青少年狼疮性肾炎中尿NGAL的水平检测及意义

冯 冰, 王 浩, 沈元弟, 王 琥, 王红娣

(解放军第四一一医院 肾内科, 上海, 200081)

青少年系统性红斑狼疮(SLE)是指包括青春期前后的少年时期患病，发病率高，预后差，女性发病率高于男性，在疾病的发生发展中，往往易导致肾功能衰竭[1]。青少年狼疮性肾炎的临床中的诊断方法有很多，如血清肌酐(sCr)、尿微量白蛋白(Albu)、24 h肌酐清除率等，但是这些指标在SLE肾炎的早期诊断敏感性和特异性很低[2]。中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)属脂蛋白超家族成员，是一种分子量较小的分泌性蛋白，正常表达于中性粒细胞、肝细胞、肾小管上皮细胞、血管内皮细胞和平滑肌细胞等[3-5]。研究[6]表明NGAL可以预测不同情况下的早期急性肾损伤，如心脏术后、器官移植、脓毒血症和ICU治疗的病人。尿NGAL目前已被很多研究证实可以作为急性肾损伤早期检测的生物学指标，抗感染治疗后NGAL会出现明显的降低[7]。本研究的目的是为了进一步探讨NGAL在青少年狼疮性肾炎中的临床诊断价值，为青少年狼疮性肾炎的诊疗提供更充分的临床依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2012年3月—2014年3月本院确诊的青少年狼疮性肾炎患者30例为观察组，其中男6例，女24例；年龄9～17岁，平均(12±1.2)岁。所有患者均符合2009年美国风湿病协会对SLE的分类修订标准。所有研究对象的SLE肾炎患者除SLE外未患其他任何疾病。另选取本院同期体检的健康受试者10例为对照组，其中男2例，女8例；年龄10～16岁，平均(11±2.5)岁。

1.2 方法

1.2.1 尿NGAL检测：分别收集2组24 h和48 h清洁中段尿3 mL, 置无致热源及内毒素的试管中以3 000 r/min的速度离心3 min。取上清液1 mL, 置于洁净EP管中。采用散射比浊法分析检测NGAL(检测试剂盒，南京诺尔曼生物技术有限公司生产)。实验步骤和试剂剂量严格按照试剂操作说明书，且每次检测前都进行质控校准。检测正常参考范围为<45 ng/mL。

1.2.2 sCr检测：采集患者清晨空腹静脉血5 mL, 以3 000 r/min的速度离心3 min, 分离血清后，采用苦味酸法检测sCr水平。男性正常参考范围为62～115 μmol/L, 女性正常参考范围为53～97 μmol/L。

1.3 观察指标

对比分析2组24 h和48 h的尿NGAL和sCr水平变化及观察组患者24 h和48 h尿NGAL和sCr水平异常的患者例数。

2 结 果

2.1 2组24 h和48 h检测尿NGAL和sCr水平比较

组间比较显示，观察组24 h和48 h检测尿NGAL和血清sCr水平均显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。组内比较显示，与24 h检测值比较，对照组48 h的尿NGAL和血清sCr水平均无显著变化(P>0.05), 而观察组的尿NGAL和血清sCr水平均有显著升高(P<0.01), 见表1。

表1 2组24 h和48 h检测尿NGAL和血清sCr水平比较

与对照组比较，*P<0.05, **P<0.01; 与24 h比较，##P<0.01。

2.2 观察组患者24、48 h的尿NGAL和sCr水平异常比较

24 h NGAL的检测结果均为异常，而sCr仅10例异常, 48 h再检测时，观察组患者NGAL和sCr均出现异常，且48 h后sCr检测异常者与24 h检测sCr异常者比较，差异有统计学意义(P<0.01)。

3 讨 论

青少年系统性红斑狼疮较成人SLE发病率高，器官受累早，病程进展快，往往导致体内多个脏器的损害，例如皮肤和黏膜、心脏、中枢神经系统、肺脏、肾脏及血液系统等。国内外研究报道显示，SLE早期肾脏病变不仅局限于肾小球，肾小管、间质及血管均存在不同程度的损伤，且病变的发生率极高。肾脏发育的基本特征是间质细胞向上皮细胞转化，这种转变受输尿管芽分泌因子的控制，研究[8]发现输尿管芽分泌因子诱导上皮细胞可形成NGAL。

狼疮性肾炎影响肾单位功能，包括内皮细胞和肾小管细胞[1]。正常生理情况，NGAL在人体内是被完全吸收的，肾损伤除外。细胞因子在狼疮性肾炎的发生发展中发挥重要作用[9]。最新前瞻性研究表明，在心脏手术后的急性肾损伤的早期诊断中, NGAL具有高敏感性和特异性[10]。尿NGAL是一个具有较高潜力的早期预测青少年系统性红斑狼疮疾病活动性的生物学指标，急性肾损伤后能观察到NGAL水平显著提高[12-13]。在慢性肾脏疾病中，NGAL水平也会出现显著上升，与疾病的严重性密切相关[14]。且NGAL在受损的肾小管细胞的修复和重生中可能起到了保护性作用[2]。有研究将尿NGAL和血清NGAL检测结果进行了对比，结果发现尿NGAL更能体现出青少年狼疮性肾炎的诊断意义，并可将尿NGAL作为狼疮性肾炎的预测性生物学分子之一[11]。

