超声法协同表面活性剂提取苦瓜多糖的工艺研究

巢秦++李敏

摘 要 以多糖提取率为指标，应用单因素试验方法考查表面活性剂、液料比、超声功率、超声温度、超声时间对苦瓜中总多糖提取率的影响，并通过正交实验优化提取工艺。结果表明，表面活性剂（吐温80）的用量为9 μL，最佳工艺条件是：提取温度60℃，液料比1∶35，提取功率70%，提取时间

30 min。

关键词 表面活性剂；苦瓜；多糖；超声法；工艺

中图分类号：TQ914 文献标志码：A 文章编号：1673-890X（2014）12-0115-03

苦瓜，葫芦科苦瓜属（Momordica）一年生草本攀缘植物果实。苦瓜具有消暑清热、明目解毒之功效[1]。苦瓜种子和果实具有很强的生理活性，具有明显的降血糖、抗肿瘤、杀精等作用。目前，已分离出三萜、甾类、生物碱、蛋白、有机酸及多糖等[2]。苦瓜中的多糖是一种重要的活性成分，具有降血糖，抗氧化，抗肿瘤，提高免疫力等作用。本实验采用的超声法协同表面活性剂通过正交实验来优化苦瓜多糖的提取工艺

研究。

1 材料与试剂

1.1 材料

苦瓜购买于吉林农业科技学院周边蔬菜超市，洗净，切片，晒干，备用。

1.2 试剂

葡萄糖标准品（吉林生物制品检验所），3，5-二硝基水杨酸，氢氧化钠，无水亚硫酸钠，乙

醇等。

2 方法

2.1 葡萄糖标准溶液的制备

精密称取在120℃下减压干燥至恒重的葡萄糖对照品100 mg于100 mL容量瓶中，加适量蒸馏水，溶解，放冷，并定容至刻度，即得浓度为1 mg/mL葡萄糖对照品溶液。

2.2 标准曲线的制备

取6支20 mL具塞刻度试管，准确量取葡萄糖标准溶液0 mL，0.2 mL，0.4 mL，0.6 mL，0.8 mL，1.0 mL加蒸馏水至2 mL，DNS 1.5 mL，将各管摇匀，在沸水浴中准确加热5 min，取出，冷却至室温，蒸馏水定容至10 mL，混匀，于520 nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，葡萄糖含量（mg）为横坐标，绘制标准曲线。

2.3 多糖提取及测定方法

精密称取0.5 g样品于50 mL锥形瓶中，加入适量蒸馏水，适量表面活性剂，超声波提取，过滤至50 mL容量瓶中，蒸馏水定容至50 mL，待测。准确移取待测液2 mL于20 mL具塞试管，加入DNS试剂1.5 mL，摇匀，沸水浴加热5 min，取出，冷却至室温，蒸馏水定容至10 mL，颠倒混匀，520 nm处测定样品吸光度[3]。

2.4 单因素试验

2.4.1 超声功率对提取效果的影响

准确称取0.5 g苦瓜粉末5份，在提取温度为50℃，表面活性剂为6 μL，液料比为1∶20，提取时间为20 min，功率分别为50%，60%，70%，80%，90%（W）的条件下按上述方法提取，测得吸光度值A，计算提取率。

2.4.2 料液比对提取效果的影响

准确称取0.5 g苦瓜粉末5份，在提取温度为50℃，表面活性剂为6 μL，提取时间为20 min，功率为80%，液料比分别为1∶10，1∶20，1∶30，1∶40，1∶50（g/mL）的条件下按上述方法提取，测得吸光度值A，计算提取率。

2.4.3 提取时间对提取效果的影响

准确称取0.5 g苦瓜粉末5份，在提取温度为50℃，表面活性剂为6 μL，液料比为1∶20，功率为80%，提取时间分别为15、20、25、30、

35（min）的条件下按上述方法提取，测得吸光度值A，计算提取率。

2.4.4 提取温度对提取效果的影响

准确称取0.5 g苦瓜粉末5份，在功率为80%，表面活性剂为6 μL，液料比为1∶20，提取时间为20 min，提取温度分别为40、50、60、70、80（℃）的条件下按上述方法提取，测得吸光度值A，计算提取率。

