郭春霞 任拥军 郭海荣
·临床研究·
孕产妇HBV-DNA与乙型肝炎血清学标志物的相关性分析
郭春霞 任拥军 郭海荣
乙型肝炎血清学标志物;孕妇;HBV-DNA;酶联免疫吸附法;实时荧光定量PCR;相关性
长期以来,我国人群一直呈乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)高感染率,约有1.3亿人感染[1]。1979年全国性的大人群抽样调查及以后陆续的小范围调查显示HBsAg 阳性检出率为9.09%~10%。孕产妇HBsAg 阳性检出率为11.2%~12.5%。我国每年约有72~80万名孕产妇妇携带HBV。因此,这些孕产妇的孕期保健和母婴阻断值得关注。目前乙肝的诊断主要依赖于血清标志物和HBV-DNA水平的检测。血清HBV-DNA水平对于临床分析判断病情,监测抗病毒治疗效果,估计急慢性乙肝感染的预后,是可靠的指标。乙型肝炎病毒标志物的检测多采用酶联免疫吸附法(ELISA)。该方法快速简便,试剂稳定期长,测试成本低[2]。本文用ELISA检测患者血清HBsAg、HBeAg、抗HBe,抗HBc,并与HBV-DNA的定量进行比较,以探讨他们之间的相关性。
1.1 一般资料 筛选收集2011年1月至2012年6月在石家庄妇幼保健院分娩的HBsAg 阳性的1 012例产妇的血清标本。产妇初检HBsAg阳性,肝肾功能正常,甲、丙、丁、戊型肝炎系列检查阴性,年龄22~35岁。
1.2 检测方法和仪器 酶联免疫吸附法(ELISA)检测患者血清中的乙型肝炎血清学标志物(HBsAg,抗HBs,HBeAg,抗HBe,抗HBc)。试剂盒:珠海丽珠生物工程股份有限公司提供。按试剂盒说明书操作,用郑州安图酶标仪测定记录结果。实时荧光定量PCR(read time PCR,PT-PCR)技术检测患者血清中的HBV-DNA。仪器名称Line-Gene(Read-Time PCR Detection System)。 试剂盒由珠海丽珠生物工程股份有限公司提供。检测范围(5×10-1.0*108)。
1.3 结果判断标准 血清学标志物HBsAg、 HBeAg、 抗HBs的阴性结果为:样品A值<临界值(C.O.),阳性结果为:样品A值≥临界值(C.O.)。血清学标志物抗HBe、抗HBc阳性结果为:样品A值<临界值(C.O),阴性结果为:样品A值≥临界值(C.O.)。
HBsAg 阳性+HBeAg 阳性+ 抗HBc阳性和HBsAg阳性+HBeAg阳性一组的HBV_DNA阳性率(99%) 显著高于HBsAg 阳性 + 抗HBe 阳性+抗HB c 阳性和HBsAg阳性+抗HBc阳性一组的阳性率(20%)(P<0.01)。而且HBeAg 阳性一组的病毒载量集中在高拷贝区。但HBeAg 阳性一组中仍有1%的阴性率。见表1。
表1 HBeAg 阳性和HBeAg阴性2组HBV_DNA定量与乙型肝炎血清学标志物
乙型病毒性肝炎是我国常见的传染病,其传染性和病死率均居高不下,严重危害人们的健康[3]。乙肝病毒血清标志物检测因操作简便,价格便宜,是目前诊断乙型肝炎最常用的指标,即俗称的“两对半”,主要反映人体对HBV的免疫反应状态。用ELISA检测HBV标志物只能反应病毒入侵人体的信息,不能直接反映HBV在患者体内的复制情况,也不能作为判断患者是否具有传染性的直接证据[4]。HBV-DNA定量检测是病毒复制最直接可靠的指标,但由于HBV-DNA水平的检测价格昂贵,对实验室要求也较高,在我国很多地区还不能常规开展。乙肝病毒母婴传播是我国及其他亚洲国家病毒感染最主要的传播途径,大多数研究表明HBsAg、HBeAg及HBV-DNA载量是影响母婴传播的主要因素。所以了解血清标志物及HBV-DNA载量,分析二者之间的关系,有助于今后对HBsAg 阳性孕妇进行快速监测,以便采取合理有效的母婴阻断策略[5]。
本研究通过对2011年1月至2012年6月在石家庄妇幼保健院分娩的、表面抗原阳性的1 090例产妇的血清标本,同时采用ELISA检测乙型肝炎血清学标志物和实时荧光定量PCR技术检测HBV-DNA。结果显示HBsAg 阳性+HBeAg 阳性+ 抗HBc阳性和HBsAg 阳性+HBeAg 阳性一组的阳性率(99%),大于HBsAg 阳性 + 抗HBe 阴性+HBc阳性和HBsAg 阳性+HBc阳性一组的阳性率(20%)(P<0.01)。并且,HBeAg 阳性一组的病毒载量集中在高拷贝区。但HBeAg 阳性一组中仍有1%的阴性率。HBeAg 阳性是反映病毒复制的良好指标,但仅依靠乙型肝炎血清学标志物检
测结果不能准确的判断HBV病毒复制的程度及传染性的强弱。随着医学的发展及检验技术的不断提高,为了减少或避免漏检误诊,贻误治疗,二者联合检测才能更好的给临床提供准确的数据,更全面地反映HBV感染、复制、传染性和疗效评估,更有利于母婴阻断的治疗。
1 李金明主编.实时荧光定量PCR技术.第1版.北京:人民军医出版社,2009.190.
2 王功遂,王曼曼,明朗,等.HBeAg定量在慢性乙型肝炎诊断和治疗中的价值.中华传染病杂志,2004,22:255-258.
3 扬广辉,谭明德,谢玉桃,等.干扰素及拉米夫定抗乙型肝炎病毒的体外实验研究.疾病控制杂志,2004,8:209-212.
4 程钢,何蕴韶,周新宇.荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒.中华医学检验杂志,1999,22:135.
5 陆向东,孙翔,翟祥军,等.HBsAg阳性孕妇HBsAg、HBeAg和HBV-DNA关系探讨.江苏预防医学,2012,23:3.
10.3969/j.issn.1002-7386.2014.16.046
050011 河北省石家庄市妇幼保健院检验科
R 512.62
A
1002-7386(2014)16-2506-02
2014-03-19)