TK1、CA199及CA724联合检测在 结直肠癌中的诊断价值

卢志权+谢一鸣+成光辉+李介华

【摘要】 目的 探讨血清胸苷激酶1（TK1）、糖类抗原199（CA199）、糖类抗原724（CA724）联合检测对结直肠癌诊断的临床应用价值。方法 采用电化学发光法对77例结直肠癌患者、61例结直肠良性病变患者和40例健康体检者的血清CA199、CA724含量进行检测， 采用免疫印迹-增强化学发光法对各组血清TK1含量进行检测。 结果 结直肠癌组的TK1、CA199和CA724水平显著高于结直肠良性病变组患者和正常对照组（P均<0.05）， 结直肠良性病变患者的血清TK1、CA199和CA724水平显著高于正常对照组（P<0.05）。单项检测TK1对结直肠癌诊断的敏感度、 特异度和准确度分别为40.3%、75.4%、55.8%， CA199为44.2%、88.5%、63.8%， CA724为45.5%、77.0%、59.4%；联合检测TK1、CA199和CA724为64.9%、68.9%、65.9%。 结论 TK1、CA199和CA724水平对于结直肠癌的诊断、鉴别诊断具有重要的临床价值， 三者联合检测可提高结直肠癌的检出率。

【关键词】 结直肠肿瘤；胸苷激酶1；糖类抗原199；糖类抗原724；联合检测

Clinical diagnostic value of combined detection of serum TK1， CAl99 and CA724 in colorectal cancer LU Zhi-QUAN， XIE Yi-ming， CEHNG Guang-hui， et al. Department of Clinical Laboratory， Qingyuan Affiliated Hospital of Jinan University， Qingyuan 511518， China

【Abstract】ObjectiveTo investigate diagnostic value of combined detection of TK1， CA199 and CA724 in colorectal cancer. MethodsSerum levels of CAl99 and CA724 in 77 patients with colorectal cancer， 61 patients with benign colorectal diseases and 40 healthy controls were measured by western blotting-enhanced chemiluminescence method， and serum levels of TK1 were measured by enzyme immune chemiluminescence dot-blot assay. ResultsSerum levels of CAl99 and CA724 in patients with colorectal cancer were significantly higher than those in patients with benign colorectal diseases and healthy controls（P<0.05）. And those patients with benign colorectal diseases were significantly higher than those in healthy controls（P<0.05）. The sensitivity， specificity and accuracy of TK1 for the diagnosis of colorectal cancer were 40.3%， 75.4% and 55.8%， respectively； those of CA199 were 44.2%， 88.5% and 63.8%， respectively； CA724 were 45.5%，77.0% and 59.4%， respectively； combined detection of TK1， CA199 and CA724 were 64.9%， 68.9% and 65.9%， respectively. ConclusionThere are certain values of combined detection of TK1， CA199 and CA724 for the diagnosis of colorectal cancer， combined detection of TK1， CA199 and CA724 were helpful to increase the detection rate of colorectal cancer.

【Key words】Colorectal neoplasms； Serum thymidine kinase 1； Carbohydrate antigen 199； Carbohydrate antigen 724； Combined detection结直肠癌（colorectal cancer， CRC）是常见的消化道恶性肿瘤， 在全球范围内为男性第3位、女性第2位高发性恶性肿瘤， 每年新发约120万例， 死亡约60万例， 其进展与疾病的诊断时机和分期相关[1， 2]。在我国， 结直肠癌发病率呈逐年升高趋势， 预计我国结直肠癌新发病例仍将逐年增多[3]。临床早发现、早诊断、早治疗对提高患者生存质量和生存率具有重要意义。目前， 临床上结直肠癌的诊断主要依赖内窥镜活检， 但由于该技术难度、操作复杂性及患者痛苦性相对较大。因此， 如何发现或整合一些能够早期发现和诊断结直肠癌的血液学指标已经成为全世界共同研究的课题。本研究对77例结直肠癌患者的血清TK1、CA199和CA724进行了检测分析， 旨在了解三项指标联合检测对结直肠癌的敏感性、特异性及早期诊断的价值。endprint

1 资料与方法

1. 1 一般资料 2012年7月～2013年9月本院收治的结直肠癌患者77例， 男43例， 女34例， 年龄38～88岁， 平均年龄62.3岁， 诊断标准依据卫生部主编的中国常见恶性肿瘤诊治规范[4]；结直肠良性病变患者61例， 其中男34例， 女27例， 年龄28～66岁， 平均年龄42.3岁。结直肠良性病变包括结直肠息肉、急性结肠炎、溃疡性结肠炎、慢性结直肠炎等疾病， 上述全部病例的诊断均经过临床、内镜及病理学证实；选择同期来本院体检中心健康体检人群40例， 其中男23例， 女17例， 年龄27～66岁， 平均年龄42.1岁， 该组人群经检查无心、肝、肾、肺等重要器官疾病， 无传染性疾病、炎性病变及贫血等， 无肿瘤家族史。

