银杏达莫注射液对实验性2型糖尿病大鼠肝脏GLP-1表达的影响

王加良 张艳丽 梁春娥 王桂云 刘 星 任凤云

(牡丹江医学院红旗医院，黑龙江 牡丹江 157011)

糖尿病性肝病主要是指由糖尿病(DM)引发的肝功能和肝脏组织学变化。DM与肝病的关系非常密切，在引起脂肪肝(FL)的所有病因中，DM占第3位，仅次于肥胖与饮酒。这是因为2型糖尿病(T2DM)患者常伴有肥胖和高脂血症，导致其更容易发生FL，而研究同样发现FL患者中有4%～46%发生糖耐量减低或显性DM〔1〕。本实验通过探讨银杏达莫注射液对T2DM肝病大鼠肝脏GLP-1基因表达的影响，研究银杏达莫注射液对DM肝病的治疗作用及机制。

1 材料与方法

1.1材料 银杏达莫注射液够于贵州益佰制药股份有限公司；链脲佐菌素(STZ)购自美国Sigma公司产品。

1.2实验方法 随机选取80只健康Wistar大鼠，体重180～200 g，适应性喂养1 w。随机取20只作为正常组给予常规饮食，另外60只作为模型组给予高脂饮食饲养。8 w后，腹腔一次性注射STZ注射剂15 mg/kg，宰杀大鼠并进行指标检测。正常组20只给予常规饲料喂养，8 w后注射相同体积的柠檬酸钠-柠檬酸缓冲液。模型组大鼠注射STZ 12 w之后出现典型的T2DM特点。将造模成功的T2DM大鼠随机选取40只分成对照组和治疗组各20只，治疗组以0.5 ml/kg银杏达莫注射液腹腔注射对大鼠进行治疗，对照组继续给予高脂饮食，8 w后处死大鼠〔2,3〕。成模大鼠体毛杂乱且反应迟缓，明显的多尿、多食、体重减轻。

1.3指标检测 采用全自动生化分析仪检测血糖、血脂及肝功的变化。RT-PCR法检测GLP-1 mRNA表达。

2 结 果

2.1实验大鼠葡萄糖耐量变化 模型组大鼠糖耐量出现明显异常，与正常组比较差异显著(P<0.01)，见表1。

表1 正常大鼠与模型大鼠糖耐量的变化±s,nmol/L)

2.2治疗后各组大鼠血糖及肝功变化 与模型组相比，治疗组空腹血糖谷丙转氨酶(FBG)、谷丙转氨酶(GPT)及谷草转氨酶(GOT)含量显著降低(P<0.01)。见表2。

表1 银杏达莫注射液对大鼠FBG、肝功的影响±s,n=20)

2.3治疗后各组大鼠肝功的变化 与模型组相比，治疗组三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)含量降低，高密度脂蛋白(HDL)含量升高(P<0.01)，见表3。

表3 银杏达莫注射液对大鼠血脂的影响±s,n=20,mmol/L)

2.4银杏达莫注射液对T2DM大鼠肝组织GLP1 模型组的GLP-1基因表达量(0.045 8±0.005 2)最高，经银杏达莫注射液治疗后，治疗组GLP-1基因表达量(0.024 3±0.004 3)较糖尿病组明显下降(P<0.01)，但仍略高于正常组(0.017 6±0.004 8)。

3 讨 论

胰岛功能受损和胰岛素抵抗是T2DM发病机制中的两个重要因素。在DM发生前胰岛素抵抗往往已经存在。本模型是对健康大鼠进行诱导，使之产生胰岛素抵抗。因大鼠胰岛代偿能力增强，单纯严重的胰岛素抵抗不足以引起DM。此时给予小剂量STZ使β细胞受损，致使胰岛素分泌相对减少，此时，即使胰岛素水平仍高于正常范围，但仍不能有效代偿外周胰岛素抵抗，从而引发DM。糖尿病肝病的发生机制可能与以下几方面关:(1)长期高血糖造成肝糖原大量沉积，并使载脂蛋白糖基化，过量的糖被转化为脂质贮存，加重了肝脏的脂肪变性；(2)高胰岛素血症激活羟甲基戊二酸单酰CoA还原酶(HMGCoA还原酶)的活性，使胆固醇合成量增加；(3)脂肪代谢异常，可能是胰岛素抵抗引起糖代谢障碍，脂肪动员增加，从而导致肝组织中游离脂肪酸和甘油三酯含量增加；(4)DM患者微循环障碍，毛细血管基底膜增厚，使氧弥散能力下降，肝组织缺氧引起肝细胞坏死，出现丙氨酸氨基转移酶(ALT)活力增高，尤其是合并糖尿病酮症酸中毒时更易发生肝脏损害，并发微血管病变〔4〕。

GLP-1是一种受进食刺激后，小肠内细胞所分泌的一种肠道激素 。其主要作用是刺激葡萄糖依赖的胰岛素分泌，抑制餐后胰高血糖素的释放，延缓胃的排空，并对胰岛细胞有诱导增殖作用〔5〕。GLP-1类药物通过胰腺、肝脏、脑及胃排空等多重作用调节血糖，同时近几年越来越多研究发现其通过减轻胰岛素抵抗、增强肝脏脂质代谢能力、减少肝脏脂质含量发挥治疗非广西精性脂肪性肝病(NAFLD)的作用〔6〕。本实验结果显示，银杏达莫注射液能有效地改善T2DM大鼠血糖、血脂情况，并能对肝功能起到改善作用，证实了银杏达莫注射液可以有效地保护和治疗T2DM大鼠肝脏的损伤。

4 参考文献

1李改华.肝脏在糖尿病发病中的地位〔J〕.大同医学专科学校学报，2006;26(2)：40-1.

2栾海燕，隋洪玉，张雪松,等.桔梗总皂苷对2型糖尿病肝病大鼠的干预作用〔J〕，中国老年学杂志，2013；3(33)：1094-5.

3任凤云，宋秋颖，张增雷,等.银杏达莫注射液对实验性2型糖尿病大鼠肾脏转化生长因子-β1表达的影响[J].中国老年学杂志，2013;7(33)：3370-2.

4董艳丽.浅析肝脏疾病与糖尿病的关系〔J〕. 中国实用医药，2008;3(21):119-20.

5田 峰.GLP- 1 受体激动剂与非酒精性脂肪性肝病〔J〕. 深圳中西医结合杂志，2013;(1)23:5-57.

6朱大龙.基于GLP-1治疗策略对糖尿病伴脂肪肝的疗效评价〔J〕.中华医学会第十二次全国内分泌学学术会议论文汇编，2013：48-9.