竹叶黄酮降血脂活性研究

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(浙江工业大学 药学院，浙江 杭州 310014)

高脂血症是一种常见而多发的代谢性疾病，是引起心脑血管疾病的重要危险因素，常见于中老年人，但随着饮食结构的改变及饮酒量的上升，其患病率在青年人中也逐年增高.因而，高脂血症的治疗已成为医学界高度关注的问题.目前市场上的降脂产品主要以西药为主，大多数具有副作用，且复发率相对较高，不能做到标本兼治.因此，研发具有安全高效的降血脂药物具有十分重要的意义.现代研究表明，黄酮类化合物在调节血脂、防治心血管疾病方面有显著疗效[1-4].

黄酮类物质是竹叶的主要活性物质，具有抗氧化、清除自由基、抗衰老、抗辐射、抑菌、抗菌防腐、降血脂及保护心脑血管等功效[5-12]，且无毒副作用[13].由于它具有丰富的资源、优良的品质、显著的功效及良好的安全性等特点，引起研究人员的广泛关注，是目前研究的热点.而我国位于世界竹子分布的中心地区，素有“竹子王国”之称，竹类资源相当丰富，因此充分开发利用竹叶中的黄酮类成分具有十分重要的现实经济意义.本研究利用动物实验进行竹叶黄酮的辅助降血脂研究，为降脂产品的研发提供理论依据.

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

竹叶黄酮：安吉圣氏生物有限公司，黄酮质量分数43%和24%.猪油市售，胆固醇、胆酸钠由安徽天启化工科技有限公司生产，蔗糖、酪蛋白由河南明瑞食品添加剂有限公司生产，磷酸氢钙、石粉由西陇化工生产.TC试剂盒、TG试剂盒、HDL-C试剂盒、LDL-C试剂盒购自南京建成生物工程研究所，其他试剂为国产分析纯.

1.2 试验动物及饲料

健康的SD雄性大鼠(医学实验动物合格证号SCXK(浙)2008—0033，医学实验动物设施环境合格证号SYXK(浙)2005—0074)，体重160～190 g，购自浙江省实验动物中心；基础饲料由浙江省实验动物中心提供；混合型高脂动物模型饲料：在基础饲料中添加20.0%蔗糖、15%猪油、1.2%胆固醇、0.2%胆酸钠，6.6%酪蛋白、0.5%磷酸氢钙、0.3%石粉.

1.3 实验分组及给药方式

实验设正常对照组、模型对照组、43%竹叶黄酮剂量组(每天800 mg/kg)和24%竹叶黄酮三个剂量组：每天200 mg/kg(低剂量)、400 mg/kg(中剂量)、800 mg/kg(高剂量).竹叶黄酮用1%羧甲基纤维素溶融制成相应剂量的悬浮液，每天经口灌胃一次.

1.4 高脂模型的建立

大鼠于屏障系统下喂养基础饲料观察5 d.按体重随机分成2组，10只大鼠给予基础饲料为正常对照组，50只给予混合型高脂动物模型饲料造模.每周称重1次.2周后，大鼠不禁食眼球采血，测定血清TC，TG，LDL-C，HDL-C和血糖水平.根据TC水平将造模大鼠随机分成5组(模型对照组、43%竹叶黄酮剂量组和24%竹叶黄酮三个剂量组)，5组大鼠TC，TG，LDL-C，HDL-C和血糖水平差异均无显著性.

1.5 干预治疗

大鼠分组后，43%竹叶黄酮剂量组和24%竹叶黄酮三个剂量组每天经口给予相应剂量药物，正常对照组和模型对照组同时给予同体积的相应溶剂(1%羧甲基纤维素)，正常对照组继续给予基础饲料，模型对照组及四个剂量组继续给予高脂饲料，自由进食、饮水.每周称重1次、记录进食量并计算食物利用率，试验持续30 天.于实验中期不禁食眼球采血，测定血清TC，TG，LDL-C，HDL-C.实验末期，大鼠不禁食眼球采血，测定血清TC，TG，LDL-C，HDL-C.解剖观察，留取肝脏、脾脏、肾脏、睾丸、肾周脂和睾周脂称重，计算相应指数.

