参芎葡萄糖注射液对移植肾纤维化中转化生长因子-β1表达水平的影响※

段 斌 职 瑾 裴继文 职利琴 孙建国

(陕西省人民医院肾移植科，陕西 西安 710068)

1 陕西省西安市第一医院神经内科，陕西 西安 710002

2 陕西省西安市中医医院内科，陕西 西安 710001

3 陕西省西安市第五医院心内科，陕西 西安 710082

肾小管间质纤维化是指肾小管萎缩和消失，肾间质淋巴和单核细胞浸润及纤维组织增生。转化生长因子-β(TGF-β)是一类多功能的多肽类生长因子，由体内分泌的信号分子组成，目前已知约有30多种蛋白，TGF-β除调节细胞功能外，还参与了细胞发育和致癌作用，同时是导致体内纤维化最强和最广泛的介质之一，尤其在肺纤维化、肝纤维化、慢性胰腺炎、硬皮病和肾小球纤维化及放疗、化疗和组织移植中并发的多器官纤维化方面，TGF-β均为重要的介质之一。临床和实验研究提供的大量证据表明，TGF-β在肾小管间质纤维化发生机制中起重要作用，因此了解TGF-β的生物学活性及其信号转导途径，对肾小管间质纤维化的防治，以及有效延缓肾衰竭的进展有着重要的临床意义［1］。丹参、川芎对正常人及硬皮病患者成纤维细胞增殖的抑制作用有相似的趋势，说明它们对成纤维细胞增殖的抑制作用是非特异性的，不仅对病变细胞有抑制作用，对正常细胞也有相同的作用，不仅能抑制成纤维细胞的增殖，同时可以抑制成纤维细胞合成胶原，发挥抗纤维化作用［2］。2010-10—2012-12，我们采用参芎葡萄糖注射液对移植肾纤维化21例进行干预性治疗，结果如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 全部21例均为陕西省人民医院肾移植科行肾移植术后，经移植肾穿刺检查证实为慢性纤维化患者。男13例，女8例;年龄24～56岁，中位龄37岁。

1.2 治疗方法 均予应用免疫抑制剂、激素冲击治疗、抗感染及维持水、电解质和酸碱平衡等常规综合治疗，并予参芎葡萄糖注射液(贵州景峰注射剂有限公司，国药准字H52020703)200 mL，每日1次静脉滴注，14 d为1个疗程，疗程间隔10 d，共治疗3个疗程。

1.3 观察指标及方法 分别于治疗前及治疗1、2、3个疗程后测定血清 TGF-β1表达水平。抽取外周静脉血5 mL，分离血清，-20℃保存备用。血清TGF-β1的测定采用酶联免疫吸附法(ELISA)，试剂盒选用深圳晶美生物工程技术有限公司，全部操作均按试剂盒说明书进行。

1.4 统计学方法 采用SPSS 13统计软件进行统计学分析，计量资料用均数±标准差(±s)表示，采用非参数秩和检验。

2 结果

21例移植肾纤维化治疗前及治疗1、2、3个疗程后血清TGF-β1水平变化比较见表1。

表1 21例移植肾纤维化治疗前及治疗1、2、3个疗程后血清TGF-β1水平变化比较ng/mL，±s

表1 21例移植肾纤维化治疗前及治疗1、2、3个疗程后血清TGF-β1水平变化比较ng/mL，±s

个疗程后TGF-β1治疗前 治疗1个疗程后 治疗2个疗程后 治疗3 80.0 ±13.0 68.0 ±11.5 56.8 ±7.3 47.9 ±12.4

经秩和检验统计分析，治疗1、2、3个疗程后血清TGF-β1水平与治疗前比较均有明显降低(P＜0.05)，且随着治疗疗程的增加，下降水平越明显(P＜0.05)。

3 讨论

组织纤维化可累及人体几乎所有器官和系统，其病因众多，机制复杂，属于典型的多基因、多表型疾病，是许多不同组织损伤的共同后果，也是严重威胁人类健康疾病的基本病理改变。现代细胞生物学和分子生物学的研究认为，其发生过程极复杂，是由多种细胞和炎性介质参与的网络式炎性反应。多年来，人们致力于从各方面了解此网络，希望为临床寻找有效的防治措施。目前临床上常规的治疗手段均收效甚微。纤维化的西医治疗以肾上腺皮质激素及免疫抑制药为主，皮质激素可以减少胶原的合成，但它同时也抑制了胶原酶的产生，且长期应用皮质激素可使机体免疫力下降，使隐匿感染灶播散或诱发新的感染，而严重的继发感染又是纤维化致死的重要原因。