2.5 正交试验设计

在前期单因素试验的基础上，选取对多糖提取影响显著的因素，设计合理的正交实验。

3 结果与分析

3.1 标准曲线

图1 葡萄糖标准曲线

3.2 正交实验结果

在单因素试验基础上，选取吐温80的量为

9 μL，以对提取影响比较大的液料比，提取时间，提取功率，提取温度四个因素设计L9（34）正交实验[4]，试验因素与4 结语

与传统提取方法相比，超声提取能大大提高提取过程的传质效率，而表面活性剂又具有增溶作用，这使苦瓜细胞组织中的多糖成分能够更加迅速释放，提高提取效率，缩短提取时间，大大提高了苦瓜多糖的提取效率。通过本实验得到最佳提取条件为，表面活性剂（吐温80）的用量为9 μL，提取温度60℃，液料比1∶35，提取功率70%，提取时间30 min。这对苦瓜多糖的结构的分析及其功效研究和开发奠定基础。

参考文献

[1] 查青，董英，徐斌.药食两用植物（Ⅱ）-苦瓜的药理作用研究概况[J].食品研究与开发，2005，26（3）：33-35.

[2] 钟正.苦瓜多糖研究综述[J].广东化工，2011，2（38）：91.

[3] 赵凯，许鹏举，谷广烨.3，5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖含量的研究[J].食品科学，2008，29（8）：534-536.

[4] 何雁，马志庆.医药数理统计[M].北京：科学出版社，2009，3：101-172.

（责任编辑：刘昀）endprint

摘 要 以多糖提取率为指标，应用单因素试验方法考查表面活性剂、液料比、超声功率、超声温度、超声时间对苦瓜中总多糖提取率的影响，并通过正交实验优化提取工艺。结果表明，表面活性剂（吐温80）的用量为9 μL，最佳工艺条件是：提取温度60℃，液料比1∶35，提取功率70%，提取时间

30 min。

关键词 表面活性剂；苦瓜；多糖；超声法；工艺

中图分类号：TQ914 文献标志码：A 文章编号：1673-890X（2014）12-0115-03

苦瓜，葫芦科苦瓜属（Momordica）一年生草本攀缘植物果实。苦瓜具有消暑清热、明目解毒之功效[1]。苦瓜种子和果实具有很强的生理活性，具有明显的降血糖、抗肿瘤、杀精等作用。目前，已分离出三萜、甾类、生物碱、蛋白、有机酸及多糖等[2]。苦瓜中的多糖是一种重要的活性成分，具有降血糖，抗氧化，抗肿瘤，提高免疫力等作用。本实验采用的超声法协同表面活性剂通过正交实验来优化苦瓜多糖的提取工艺

研究。

1 材料与试剂

1.1 材料

苦瓜购买于吉林农业科技学院周边蔬菜超市，洗净，切片，晒干，备用。

1.2 试剂

葡萄糖标准品（吉林生物制品检验所），3，5-二硝基水杨酸，氢氧化钠，无水亚硫酸钠，乙

醇等。

2 方法

2.1 葡萄糖标准溶液的制备

精密称取在120℃下减压干燥至恒重的葡萄糖对照品100 mg于100 mL容量瓶中，加适量蒸馏水，溶解，放冷，并定容至刻度，即得浓度为1 mg/mL葡萄糖对照品溶液。

2.2 标准曲线的制备

取6支20 mL具塞刻度试管，准确量取葡萄糖标准溶液0 mL，0.2 mL，0.4 mL，0.6 mL，0.8 mL，1.0 mL加蒸馏水至2 mL，DNS 1.5 mL，将各管摇匀，在沸水浴中准确加热5 min，取出，冷却至室温，蒸馏水定容至10 mL，混匀，于520 nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，葡萄糖含量（mg）为横坐标，绘制标准曲线。

2.3 多糖提取及测定方法

精密称取0.5 g样品于50 mL锥形瓶中，加入适量蒸馏水，适量表面活性剂，超声波提取，过滤至50 mL容量瓶中，蒸馏水定容至50 mL，待测。准确移取待测液2 mL于20 mL具塞试管，加入DNS试剂1.5 mL，摇匀，沸水浴加热5 min，取出，冷却至室温，蒸馏水定容至10 mL，颠倒混匀，520 nm处测定样品吸光度[3]。

