27例大肠癌组织中LIMD1表达特点

陈章兴，戴益琛，谈秋慧

厦门大学附属成功医院消化内科，福建 厦门 361003

大肠癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一，发病率呈逐渐增加趋势，LIMD1在大肠癌中的作用国内外报道甚少[1-2]，本研究利用免疫组织化学法检测大肠癌LIMD1阳性表达率，试探性研究LIMD1在大肠癌组织中的表达特点。

1 资料与方法

1.1 资料 选取2010年2月－2012年2月经解放军174医院病理科证实的27例大肠癌及癌旁正常大肠黏膜组织，年龄22～74岁，平均年龄(47±2)岁;Dukes分期:A期5例、B期6例、C期5例、D期11例;腺癌16例、黏液癌7例、未分化癌4例。

1.2 实验方法 采用免疫组织化学法检测标本LIMD1阳性表达率(兔抗人LIMD1单克隆抗体购自CST公司)。严格按照说明书要求操作，用磷酸缓冲液代替一抗作阴性对照，用已知阳性的大肠癌作阳性对照。

1.3 结果判断 随机观察每张切片10个高倍镜视野:细胞未出现棕黄色－;≤25%的细胞轻度棕黄色+;25% ～50%棕黄色++;＞50%棕褐色+++。

1.4 统计学处理 采用SPSS 10.0软件包进行统计学分析，计数资料采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 大肠腺癌与黏液癌组织中LIMD1表达情况大肠腺癌与黏液癌LIMD1的阳性表达率分别为87.50%、85.71%，两者比较差异无统计学意义(χ2=2.71，P ＞0.05)，而两者 LIMD1 的阳性表达率明显低于大肠未分化癌，差异有统计学意义(χ2=4.86，P＜0.05，见表1)。

表1 不同病理类型的大肠癌组织中LIMD1的阳性表达率Tab1 Positive expression rates of LIMD1 in different pathological types of colorectal carcinoma

2.2 大肠癌与癌旁正常大肠黏膜组织中LIMD1表达情况 LIMD1在大肠癌组织表达远高于癌旁正常大肠黏膜组织，大肠癌组织中LIMD1表达阳性率为88.89%(24/27)，而癌旁正常大肠黏膜组织中LIMD1表达阳性率为33.33%(9/27)，两者比较差异有统计学意义(χ2=5.11，P ＜0.05)。

2.3 不同临床分期的大肠癌组织中LIMD1表达情况 LIMD1在大肠癌不同分期(Dukes分期)阳性表达差异有统计学意义(χ2=7.41，P ＜0.05)，且与分期呈正相关(见表2)。

表2 LIMD1蛋白在大肠癌不同Dukes分期的表达情况Tab2 Expression of LIMD1 protein in different Dukes stage of colorectal cancers

3 讨论

LIMD1基因位于人染色体3p21.3，cDNA长约5067 bp，编码469个氨基酸残基，并富含脯氨酸/丝氨酸，可参与调控 RNA稳定性[3]。该基因与 Zyxin、LPP、TRIP6、Ajuba、migfilin 及 WTIP 一起构成 ZYXIN家族，参与细胞信号传导、转录调控、细胞分化及细胞间黏附等，对维持正常细胞的生理活动发挥重要作用，同时可抑制肿瘤细胞增殖、生长及转移等[4-5]。

研究发现在人类多种实体瘤中普遍存在抑癌基因LIMD1基因表达下调，主要以基因缺失、启动子甲基化、突变及基因沉默等为主，其表达水平与病情进展及预后密切相关[6]。Sharp 等[7]利用 RT-PCR 及 Western blotting发现85.9%的LIMD1可使E2F1介导的相关基因表达下调，同时LIMD1可以阻止A549肺癌细胞株集落形成。Ghosh等[8]发现50%的头颈部鳞状细胞癌组织中LIMD1较正常组织表达明显下降，且利用单链构象多态性(SSCP)及甲基化特异性PCR技术检测83例原发性头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)组织发现约93.98%LIMD1基因型发生改变，且在HNSCC早期主要以基因缺失及甲基化为主，但随肿瘤演进LIMD1突变频率逐渐增高。Spenlove等[9]利用免疫组织化学及组织芯片技术对495例原发性乳腺癌组织LIMD1表达水平的研究时发现其表达水平及亚细胞定位与肿瘤分期、分化程度及病理类型有关，胞浆或胞核内LIMD1表达下调或缺失提示预后较差，同时发现乳腺癌组织中LIMD1表达水平差异可能与翻译后表观修饰有关。本研究试探性研究LIMD1在大肠癌中的表达情况及在不同病理类型、Dukes分期的大肠癌中的生物学特点。在癌旁正常大肠黏膜组织中LIMD1阳性表达率为33.33%，而在大肠癌组织中阳性表达率却为88.89%，两者比较差异有统计学意义(χ2=5.11，P ＜0.05)。大肠腺癌与黏液癌中的LIMD1阳性表达率低于未分化癌，且与Dukes分期呈正相关，可能预示与大肠癌的演进有相关性，同时也反映肿瘤恶性程度，但LIMD1在大肠癌组织中确切生物学行为仍不明确，需要多中心、大样本研究进一步深入探讨。

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