老年病区220株白色念珠菌分离及耐药性分析

厉荣玉 欧成举 陈裕秀

(皖南医学院微生物学与免疫学教研室，安徽 芜湖 241002)

白色念珠菌大多发生在机体免疫力低下或菌群失调时，如肿瘤、慢性消耗性疾病及长期大量使用广谱抗生素、免疫抑制剂和激素等过程中易发生白色念珠菌感染，且病死率较高〔1〕。老年患者的机体各组织器官功能减退，且多伴有一种或多种基础疾病，抗感染能力下降，造成院内白色念珠菌感染的机会增多。同时，随着临床上抗真菌药物的广泛和长期应用，白色念珠菌耐药现象也愈来愈严重〔2〕。本研究分析近期临床所分离的220株白色念珠菌的耐药性。

1 材料与方法

1.1菌株来源 2011年1月至2012年5月皖南医学院附属弋矶山医院及宣城地区医院老年病区住院感染患者的痰液、咽拭子、尿液、粪便等标本中分离白色念珠菌220株，其中同一患者同样标本多次分离出相同白色念珠菌者，按1株计算。年龄61～92岁，平均70.6岁。接受2～4种抗生素治疗。

1.2试剂与仪器 氯霉素沙保弱培养基、法国科玛嘉念珠菌显色培养基购于郑州博赛生物工程公司；自动微生物鉴定系统VITEK-32、酵母样真菌鉴定卡YBC、微量稀释法药敏试剂盒ATB FUNGUS 3均为法国生物梅里埃公司产品；质控菌株近平滑念珠ATCC22019、克柔念珠菌ATCC6258购于中国药品生物制品检定所。

1.3菌株分离鉴定 将各种临床标本先接种于氯霉素沙保弱培养基，35℃孵育，培养阳性者，菌落经革兰染色确认为酵母样真菌后，转种至科玛嘉显色培养基进行初步鉴定，再用VITEK-32的酵母样真菌鉴定卡(YBC)鉴定。

1.4药敏试验 采用ATB FUNGUS 3试剂盒检测白色念珠菌对5种常用的抗真菌药物两性霉素B(AMB)、氟康唑(FCA)、伊曲康唑(ITR)、伏立康唑(VRC)、5-氟胞嘧啶(FC)的药敏结果。结果按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)抗真菌药敏试验标准判定：AMB(MIC)≤1 μg/ml为敏感，≥2 μg/ml为耐药；FCA MIC≤8 μg/ml为敏感，16～32 μg/ml为中介，≥64 μg/ml为耐药；ITR MIC≤1 μg/ml为敏感，0.25～0.5 μg/ml为中介，≥4 μg/ml为耐药；VRC MIC≤0.125 μg/ml为敏感，MIC=2 μg/ml为中介，≥1 μg/ml 为耐药；5-FC MIC≤ 4 μg/ml为敏感，8～16 μg/ml中介，≥32 μg/ml为耐药。

2 结 果

2.1各类临床标本白色念珠菌分离情况 从呼吸道分离的白色念珠菌最多，有180株(81.82％)，其中从痰液中分离出141株(64.09％)，咽拭子中分离出39株(17.73％)。中段尿中21株(9.55％)；胸腹水6株(2.73％)；分泌物5株(2.27％)；血液4株(1.82％)；粪便4株(1.82％)。

2.2基础疾病 均患有一至多种基础疾病，其中慢性肺部疾病最多(包括慢性支气管炎、肺心病、结核、哮喘等)，共95例；其次为各种肿瘤病人56例；心脑血管疾病41例；肝硬化患者23例；糖尿病5例。

2.3药敏结果 大多数菌株对所测试的5种抗真菌药物具有较高的敏感性(与临床疗效相符)。其中，对AMB和5-FC敏感率最高，其次为VRC和ITR；FCA的敏感率最低。见表1。

表1 5种抗真菌药物的药敏结果〔n(％)〕

3 讨 论

老年病区各类标本白色念珠菌分离情况表明，白色念珠菌感染多见于呼吸道。患者多有较严重的基础性疾病，住院时间较长，长时间使用广谱抗生素，导致菌群失调，白色念珠菌等条件致病性真菌大量繁殖。老年患者年龄较大，肺脏生理功能减退，机体免疫功能下降，抗感染能力减弱，而呼吸机、气管插管等侵入诊疗则为真菌定殖、生长提供了有利的环境，呼吸道容易出现反复感染，从而引起呼吸道白色念珠菌检出率的升高。

AMB的肾毒性大，临床应用受到一定的限制，而5-FC由于其抗菌范围较窄，且单用时易产生耐药性，临床少用可能是其敏感性高的主要原因。唑类抗真菌药物对白色念珠菌的耐药率相对较高，本研究的三种唑类药物中，以FCA和ITR为代表的三唑类药物具有抗真菌谱广，对人体毒副作用小、口服吸收好等优点，是目前临床上治疗深部真菌感染的首选药物，主要用于念珠菌、隐球菌所致的感染。但是，随着临床的广泛使用，其对白色念珠菌的敏感性呈下降趋势〔3〕，本资料中氟康唑对白色念珠菌的敏感率为81.82 ％，低于以往文献报道〔4，5〕。VRC是新型三唑类抗真菌药物，在临床应用的时间相对较短，并以口服为主，仍保持较高的敏感率，对VRC耐药的非常少见。另外，需引起重视的是唑类药物之间存在交叉耐药趋势，对ITR耐药的20株也同时对氟康唑耐药，可能是由于其有相似的作用机制，所以容易产生交叉耐药现象〔6〕。

综上，白色念珠菌对常用抗真菌药物存在不同程度的耐药现象，且呈上升的趋势，要根据药敏试验结果，正确选择抗真菌药物，有效控制真菌感染及防止耐药菌株的增加。

4 参考文献

1Mavor AL，Thewes S，Hube B，etal.Systemic fungal infections caused by Candida species：epidemiology，infection process and virulence attributes〔J〕.Curt Drug Targets，2005；6(8)：863-74.

2Pfaller MA，Diekema DJ，Gibbs DL，etal.Results from the ARTEMIS DISK global antifungal surveillance study，1997 to 2007:a 10.5-year analysis of susceptibilities of Candida Species to fluconazole and voriconaz-ole as determined by CLSI standardized disk diffusion〔J〕.J Clin Microbiol，2010；48(4):1366-77.

3陈芝芳，王 冬.白色念珠菌对五种抗真菌药物敏感性分析〔J〕.中华医院感染学杂志，2011；31(5)：83-5.

4李 莉，苏天璐，苗 翠，等.白色念珠菌对临床常用抗真菌药物的耐药性分析〔J〕.中国实验诊断学，2011；15(1):126-8.

5孙长贵，王奇军，张丽君，等.临床常见念珠菌对四种抗真菌药物体外敏感性研究〔J〕.中华检验医学杂志，2005；28(6)：654-5.

6吴 颖，刘 伟，万 哲，等.氟康唑耐药的白念珠菌对唑类药物交叉耐药实验〔J〕.中国皮肤性病学杂志，2009； 23(3)：148-9.