2.4 单因素试验

2.4.1 超声功率对提取效果的影响

准确称取0.5 g苦瓜粉末5份，在提取温度为50℃，表面活性剂为6 μL，液料比为1∶20，提取时间为20 min，功率分别为50%，60%，70%，80%，90%（W）的条件下按上述方法提取，测得吸光度值A，计算提取率。

2.4.2 料液比对提取效果的影响

准确称取0.5 g苦瓜粉末5份，在提取温度为50℃，表面活性剂为6 μL，提取时间为20 min，功率为80%，液料比分别为1∶10，1∶20，1∶30，1∶40，1∶50（g/mL）的条件下按上述方法提取，测得吸光度值A，计算提取率。

2.4.3 提取时间对提取效果的影响

准确称取0.5 g苦瓜粉末5份，在提取温度为50℃，表面活性剂为6 μL，液料比为1∶20，功率为80%，提取时间分别为15、20、25、30、

35（min）的条件下按上述方法提取，测得吸光度值A，计算提取率。

2.4.4 提取温度对提取效果的影响

准确称取0.5 g苦瓜粉末5份，在功率为80%，表面活性剂为6 μL，液料比为1∶20，提取时间为20 min，提取温度分别为40、50、60、70、80（℃）的条件下按上述方法提取，测得吸光度值A，计算提取率。

2.5 正交试验设计

在前期单因素试验的基础上，选取对多糖提取影响显著的因素，设计合理的正交实验。

3 结果与分析

3.1 标准曲线

图1 葡萄糖标准曲线

3.2 正交实验结果

在单因素试验基础上，选取吐温80的量为

9 μL，以对提取影响比较大的液料比，提取时间，提取功率，提取温度四个因素设计L9（34）正交实验[4]，试验因素与4 结语

与传统提取方法相比，超声提取能大大提高提取过程的传质效率，而表面活性剂又具有增溶作用，这使苦瓜细胞组织中的多糖成分能够更加迅速释放，提高提取效率，缩短提取时间，大大提高了苦瓜多糖的提取效率。通过本实验得到最佳提取条件为，表面活性剂（吐温80）的用量为9 μL，提取温度60℃，液料比1∶35，提取功率70%，提取时间30 min。这对苦瓜多糖的结构的分析及其功效研究和开发奠定基础。

参考文献

[1] 查青，董英，徐斌.药食两用植物（Ⅱ）-苦瓜的药理作用研究概况[J].食品研究与开发，2005，26（3）：33-35.

[2] 钟正.苦瓜多糖研究综述[J].广东化工，2011，2（38）：91.

[3] 赵凯，许鹏举，谷广烨.3，5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖含量的研究[J].食品科学，2008，29（8）：534-536.

[4] 何雁，马志庆.医药数理统计[M].北京：科学出版社，2009，3：101-172.

（责任编辑：刘昀）endprint

摘 要 以多糖提取率为指标，应用单因素试验方法考查表面活性剂、液料比、超声功率、超声温度、超声时间对苦瓜中总多糖提取率的影响，并通过正交实验优化提取工艺。结果表明，表面活性剂（吐温80）的用量为9 μL，最佳工艺条件是：提取温度60℃，液料比1∶35，提取功率70%，提取时间

30 min。

关键词 表面活性剂；苦瓜；多糖；超声法；工艺

中图分类号：TQ914 文献标志码：A 文章编号：1673-890X（2014）12-0115-03

苦瓜，葫芦科苦瓜属（Momordica）一年生草本攀缘植物果实。苦瓜具有消暑清热、明目解毒之功效[1]。苦瓜种子和果实具有很强的生理活性，具有明显的降血糖、抗肿瘤、杀精等作用。目前，已分离出三萜、甾类、生物碱、蛋白、有机酸及多糖等[2]。苦瓜中的多糖是一种重要的活性成分，具有降血糖，抗氧化，抗肿瘤，提高免疫力等作用。本实验采用的超声法协同表面活性剂通过正交实验来优化苦瓜多糖的提取工艺

