上海市徐汇区住院患者血中维生素D水平分析

王春平 毛旭东 盛宏光

(1.江苏大学医学院，江苏镇江 212002；2.上海市徐汇区中心医院内分泌科，上海 200031)

维生素D是一种脂溶性维生素，参与维持人体内钙离子的平衡。维生素D缺乏可导致骨质疏松，其制剂已广泛应用于骨质疏松症的治疗。维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)在人体内广泛分布，维生素D与VDR结合后还具有多种骨骼外效应，如增强机体免疫、减轻炎性反应以及通过调节细胞周期而降低癌症风险等。本研究采用液相色谱-质谱联用法(LC-MS/MS)检测上海市徐汇区中心医院住院患者的维生素D2和维生素D3水平，旨在为上海市徐汇区住院患者维生素D相关疾病的研究和治疗提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料 上海市徐汇区中心医院2012年5月—2013年1月收治2315例住院患者，其中男性1084例(46.83％)、女性1231例(53.17％)；年龄为21～101岁，平均年龄(78.42±11.92)岁。排除标准：肝功能不全、肾功能不全、恶性肿瘤、甲状腺功能亢进/减退﹑甲状旁腺功能亢进/减退、激素服用者及3个月内未服用含维生素D的保健品及药品者。2315例入组患者或其家属均签署了知情同意书。男女性患者人数相近(P>0.05)，具有可比性。

1.2 仪器和材料 抽取空腹血清，采用LC-MS/MS法，以25-羟基维生素D2-氘3和25-羟基维生素D3-氘6为内标测定25(OH)D2和25(OH)D3，用Analyst1.5软件采集检测数据并作定量分析。 同时，采用常规生化法测定甲状旁腺素(PTH)水平、肝肾功能等。API 4000串联质谱仪购自美国AB SCIEX公司，Shimadzu系列液相色谱仪购自日本岛津公司。低、中、高浓度质控的准确度应为85％～115％，精密度(CV)应在15％以内。PTH采用德国西门子公司IMMULITE仪器化学发光法测定。

2 结 果

2.1 2315例受试者的25(OH)D、PTH的平均浓度 25(OH)D2平均浓度为(1.58±2.08)ng/mL，25(OH)D3为(14.23±7.47)ng/mL，总25(OH)D为(15.81±7.98)ng/mL，PTH为(48.92±28.65)pg/mL。

2.2 2315例受试者的25(OH)D的性别、年龄及浓度分布 见表1～3。

表1 2315例受试者的25(OH)D性别分布

表2 2315例受试者的25(OH)D年龄分布

表3 2315例受试者的25(OH)D浓度分布

2.3 25(OH)D与PTH的浓度关系 2315例受试者中，PTH浓度正常(10～65 pg/mL)者有1787例(77.19％)，其中男性813例(45.5％)，女性974例(54.5％)；此2315例的25(OH)D2浓度为(1.62±2.02)ng/mL,25(OH)D3为(4.62±7.06)ng/mL,总25(OH)D为(16.24±7.28)ng/mL。PTH与25(OH)D的浓度呈负相关，pearson相关系数为-0.212(P<0.01)。

3 讨 论

人体获得维生素D的途径主要有两种，即从食物中摄取以及由皮肤组织内的7-脱氢胆固醇经日光中波长为290～315 nm的紫外线照射后转化生成，以后者为主[1]。来源于膳食或皮肤组织的维生素D不具有生物活性，必须经过两次连续的羟化过程才能被激活。从膳食或皮肤获取的维生素D与血浆维生素D结合蛋白(vitamin D binding protein,DBP)结合后被转运至肝脏，在肝脏内经25羟化酶的作用首先转化成25-羟基维生素D[25(OH)D]，随后大部分25(OH)D进入肾脏再经1-羟化酶的催化生成具有生物活性的1,25二羟基维生素D[1,25(OH)2D]；1,25(OH)2D在DBP的载运下，经血液循环到达靶器官并与细胞中的VDR结合，从而发挥生物学功能，另有很少一部分储存在脂肪组织中。血液中的1,25(OH)2D的半衰期为5～7 d，而25(OH)D的半衰期长达20～30 d，因此，将25(OH)D作为衡量体内维生素D水平的主要指标，同时它也是维生素D在血液循环中的主要存在形式[2]。

2002—2004年美国国家健康和营养调查委员会(NHANES )推荐将血清25(OH)D浓度<37.5 nmol(15 ng/mL)作为维生素D缺乏的标准[3]，指出当血清25(OH)D浓度<15 ng/mL时，会诱发甲状旁腺功能亢进，PTH分泌增多，进而引起骨质密度及骨形态的变化并伴矿化障碍；补充维生素D使血清25(OH)D浓度> 20 ng/mL时，PTH水平恢复。洪维等[4]报告，血清25(OH)D浓度<20 ng/mL时，对骨转换的影响不大；而当血清25(OH)D浓度<10 ng/mL时，骨转换尤其是骨形成指标才发生变化。本研究中，以血清25(OH)D浓度为10～15 ng/mL的受试者最多(735/2315，31.75％)；当血清25(OH)D浓度为(16.24±7.28)ng/mL时，PTH的浓度在正常范围内(10～65 pg/mL)。因此，我们认为可以将16 ng/mL作为上海市徐汇区人群的正常维生素D浓度的参考值，但尚需对受试者的骨折发生率进行3～5年的随访，以进一步验证该推断。

目前，通常将总25(OH)D浓度≥30 ng/mL、20～30 ng/mL、<20 ng/mL，分别作为维生素D充足、不足和缺乏的标准[5]。本研究显示，2315例受试者的25(OH)D2平均浓度为(1.58±2.08)ng/mL，25(OH)D3为(14.23±7.47)ng/mL，总25(OH)D为(15.81±7.98)ng/mL。朱汉民等[6]的研究显示，在2607例平均年龄为(60.4±20.9)岁的上海健康成人中，分别有31.24％和66.12％存在维生素D不足和缺乏。这些研究表明，上海地区人群维生素D水平普遍偏低，应该引起足够的重视。本研究还表明，90岁以上受试者的维生素D水平最低，其次为40岁以下者，而60～70岁受试者的维生素D水平最高。此外，本研究中25(OH)D3的浓度大于25(OH)D2，这是因为人体中以25(OH)D3为主。

[1]Holick MF.Sunlight and vitamin D for bone health and prevention of autoimmune disease[J].Am J Clin Nurt,2004,80(6 suppl):1678-1688.

[2]Zeitz U,Weber K,Soegiarto DW,et al.Impaired insulin secretory capacity in mice lacking a functional vitamin D receptor[J].FASEB J,2003,17(3):509-511.

[3]Yetley EA.Assessing the vitamin D status of the US population [J] .Am J Clin Nutr,2008,88(2):558-564.

[4]洪维,朱汉民,程群，等.血清维生素D水平与骨代谢状态的相关性:附1389例观察[J].中华骨质疏松杂志,2011,4(4):224-231.

[5]Holick MF.Vitamin D deficiency[J].N Engl J Med,2007,357(3):266-281.

[6]朱汉民，陈群，甘洁民，等.上海地区人群维生素D状态研究[J].中国骨质疏松和骨矿盐疾病杂志,2010,3(3)：157-163.