肾间质纤维化是多种慢性肾脏疾病进展至终末期引起肾衰竭的共同病理改变。间质纤维化的程度对肾脏疾病的预后起着决定性作用，形成的机制尚不完全明确，一般认为与成纤维细胞的过量增殖和细胞外基质(ECM)的过量分泌、异常沉积有关。肾小管间质病变与肾小球滤过率之间均呈高度相关性，肾小管间质纤维化程度预示着肾功能受损严重性，决定慢性肾脏疾病患者的预后。在肾脏疾病中，由于残存肾单位的肾小管代偿性耗氧量增加，促进肾小管上皮细胞产生氨和氧自由基增多，可引起补体活化，产生膜攻击复合物Csb-9，激活肾小管上皮细胞产生细胞因子和胶原，进而导致间质纤维化，在这些细胞因子中，TGF-β1的作用是较明显的。TGF-β1是一种公认的强烈的促纤维化因子，同时亦是重要的促炎症因子，它从多个方面促使纤维化的发生和发展，低氧、高血糖、高蛋白可直接引起人近端肾小管上皮细胞TGF-β1的表达增加，继而在肾小管间质纤维化的发生发展中多个环节起作用。研究表明，TGF-β1主要通过激活Smad通路促进纤维化的发生和发展，Smad蛋白在肾脏的固有细胞中普遍表达，而且在多种肾脏纤维化模型中表达增高，间质成纤维细胞在TGF-β1的刺激下能活化为肌成纤维细胞，肌成纤维细胞出现是慢性肾间质纤维化的决定性事件［3］。

参芎葡萄糖注射液是丹参和川芎提取物的复方制剂，主要成分为丹参素和川芎嗪。丹参具有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦等功用，相关实验研究表明，丹参可以减轻心肌、脑缺血再灌注损伤，抑制血小板凝聚和血栓形成［4］，减少α平滑肌肌动蛋白的表达，通过抑制肾小管细胞向肌成纤维细胞转化，起到延缓肾间质纤维化的作用［5］。川芎具有活血行气、消散瘀血、祛风止痛的功效，川芎嗪是由川芎的根茎提取的有效成分，相关实验研究表明，川芎嗪具有抗血小板凝聚、扩张小动脉、改善微循环、抗氧化、拮抗钙离子及抗纤维化等作用［6］，能降低血压，减少肾血管阻力，减轻肾小球代偿性增殖肥大，从而延缓肾小球硬化的进程，川芎嗪可抑制成纤维细胞转化，使肌成纤维细胞的表达减少，从而抑制了肾间质纤维化的形成和发展［7］。

近年来，丹参联合川芎治疗肝纤维化、肺纤维化及心肌纤维化等方面均有报道，在肾脏纤维化的动物模型试验中也有验证，近年因肾源紧缺，临床工作更倾向于肾移植术后的长期效果及慢性并发症的诊治。本研究结果表明，采用参芎葡萄糖注射液治疗移植肾纤维化具有显著疗效，可有效降低TGF-β1水平，且随着疗程的增加效果更明显，有效改善移植肾纤维化，使得移植肾达到更好的长期存活。

［1］Kumagai H，Katoh S，Hirosawa K，et al.Renal tubulointerstitial injury in weanling rats with hyperhomocysteinemia［J］.Kidney Int，2002，62(4):1219-1228.

［2］商庆新，张涤生.丹参和川芎嗪对瘢痕成纤维细胞DNA含量及细胞周期进程的影响［J］.中国修复重建外科杂志，1998，12(6):325-328.

［3］Ortega-Velazquez R，Gonzalez-Rubio M，Ruiz-Torres MP，et al.Collagen I upregulates extracellular matrix gene expression and secretion of TGF-beta 1 by cultured human mesangial cells［J］.Am J Physiol Cell Physiol，2004，286(6):C1335-C1343.

［4］张洪波，史华，陈波，等.丹参对大鼠肾缺血再灌注损伤保护作用的实验研究［J］.中国中医药科技，2002，9(3):148.

［5］林琼真，于洁，邓英辉，等.丹参注射液对大鼠梗阻性肾间质纤维化的保护作用［J］.中国中西医结合肾病杂志，2003，4(2):71-73.

［6］尚立芝，崔明霞，王建人.川芎嗪预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的保护作用［J］.河南医学研究，2006，15(3):215-217.

［7］王亚平，李伯祥.川芎嗪防治肾间质纤维化作用的实验研究［J］.中国中西医结合肾病杂志，2002，3(2):77-78.