1. 2 标本采集 TK1、CA199、CA724测定采用血清标本， 于清晨空腹采静脉血3 ml， 3 h内以3800 r/min离心8 min， 分离血清， 标本要求无溶血、脂血， CA199、CA724当天检测， TK1标本-20℃保存， 在1周内完成检测。

1. 3 仪器、试剂与方法 TK1 采用免疫印迹增强化学发光法检测， 试剂盒及CIS 化学发光数字成像分析仪由深圳华瑞同康生物技术有限公司提供， 按说明书操作。CA199、CA724采用电化学发光法， 仪器为罗氏E170电化学发光仪， 试剂为其配套试剂。

1. 4 阳性值判断标准 TK1>2.0 pmol/L、CA19-9>27.00 ng/ml、CA724>6.90 ng/ml。

1. 5 统计学方法 采用SPSS 17.0软件进行统计分析， 检测数据以均数±标准差（ x-±s）表示， 样本间均数比较采用t检验；计数资料采用χ2检验。P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2. 1 三组人群的血清TK1、CA199、CA724水平比较 结直肠癌患者血清TK1、CA199、CA724含量明显高于结直肠良性病变组和正常对照组的水平， 结直肠良性病变组的血清TK1、CA199、CA724含量明显高于正常对照组的水平， 两两组间比较， 差异均有统计学意义（P<0.05）， 检测结果见表1。

2. 2 血清TK1、CA199、CA724单项与联合检测对结直肠癌诊断的敏感度、特异度和准确度比较 CA724单项检测对结直肠癌诊断的敏感度高于TK1和CA199， 单项检测CA199对结直肠癌诊断的特异度高于TK1和CA724， 联合检测TK1、CA199、CA724对结直肠癌诊断的敏感度和准确度均能提高， 见表2。

3 讨论

在结直肠癌发生发展的早期， 由于病变隐匿， 病情难以发现， 即使应用影像学等技术检测仍难以取得阳性结果。近年来， 血清肿瘤标志物检测由于其高效、 无创的特点， 在辅助诊断结直肠癌、评估病情等方面有着重要的作用， 在临床中得到广泛应用。因此， 利用肿瘤标志物的联合检测来提高诊断肿瘤的敏感性和特异性在临床中的应用渐广。联检多种肿瘤标志物是提高大肠癌诊断准确率的一种方法[5]。

胸苷激酶是嘧啶合成的补救酶， 是催化胸腺嘧啶核苷转为单磷酸胸腺嘧啶的关键酶， 这种磷酸化作用是胸腺嘧啶核苷进入DNA代谢的唯一途径[6]。TK1在细胞周期的G1早中期水平低， 当细胞周期进入G1晚期， TK1开始持续升高， 在细胞周期S晚期G2期达到高峰， 但在静止细胞中不会发生这种情况。TK1与细胞增殖生长密切相关， 可作为一种细胞增殖标志物来检测细胞的增殖活性， 也可作为一种有效的肿瘤标志物来检测恶性肿瘤的增殖度及评估预后[7， 8]。CA199结直肠细胞产生的蛋白质， 这种抗体可在消化道恶性肿瘤与胰腺癌中有明显高水平表达， 但也存在正常组织中如胰腺、胆囊等黏膜检测表达水平呈现较高趋势， 是消化道恶性肿瘤检测的良好指标[9， 10]。CA724是一种黏蛋白样肿瘤相关糖蛋白， 其水平与肿瘤大小、分期及转移有关， 是胃肠道和卵巢肿瘤的标志物[11]。

本实验表1结果显示：结直肠癌患者的血清TK1、CA199、CA724水平明显高于结直肠良性疾病患者和正常对照人群的血清含量， 差异有统计学意义（均P<0.05）， 说明TK1、CA199、CA724都可作为结直肠癌诊断的肿瘤标志物。表1也显示了结直肠良性病变患者组的血清TK1、CA199、CA724水平明显高于健康体检人群的血清含量， 差异有统计学意义（P<0.05）， 提示血清TK1、CA199、CA724浓度升高发出的信号， 可为结直肠癌病变患者的早期诊断提供可靠的依据。

肿瘤标志物各有其生物学特性和病理学基础， 其血清水平能从不同角度反映肿瘤的变化， 所以联合检测多种标志物可弥补单项检测的不足， 有助于提高诊断的敏感度和特异度[12]。从本实验表2结果可知TK1、CA199、CA724单项检测在结直肠癌中的敏感性均在50%以下， 但三项联合检测敏感性达到64.9%；同时特异性也有68.9%， 准确性达65.9%， 三者联合检测可以优势互补， 提高结直肠癌的检出率， 对结直肠癌的辅助诊断、疗效监测及预后判断等有重要的临床价值。

参考文献

[1] Jemnl A， Center MM， DeSantis C， et al. Global patterns of cancer Incidence and mortalily rates and trends. Cancer Epidemiol BiomarkersPrey， 2010， 19（8）：1893-1907.