研究。

1 材料与试剂

1.1 材料

苦瓜购买于吉林农业科技学院周边蔬菜超市，洗净，切片，晒干，备用。

1.2 试剂

葡萄糖标准品（吉林生物制品检验所），3，5-二硝基水杨酸，氢氧化钠，无水亚硫酸钠，乙

醇等。

2 方法

2.1 葡萄糖标准溶液的制备

精密称取在120℃下减压干燥至恒重的葡萄糖对照品100 mg于100 mL容量瓶中，加适量蒸馏水，溶解，放冷，并定容至刻度，即得浓度为1 mg/mL葡萄糖对照品溶液。

2.2 标准曲线的制备

取6支20 mL具塞刻度试管，准确量取葡萄糖标准溶液0 mL，0.2 mL，0.4 mL，0.6 mL，0.8 mL，1.0 mL加蒸馏水至2 mL，DNS 1.5 mL，将各管摇匀，在沸水浴中准确加热5 min，取出，冷却至室温，蒸馏水定容至10 mL，混匀，于520 nm处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，葡萄糖含量（mg）为横坐标，绘制标准曲线。

2.3 多糖提取及测定方法

精密称取0.5 g样品于50 mL锥形瓶中，加入适量蒸馏水，适量表面活性剂，超声波提取，过滤至50 mL容量瓶中，蒸馏水定容至50 mL，待测。准确移取待测液2 mL于20 mL具塞试管，加入DNS试剂1.5 mL，摇匀，沸水浴加热5 min，取出，冷却至室温，蒸馏水定容至10 mL，颠倒混匀，520 nm处测定样品吸光度[3]。

2.4 单因素试验

2.4.1 超声功率对提取效果的影响

准确称取0.5 g苦瓜粉末5份，在提取温度为50℃，表面活性剂为6 μL，液料比为1∶20，提取时间为20 min，功率分别为50%，60%，70%，80%，90%（W）的条件下按上述方法提取，测得吸光度值A，计算提取率。

2.4.2 料液比对提取效果的影响

准确称取0.5 g苦瓜粉末5份，在提取温度为50℃，表面活性剂为6 μL，提取时间为20 min，功率为80%，液料比分别为1∶10，1∶20，1∶30，1∶40，1∶50（g/mL）的条件下按上述方法提取，测得吸光度值A，计算提取率。

2.4.3 提取时间对提取效果的影响

准确称取0.5 g苦瓜粉末5份，在提取温度为50℃，表面活性剂为6 μL，液料比为1∶20，功率为80%，提取时间分别为15、20、25、30、

35（min）的条件下按上述方法提取，测得吸光度值A，计算提取率。

2.4.4 提取温度对提取效果的影响

准确称取0.5 g苦瓜粉末5份，在功率为80%，表面活性剂为6 μL，液料比为1∶20，提取时间为20 min，提取温度分别为40、50、60、70、80（℃）的条件下按上述方法提取，测得吸光度值A，计算提取率。

2.5 正交试验设计

在前期单因素试验的基础上，选取对多糖提取影响显著的因素，设计合理的正交实验。

3 结果与分析

3.1 标准曲线

图1 葡萄糖标准曲线

3.2 正交实验结果

在单因素试验基础上，选取吐温80的量为

9 μL，以对提取影响比较大的液料比，提取时间，提取功率，提取温度四个因素设计L9（34）正交实验[4]，试验因素与4 结语

与传统提取方法相比，超声提取能大大提高提取过程的传质效率，而表面活性剂又具有增溶作用，这使苦瓜细胞组织中的多糖成分能够更加迅速释放，提高提取效率，缩短提取时间，大大提高了苦瓜多糖的提取效率。通过本实验得到最佳提取条件为，表面活性剂（吐温80）的用量为9 μL，提取温度60℃，液料比1∶35，提取功率70%，提取时间30 min。这对苦瓜多糖的结构的分析及其功效研究和开发奠定基础。

参考文献

[1] 查青，董英，徐斌.药食两用植物（Ⅱ）-苦瓜的药理作用研究概况[J].食品研究与开发，2005，26（3）：33-35.

[2] 钟正.苦瓜多糖研究综述[J].广东化工，2011，2（38）：91.

[3] 赵凯，许鹏举，谷广烨.3，5-二硝基水杨酸比色法测定还原糖含量的研究[J].食品科学，2008，29（8）：534-536.

[4] 何雁，马志庆.医药数理统计[M].北京：科学出版社，2009，3：101-172.

（责任编辑：刘昀）endprint