NGAL与青少年狼疮性肾炎的发生发展具有一致性[12], 这在本研究中也得到证实。且本研究还表明，NGAL较之于sCr能早期预测青少年狼疮性肾炎肾损害，在青少年狼疮性肾炎中的早期诊断中具有重要的价值。肾脏损伤程度占到整个肾脏的一半以上时，才会引起sCr升高。因此，sCr并不能反映早期、轻度的肾功能下降。但本实验结果表明, NGAL和sCr一样均能反映肾损伤的严重程度，评估肾功能。NGAL和sCr在24 h、48 h的检测结果表明, NGAL和sCr 均能早期预测肾损伤的情况，对临床狼疮性肾炎患者的诊疗具有重要临床意义。本结果对同一患者同时检测尿NGAL和sCr, 其中有18例患者sCr仍在正常范围，而此时尿NGAL水平已经提示肾功能已出现部分损伤。尿NGAL较之于sCr, 能早期预测青少年狼疮性肾炎肾损害。

由于本研究所选取样本量少，尚未进行多中心临床研究, NGAL与青少年系统性红斑狼疮和狼疮性肾炎的相关性还需更多的临床病例加以证实。

[1] Watson L, Beresford M W. Urine biomarkers in juvenile-onset SLE nephritis[J]. Pediatr Nephrol, 2013, 28(3): 363.

[2] Yang C C, Hsieh S C, Li K J. Urinary Neutrophil Gelatinase-Associated Lipocalin Is a Potential Biomarker for Renal Damage in Patients with Systemic Lupus Erythematosus[J]. Journal of Biomedicine and Biotechnology, 2012, 2012: 759313.

[3] 温晓宏, 郑毅, 陈珊珊, 等. 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白单核细胞趋化蛋白-1及肿瘤坏死因子样凋亡的微弱诱导剂在狼疮肾炎中的临床意义[J]. 中华风湿病学杂志, 2013, 17(9): 611.

[4] Qing X, Zavadil J, Crosby M B, et al. Nephritogenic anti-DNA antibodies regulate gene expression in MRL/lpr mouse glomerular mesangial cells[J]. Arthritis Rheum, 2006, 54(7): 2198.

[5] Ishimori M L, Agarwal M, Beigel R, et al. Systemic lupus erythematosus cardiomyopathy-a case series demonstrating a reversible form of left ventricular dysfunction[J]. Echocardiography, 2014, 31(5): 563.

[6] Giasson J, Li G H, Chen Y, Neutrophil Gelatinase-Associated Lipocalin (NGAL) as a New Biomarker for Non-Acute Kidney Injury (AKI) Diseases[J]. Inflammation & Allergy - Drug Targets, 2011, 10(4): 272.

[7] Holzscheiter L, Beck C, Rutz S, et al. NGAL, L-FABP, and KIM-1 in comparison to established markers of renal dysfunction[J]. Clin Chem Lab Med, 2014, 52(4): 537.

[8] Cowland J B, Sorensen O E, Sehested M, et al. Neutrophil gelatinase associated lipocalin is up--regulated in human epithelial cells by IL-1β, but not by TNF-α[J]. J Immunol, 2003, 171(12): 6630.

[9] Adhya Z, Borozdenkova S, Karim M Y. The role of cytokines as biomarkers in systemic lupus erythematosus and lupus nephritis[J]. Nephrol Dial Transplant, 2011, 26(10): 3273.

[10] Hermine H I. Brunner M, Rutherford C, et al. Urinary Neutrophil Gelatinase-Associated Lipocalin as a Biomarker of Nephritis in Childhood-Onset Systemic Lupus Erythematosus[J]. Arthritis & Rheumatism, 2006, 54(8): 2577.

[11] Suzuki M, Wiers M, Klein-Gitelman M S, et al. Neutrophil gelatinase-associated lipocalin as a biomarker of disease activity in pediatric lupus nephritis[J]. Pediatr Nephrol, 2008, 23(3): 403.

[12] Hinze H C, Suzuki M, Klein-Gitelman M, et al. Neutrophil Gelatinase Associated Lipocalin Is a Predictor of the Course of Global and Renal Childhood-Onset Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity[J]. Arthritis & Rheumatism, 2009, 60(9): 2772.

[13] Bolignano D, Lacquaniti A, Coppolino G, et al. Neutrophil gelatinase-associated lipocalin reflects the severity of renal impairment in subjects affected by chronic kidney disease[J]. Kidney Blood Press Res, 2008, 31(4): 255.

[14] Torregrosa I, Montoliu C, Urios A, et al. Urinary KIM-1, NGAL and L-FABP for the diagnosis of AKI in patients with acute coronary syndrome or heart failure undergoing coronary angiography[J]. Heart Vessels, 2014, [Epub ahead of print].