂盒检测Hp感染的灵敏度为84.62%，特异度为91.67%，总符合率为88%，13C／14C－尿素尿素呼气试验为目前幽门螺杆菌现症感染诊断的金标准之一，但需排除药物影响因素，操作繁琐。不适合做大规模的筛查，且13C／14C具有一定的放射性，不适于孕妇及儿童。幽门螺杆菌尿素酶抗体检测试剂盒（胶体金法）采用双抗原夹心法免疫测定原理，结合胶体金免疫层析法即时检验技术，灵敏度高，特异性强。可同时检查样本中Hp尿素酶IgG、IgM、IgA抗体。操作更为简便，无需专用仪器和设备。血清学检查为微创伤检查，且价格低廉，易于为大众接受。我们的实验表明：幽门螺杆菌尿素酶抗体检测试剂盒检测Hp，灵敏度为84.62%，特异度为91.67%，假阳性率为8.33%，假阴性率为15.38%，与14C－尿素尿素呼气试验相比，差异无统计学意义（χ2＝0.67，P＞0.05）。

4 结论

幽门螺杆菌尿素酶抗体检测试剂盒（胶体金法）是一种灵敏度和特异性都较高的幽门螺杆菌感染血清学抗体快速检测法，可用于健康体检、社区门诊或医院床旁检验等。

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