1.6 数据分析

2 结果与分析

2.1 竹叶黄酮对大鼠一般指标的影响

实验期间正常大鼠生长状况良好，摄食、饮水正常.其他各组大鼠随时间延长，进食量减少，其中模型对照组进食量减少最明显，而食物总利用率都有所增加.解剖称重，各组的体重无明显差异.肝脏、肾、脾、睾丸等脏器指数各试验组大鼠与模型对照组比较无统计学差异，但各试验组大鼠肝脏和睾丸的脏器指数与正常对照组相比有显著差异.各试验组的肾周脂、睾周脂、体周脂重量与正常对照组相比都有所增加，没有模型对照组明显.正常大鼠的肝脏颜色呈暗红色，高脂大鼠的肝脏呈灰白色，各试验组接近于正常对照组.

2.2 竹叶黄酮对大鼠血清低密度脂蛋白胆固醇浓度的影响

除正常对照组之外，其他各组的血清LDL-C浓度都有增高，其中以模型对照组最明显.给药前，三个剂量组和模型对照组比较血清LDL-C浓度无明显变化，而与正常对照组相比有显著性差异(P<0.01).实验中期，三个剂量组和模型对照组比较血清LDL-C浓度变化不明显.实验末期，低剂量组和中剂量组与模型对照组比较有显著性差异(P<0.01和P<0.05)，但高剂量组、43%竹叶黄酮剂量组与模型对照组比较变化不显著(表1),说明低浓度的竹叶黄酮更有利于降低血清LDL-C的浓度.

表1 竹叶黄酮对大鼠血清LDL-C浓度的影响1)

2.3 竹叶黄酮对大鼠血清高密度脂蛋白胆固醇浓度的影响

模型对照组血清中HDL-C浓度与给药前相比明显下降，其他各组变化不明显.实验开始时,各组血清中HDL-C浓度无明显差异.在给药2周后中、高剂量和43%竹叶黄酮都能明显提高血清HDL-C浓度,与模型对照组比较有显著性差异(P<0.05和P<0.01).低剂量的竹叶黄酮提高血清HDL-C浓度不明显(表2),研究表明竹叶黄酮具有升高血清HDL-C浓度的作用.

表2 竹叶黄酮对大鼠血清HDL-C浓度的影响1)

2.4 竹叶黄酮对大鼠血清总胆固醇浓度的影响

在实验末期，模型对照组血清中TC浓度与给药前相比明显增加，43%竹叶黄酮剂量组也有所增加，24%竹叶黄酮三个剂量组变化不明显.给药前,三个剂量组和模型对照组比较血清TC浓度无明显变化，而与正常对照组相比有显著性差异(P<0.01).给药后2周，中剂量的竹叶黄酮能明显降低血清TC浓度,与模型对照组有显著性差异(P<0.05).给药后4周，24%竹叶黄酮三个试验组血清TC浓度均明显低于模型对照组，显著性差异明显(P<0.05)，43%竹叶黄酮剂量组降低血清TC浓度不显著(表3).说明竹叶黄酮具有降低血清中TC浓度的作用，且与竹叶黄酮的浓度有关系，低浓度的竹叶黄酮对TC浓度影响更大.

表3 竹叶黄酮对大鼠血清TC浓度的影响1)

2.5 竹叶黄酮对大鼠血清甘油三酯浓度的影响

实验开始时,三个剂量组和模型对照组比较血清TG浓度无明显差异，而与正常对照组相比有显著性差异(P<0.01)；在实验中期和实验结束时,中、高剂量的24%竹叶黄酮和43%竹叶黄酮剂量组都能明显降低血清TG浓度,与模型对照组比较有显著性差异(P<0.05和P<0.01),低剂量的竹叶黄酮也能降低血清TG浓度，但与模型对照组比较显著性差异不明显(表4),研究表明竹叶黄酮具有降低血清中TG浓度的作用.

