bcl-2、bag-1与老年大肠癌患者的关系

刘亚莉 郑纪宁 陈 龙 申兴彬

(承德医学院基础学院护理学院，河北 承德 067000)

大肠腺瘤属癌前病变，与大肠癌密切相关〔1〕。大肠癌发病与饮食结构、肠道慢性炎症、遗传、大肠腺瘤等因素有关〔2〕。本研究观察老年大肠癌、大肠腺瘤患者组织中bcl-2、bag-1的表达及其在大肠癌的转移、发展中的相互关系。

1 资料与方法

1.1研究对象 2008～2013年我院手术治疗并经术后病理证实的35例大肠腺瘤标本，50例大肠癌标本。另外，选取30例大肠癌或大肠腺瘤手术患者的正常大肠黏膜标本作为对照组。术前都没有接受任何的抗肿瘤治疗。3组临床资料均无统计学差异(P均>0.05)。见表1。

表1 3组患者临床信息比较

1.2研究方法 使用免疫组化SP法测定bag-1、bcl-2表达。bag-1、bcl-2抗体、试剂盒均由福州迈新生物公司提供。标本全部采用10％甲醛溶液固定，用石蜡包埋，按4 μm行连续切片，行SP法免疫组化染色，染色之前的标本切片需通过抗原修复处理，一抗冷冻过夜，行二氨基联苯胺(DAB)显色及苏木素复染。阳性判断标准：用10×40倍光镜随机观察视野5个，每个视野观察100个细胞。bag-1染色阳性是胞质和胞核呈棕黄色，阳性细胞比例>10％为阳性(+)。bcl-2染色胞质棕黄色为染色阳性，染色阳性细胞比例>5％称为阳性(+)〔3〕。

1.3统计学方法 采用SPSS19.0软件进行t检验、χ2检验。

2 结 果

2.13组bag-1、bcl-2表达差异 3组bag-1、bcl-2阳性表达率差异显著(P<0.01)，见表2。

表2 3组bag-1、bcl-2阳性表达差异(n)

2.2bag-1、bcl-2阳性表达与大肠癌病理特征相关性 bag-1的阳性表达与分化程度显著相关(P=0.008)，且分化越低，其阳性表达率越高；bag-1与Duke分期也明显相关(P=0.012)。bcl-2阳性表达与分化程度显著相关(P=0.010)，分化越低，其阳性表达率越高，而与Duke分期无明显相关性(P=0.064)。见表3。

表3 bag-1、bcl-2阳性表达与大肠癌病理特征相关性(n)

3 讨 论

本研究说明bcl-2蛋白过表达是发生大肠癌的早期表现，这与Sinicrope等〔4〕研究结果相一致。提示bcl-2蛋白作为一种抑制细胞凋亡的基因，其表达过度可以延长细胞的寿命，延长已经遭遇DNA受损的细胞的生存期，来增加其他基因的突变机会，比如p53基因的点缺失和突变，ras基因突变，以致肿瘤的出现〔5〕。且Watson等〔6〕发现，只要大肠腺癌转变为腺癌，就会逐渐丢失了bcl-2的表达，抑制凋亡的能力减弱，细胞凋亡相对增强，这时细胞增殖就会明显占有优势，肿瘤能够生长，此结果与本组研究相近。本研究还证实bcl-2表达的变化，与大肠癌的分化程度明显相关，而与Duke分期并无显著关系，此与Watson等〔6〕的研究结果相一致。

bag-1基因的重要功能可能是：Hsc70/Hsp70肽结合区域与bag-1的C-末端的BAG区域相结合，蛋白底物与高表达的Hsc70/Hs70ATP酶区相互作用进而促进细胞增殖〔7〕。此外，它可以激活Raf-1蛋白信号级联途径来调节细胞的增殖信号，还可以跟酪氨酸的激酶受体(如血管内皮生长因子、肝细胞生长因子等)、细胞核的激素受体结合，通过调整功能来促发肿瘤。在正常组织中，bag-1几乎不表达，但是在大肠癌、前列腺癌、乳腺癌中均存在阳性表达〔8〕。从正常的大肠黏膜，到大肠腺瘤的发生及发展的过程中，bag-1异常表达起到了一定的作用；在大肠黏膜从良性转化为恶性的过程中，bag-1的高表达参与其中，此与Takayama等〔9〕的实验结果相符。本研究表明bag-1的高表达参与了肿瘤发展过程，从而表明bag-1蛋白的高表达抑制凋亡，促进细胞的增殖增强肿瘤细胞转移的能力〔10〕。因此，bag-1蛋白的高表达可以作为预测大肠癌的转移潜能及不良预后的一项新的生物学的指标。Takayama等〔9〕认为许多肿瘤抗细胞凋亡的机制是由bcl-2和bag-1的高表达引发的。bag-1虽不属于bcl-2的家族成员，但却可以上调bcl-2功能，其与bcl-2结合成复合物，增强抗凋亡能力。

4 参考文献

1Prasad S,Yadav VR,Sung B,etal.Ursolic acid inhibits growth and metastasis of human colorectal cancer in an orthotopic nude mouse model by targeting multiple cell signaling pathways:chemosensitization with capecitabine〔J〕.Clin Cancer Res,2012;18(18):4942-53.

2Citronberg J,Bostick R,Ahearn T,etal.Effects of ginger supplementation on cell-cycle biomarkers in the normal-appearing colonic mucosa of patients at increased risk for colorectal cancer:results from a pilot,randomized,and controlled trial〔J〕.Cancer Prev Res (Phila),2013;6(4):271-81.

3Kim SL,Kim SH,Trang KT,etal.Synergistic antitumor effect of 5-fluorouracil in combination with parthenolide in human colorectal cancer〔J〕.Cancer Lett,2013;335(2):479-86.

4Sinicrope FA,Evans DB,Leach SD,etal.bcl-2 and p53 expression in resectable pancreatic adenocarcinomas: association with clinical outcome〔J〕. Clin Cancer Res,1996;2(12):2015-22.

5Yan X,Shen H,Jiang H,etal.External Qi of Yan Xin Qigong inhibits activation of Akt,Erk1/2 and NF-κB and induces cell cycle arrest and apoptosis in colorectal cancer cells〔J〕.Cell Physiol Biochem,2013;31(1):113-22.

6Watson AJ,Merritt AJ,Jones LS,etal. Evidence of reciprocity of bcl-2 and p53 expression in human colorectal adenomas and carcinomas〔J〕.Br J Cancer,1996;73(8):889-95.

7Sun NF,Meng QY,Hu SY,etal.Correlation between the expression of the BAG-1 gene and clinicopathologic factors in colorectal cancer〔J〕.J Cancer Res Clin Oncol,2011;137(10):1419-24.

8Kim SL,Trang KT,Kim SH,etal.Parthenolide suppresses tumor growth in a xenograft model of colorectal cancer cells by inducing mitochondrial dysfunction and apoptosis〔J〕.Int J Oncol,2012;41(4):1547-53.

9Takayama S,Sato T,Krajewski S,etal.Cloning and functional analysis of BAG-1: a novel Bcl-2-binding protein with anti-cell death activity〔J〕.Cell, 1995;80(2):279-84.

10Vaish V,Piplani H,Rana C,etal.NSAIDs may regulate EGR-1-mediated induction of reactive oxygen species and non-steroidal anti-inflammatory drug-induced gene (NAG)-1 to initiate intrinsic pathway of apoptosis for the chemoprevention of colorectal cancer〔J〕.Mol Cell Biochem,2013;378(1-2):47-64.