木樨草素对高脂血症模型大鼠血浆一氧化氮水平与抗氧化能力的影响

马宝慧 高永胜 潘桂兰 陈晓东 吕 军

(包头医学院生理学教研室，内蒙古 包头 014060)

木樨草素弱酸性四羟基黄酮类化合物，具有抗肿瘤、抗炎、抗菌等功效〔1〕。而关于木樨草素对高脂血症大鼠血浆一氧化氮(NO)水平及氧化应激的影响鲜有报道。本文研究木樨草素对大鼠血浆NO水平及抗氧化能力的影响。

1 材料与方法

1.1药物与试剂 木樨草素(分析纯，陕西慧科植物开发有限公司，纯度99%)，溶于DMSO(含量<0.1%)，去离子水稀释；血浆一氧化氮(NO)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)试剂盒购自南京建成生物工程研究所。

1.2动物与饲料 Wistar大鼠24只，雄性，体重120～202 g，平均153 g，购自内蒙古大学动物实验中心。高脂饲料由81.3%基础饲料，0.5%胆盐，10%猪油，3%胆固醇，0.2%丙基硫氧嘧啶，5%白糖组成。

1.3分组与方法 动物适应性饲养5 d后，随机分为空白对照组(C组)，高脂血症模型组(H组)，木樨草素治疗组(L组)，每组8只，自由饮水；C组饲喂基础饲料，H组和L组饲喂高脂饲料，30 d高脂血症模型成功建立后，L组每天灌胃(5 mg/100 g)，C组和H组每天以同体积去离子水灌胃。治疗时间30 d。30 d后眶静脉采血，分离血浆，检测血浆NO、iNOS和血浆T-AOC、GPX、SOD、MDA。

2 结 果

2.1高脂饲料饲喂对大鼠血浆胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平的影响 见表1，适应性喂养后H组和L组大鼠用高脂饲料饲喂1个月，血浆TC、TG含量显著高于C组(P<0.05)，表明高脂血症大鼠模型建立成功。

2.2木樨草素对大鼠血浆NO水平及iNOS活力的影响 H组大鼠血浆NO含量显著增加，与C组相比具有明显差异(P<0.05)。与H组相比，L组大鼠血浆NO含量明显降低(P<0.05)，表明木樨草素治疗可以降低大鼠血浆NO含量。iNOS活力在H组大鼠血浆显著高于C组(P<0.05)。与H组相比，L组大鼠血浆NOS活力显著下降(P<0.05)，表明木樨草素可以抑制iNOS活力，降低血浆NO含量。见表2。

2.3木樨草素对大鼠血浆抗氧化能力的影响 见表3，H组大鼠血浆T-AOC显著降低，与C组相比具有显著差异(P<0.05)；L组大鼠T-AOC显著高于H组(P<0.05)，说明高脂血症大鼠总抗氧化能力下降，木樨草素可以提高大鼠总抗氧化力。与C组相比，H组血浆GPX活力明显下降(P<0.05)；L组大鼠血浆GPX和SOD活力显著高于H组(P<0.05)。表明木樨草素可以使高脂血症大鼠GPX、SOD活力显著上升。高脂饲料饲喂可引起大鼠血浆MDA含量显著高于C组，而木樨草素治疗可以降低L组大鼠血浆MDA含量。

表1 高脂饲料饲喂1个月后大鼠血浆TC、TG测定结果

表2 实验大鼠血浆NO水平及iNOS活力

表3 实验大鼠抗氧化能力的测定结果

3 讨 论

本实验采用加喂胆固醇+猪油并辅以猪胆盐的高脂饲料建立高脂血症大鼠模型，通过检测血浆TC、TG含量显示30 d即造模成功。木樨草素是一种黄酮类物质，已被国外确认为一种法定的食品色素，表明其作为食品添加剂具有安全性。近年来，木樨草素作为食品添加剂的使用引起了国内外的广泛重视。本研究旨在分析木樨草素对于治疗高脂血症的作用。