表4 竹叶黄酮对大鼠血清TG浓度的影响1)

3 结 论

总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇水平、低密度脂蛋白胆固醇水平都是血脂的主要指标.研究表明：药物干预后4 周，与高脂模型组比，低剂量的24%竹叶黄酮可明显降低高脂血症大鼠血清的LDL-C和TC浓度，中剂量的24%竹叶黄酮可明显降低大鼠血清的TC，TG，LDL-C浓度和提高血清的HDL-C浓度，高剂量的24%竹叶黄酮可明显降低大鼠血清的TC，TG浓度和提高血清的HDL-C浓度，43%竹叶黄酮可明显提高试验大鼠血清HDL-C浓度和降低血清的TC浓度，表明竹叶黄酮具有辅助降血脂的功能.研究中还首次发现竹叶黄酮的浓度并不与降血脂的活性呈正相关，低浓度的竹叶黄酮有利于降低高脂大鼠血清的TC和LDL-C水平，而高浓度的竹叶黄酮对高脂大鼠血清的HDL-C和TG水平影响更大，具体原因有待于进一步研究，实验结果对竹叶降脂产品研发具有一定的指导意义.

参考文献：

[1] FAN Chun-lei, YAN Jin, QIAN Ying, et al. Regulation of lipoprotein lipase expression by effect of hawthorn flavonoids on peroxisome proliferator response element pathway[J]. Journal of pharmacological sciences,2006,100(1):51-58.

[2] 李向荣，陈菁菁，刘晓光.桑叶总黄酮对高脂血症动物的降血脂效应[J].中国药学杂志,2009,44(21):1630-1633.

[3] 景怡，景荣琴，任远，等.玉米须总黄酮对高脂血症大鼠血脂及血液流变学指标的影响[J].中国新药杂志,2010,19(9):797-800.

[4] 纪学芳，徐怀德，刘运潮，等.光皮木瓜黄酮和多糖降血脂与抗氧化作用研究[J].中国食品学报，2013,13(9)：1-7.

[5] BAHORUN T, LUXIMON-RAMMA A, CROZIER A, et al. Total phenol,flavonoid, proantho- cyanidin and vitamin C levels and antioxidant activities of Mauritian vegetables[J]. Journal of the Science of Food and Agriculture,2004,84(12):1553-1561.

[6] ENGLER M B, ENGLER M M. The emerging role of flavonoidrich cocoa and chocolate in cardiovascular health and disease[J]. Nutrition Reviews,2006,64(3):109-118.

[7] HU Chun, ZHANG Ying, KITTS D D. Evaluation of antioxidant and prooxidant activities of bambooPhyllostachysnigraVar.Henonisleaf extract in vitro[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry,2000,48:3170-3176.

[8] SESSO H D, GAZIANO J M, LIU S, et al. Flavonoid intake and the risk of cardiovascular disease in women[J]. American Journal of Clinical Nutrition,2003,77(6):1400-1408

[9] 沈健，冯磊.竹叶提取物调节血脂的研究[J].现代康复，1999,3(5):349-351.

[10] 刘连亮，王桐，吴晓琴，等.竹叶黄酮复方片的降脂实验研究[J].食品与药品，2012,14(11):395-398.

[11] 沈健,冯磊.竹叶提取物降低小鼠脂质过氧化、升高GSH-Px和SOD活力的作用研究[J].现代康复，1999，3(3):334-336.

[12] 罗宇倩，郭辉，胡林福,等.竹叶黄酮的抗氧化活性研究[J].食品科技，2011，36(7)：201-203.

[13] LU Bai-yi, WU Xiao-qin, TIE Xiao-wei, et al. Toxicology and safety of anti-oxidant of bamboo leaves. Part 1: acute and sub-chronic toxicity studies on anti-oxidant of bamboo leaves[J]. Food and Chemical Toxicology,2005,43(5):783-792.