小檗碱和黄芩苷对葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖含量干扰作用研究*

★ 涂秀英 李瑛 魏学鑫 于梅 徐国良 章常华*

(1.江西中医药大学药学院 江西 南昌 330004；2.江西中医药大学现代中药制剂教育部重点实验室 江西 南昌 330004)

葡萄糖含量测定的方法有葡萄糖氧化酶(glucose oxidase，GOD)法、己糖激酶法、干化学试纸法等多种，其测得结果同时也受多种因素影响[1,2]。葡萄糖氧化酶(GOD)法以其经济、实用而作为葡萄糖含量测定的常规方法，葡萄糖氧化酶(GOD)法可能是非特异性的，因为这种方法容易被一些还原剂干扰而出现假阳性，如黄芩苷；也可能被其它一些物质干扰，本文现就GOD法测定葡萄糖含量时是否受小檗碱和黄芩苷的干扰进行研究。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 仪器 倒置显微镜(德国Leica公司)；Bio-Tek ELX800酶标仪(Gene Company Limited)；三洋MCO-175 CO2培养箱(日本SANYO公司)。

1.1.2 试剂 胎牛血清(Hyclone公司，批号：NWA0362)；高糖DMEM培养基(Hyclone公司，批号：NWK0484)；葡萄糖试剂测定盒(中生北控生物科技股份有限公司，批号：1110131)；黄芩苷(中国药品生物制品检定所(中检所)，批号：110715-201016)；盐酸小檗碱(中检所，批号：110713-200911)。

1.2 方法

1.2.1 干扰物配置 盐酸小檗碱溶液：配成溶度为1.0μmol/mL的溶液，盐酸小檗碱的分子量为371.82，取0.37182mg的盐酸小檗碱，溶于1mL培养基中即得；临用时取10μL加入90μL培养基中，即为培养基终浓度为100μmol/L，用DMEM将其倍比稀释成各浓度梯度，将配制好的各浓度药物无菌过滤备用。

黄芩苷溶液：配成溶度为1.0μmol/mL的溶液，黄芩苷分子量为446.37，取0.44637mg黄芩苷，溶于1mL培养基中即得；临用时取10μL加入90μL培养基中，即为培养基终浓度为100μmol/L，用DMEM将其倍比稀释成各浓度梯度，将配制好的各浓度药物无菌过滤备用。

1.2.2 测定对照含血清培养基组和加入不同浓度小檗碱和黄芩苷的干扰含血清培养基组葡萄糖含量 实验方法参照文献[3-5]的基础上加以改进，用葡萄糖氧化酶法分别测定对照组和干扰组的葡萄糖含量，每份分别测定3次，取平均值。分析小檗碱和黄芩苷分别对葡萄糖氧化酶法的干扰作用。

2 结果

小檗碱和黄芩苷对葡萄糖氧化酶法的干扰作用(见表1和表2)，由结果可知，小檗碱(高糖培养基)或黄芩苷(高糖培养基)与对照组(高糖培养基)比较，没有显著差异(P>0.05)，小檗碱(低糖培养基)或黄芩苷(低糖培养基)与对照组(低糖培养基)比较，也没有显著差异(P>0.05)，同时，小檗碱或黄芩苷组干扰度均小于5%。

表1 小檗碱对葡萄糖氧化酶法的干扰作用

表2 黄芩苷对葡萄糖氧化酶法的干扰作用

3 讨论

小檗碱是中药黄连的主要有效成分之一，故盐酸小檗碱又称黄连素。在治疗消渴的方剂配伍中，不少含有黄连[6]。小檗碱可增加3T3-L1脂肪细胞葡萄糖吸收[7]，可改善葡萄糖代谢[8,9]。黄芩苷是从清热解毒中药黄芩中提取的一种黄酮类化合物，具有抗菌、消炎和抗感染等药理作用[10]。黄芩苷在一定的剂量范围内能降低糖尿病鼠的血糖[11,12]。氧化酶法常用于测定血糖或葡萄糖消耗量，如果用该方法测定血糖或葡萄糖消耗量时，我们应考虑还原性物质及其它可能的干扰物，排除干扰为基础或临床试验提供准确数据。通过本次实验可以看出，小檗碱和黄芩苷对氧化酶法测定血糖在浓度1～200μmol/L范围之内没有显著干扰作用。

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