NO在体内广泛参与多种生理过程。但在受到外界刺激时，体内多种细胞如巨噬细胞、肝细胞、软骨细胞、滑膜细胞等可异常表达iNOS，产生比生理量大得多的NO〔2〕，且持续时间更长。本研究发现高脂血症模型大鼠血浆NO含量显著增加，推测高脂可能刺激细胞异常表达iNOS，产生大量NO，从而引起血浆NO含量明显增高。本研究提示木樨草素可以抑制iNOS活性从而降低血浆NO含量。

NO可与超氧阴离子反应，生成一种强氧化剂过氧化亚硝酸(ONOOH)，诱导脂质过氧化反应。MDA是脂质过氧化的中间产物，常用于反映机体内脂质过氧化的程度，由于MDA可交链蛋白质和磷脂的氨基，使膜性结构的脆性增加，导致生物膜变性，因此可以间接反映细胞损伤的程度〔3〕。过多脂质沉积于血管表皮，使内皮产生的抗氧化酶含量下降，机体清除自由基的能力下降，产生大量自由基及脂质过氧化产物MDA〔4〕。本实验提示木樨草素可以抑制自由基诱导的脂质过氧化反应。

正常情况下，体内存在一套有效的抗氧化防御系统如SOD、GPX等，能及时清除过量的自由基，从而保护细胞膜结构和功能的完整。某些病理情况下，机体产生的自由基超过机体的清除能力，促使疾病进一步发展。T-AOC是用于衡量机体抗氧化系统功能状况的综合性指标。T-AOC的大小可反映机体抗氧化系统对外来刺激的代偿能力以及机体自由基代谢的状态〔5〕。本实验结果提示，高脂干扰了体内氧化与抗氧化系统的平衡，使抗氧化能力下降，脂质过氧化作用增强。龚志刚等〔6〕的体内实验表明：葛根异黄酮(500 mg/kg)可明显提高糖尿病大鼠血清抗氧化酶活性，降低脂质过氧化程度，改善胰岛素和血糖水平。Wang等〔7〕的体外实验发现，浮萍总黄酮可以明显提高经H2O2氧化损伤后人脐血管内皮细胞的总抗氧化活性以及SOD、CAT和GPX酶活性，降低MDA含量。本研究说明木樨草素可以增强机体的抗氧化能力，清除过量的自由基，维持机体氧化和抗氧化系统的平衡。

综上，体脂过高时木樨草素可显著提高SOD和GPX等抗氧化物酶活性，增加机体抗氧化能力，降低NO等自由基含量，从而抑制脂质过氧化，维持机体氧化和抗氧化系统的平衡。

4 参考文献

1祝德秋，刘皋林.木樨草素的药理作用研究进展〔J〕.中国药房，2010；21(19):1807-10.

2陈树君，孙玉敏，孟羽俊，等.慢性氟中毒大鼠睾丸组织总抗氧化能力与一氧化氮合酶和一氧化氮水平的变化〔J〕.环境与健康，2007；24 (8)：627-9.

3刘 连，徐园园，许 洁，等.氟中毒大鼠血清中NO和MDA及GSH-Px的研究〔J〕.现代预防医学，2010；37(6)：1108-9.

4Aviram M.Review of studies on human oxidative damage and anti-oxidant protection related to cardiovascular diseases〔J〕.Free Radic Res,2000;33(1):85-97.

5孙玉敏，陈树君，杨 扬，等.慢性氟中毒大鼠血清总抗氧化能力与一氧化氮水平的变化〔J〕.中国工业医学杂志，2009；22(6)：445-6.

6龚志刚，朱 笃，张月华.葛根素干预对糖尿病运动大鼠血清抗氧化能力的影响〔J〕.食品科学，2008；29(9):567-70.

7Wang B，Peng L，Zhu L,etal.Protective effect of total flavonoids from Spirodela polyrrhiza(L.)Schleid on human umbilical vein endothelial cell damage induced by hydrogen peroxide〔J〕.Colloids Surf，2007;60(1):36-9.