[2] Cappellani A， Di Vita M， Zanghi A， et al. Biological and clinical markers in colorectal cancer： state of the art. Front Biosci（Schol Ed）， 2010， 1（2）：422-431.endprint

[3] 代珍， 郑荣寿， 邹小农， 等.中国结直肠癌发病趋势分析和预测.中华预防医学杂志， 2012， 46（7）：598-603.

[4] 中华人民共和国卫生部医政司.中国常见恶性肿瘤诊治规范2010版.北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社， 2010：187-188.

[5] 王影， 梁欢.血清CEA、CA199、CA242联检在大肠癌诊断中的临床应用.中国卫生检验杂志， 2008， 18（7）：1395-1360.

[6 ] 郭林， 卢仁泉.胃癌患者血清胸苷激酶检测的临床意义.检验医学， 2008， 23（3）：271-273.

[7] Von Euler H， Einarsson R， Olsson U， et a1. Serum thymidine ki-nase activity in dogs with m alignant lymphoma， a potent marker for prog-nosis and monitoring the disease.J Vet Int Me， 2004， 18（5）：696-702.

[8] Ohrvik A， Lindh M， Einarsson R， et a1. Sensitive nonradiometric method for determining thymidine kinase l activity. Clin Chem， 2004， 50（9）：1597-1606.

[9] Grothey A， A comparison of XELOX with FOLFOX-4 as firstline treatment for metastatic colorectal cancer. Nat Clin Pract Oncol， 2009， 6（1）：10-11.

[10] 庄珊珊， 陈炯玉， 方裕森， 等.血清CA199与CEA检测对结直肠癌的诊断价值.现代肿瘤学， 2010， 18（7）：1395-1396.

[11] 徐炜， 卢敏， 韩峰， 等.血清CA199、CA125、CA724、CEA联合检测诊断胃癌的价值.山东医药， 2009， 49（19）：78.

[12] 胡晓爱， 曹广斌， 王卫.血清肿瘤标志CEA和CA724联合检测在结直肠癌诊断中的应用 .中国实用医药， 2011， 14（6）：54-55.

[收稿日期：2014-03-12]endprint

[3] 代珍， 郑荣寿， 邹小农， 等.中国结直肠癌发病趋势分析和预测.中华预防医学杂志， 2012， 46（7）：598-603.

[4] 中华人民共和国卫生部医政司.中国常见恶性肿瘤诊治规范2010版.北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社， 2010：187-188.

[5] 王影， 梁欢.血清CEA、CA199、CA242联检在大肠癌诊断中的临床应用.中国卫生检验杂志， 2008， 18（7）：1395-1360.

[6 ] 郭林， 卢仁泉.胃癌患者血清胸苷激酶检测的临床意义.检验医学， 2008， 23（3）：271-273.

[7] Von Euler H， Einarsson R， Olsson U， et a1. Serum thymidine ki-nase activity in dogs with m alignant lymphoma， a potent marker for prog-nosis and monitoring the disease.J Vet Int Me， 2004， 18（5）：696-702.

[8] Ohrvik A， Lindh M， Einarsson R， et a1. Sensitive nonradiometric method for determining thymidine kinase l activity. Clin Chem， 2004， 50（9）：1597-1606.

[9] Grothey A， A comparison of XELOX with FOLFOX-4 as firstline treatment for metastatic colorectal cancer. Nat Clin Pract Oncol， 2009， 6（1）：10-11.

[10] 庄珊珊， 陈炯玉， 方裕森， 等.血清CA199与CEA检测对结直肠癌的诊断价值.现代肿瘤学， 2010， 18（7）：1395-1396.

[11] 徐炜， 卢敏， 韩峰， 等.血清CA199、CA125、CA724、CEA联合检测诊断胃癌的价值.山东医药， 2009， 49（19）：78.

[12] 胡晓爱， 曹广斌， 王卫.血清肿瘤标志CEA和CA724联合检测在结直肠癌诊断中的应用 .中国实用医药， 2011， 14（6）：54-55.

[收稿日期：2014-03-12]endprint

[3] 代珍， 郑荣寿， 邹小农， 等.中国结直肠癌发病趋势分析和预测.中华预防医学杂志， 2012， 46（7）：598-603.

[4] 中华人民共和国卫生部医政司.中国常见恶性肿瘤诊治规范2010版.北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社， 2010：187-188.

[5] 王影， 梁欢.血清CEA、CA199、CA242联检在大肠癌诊断中的临床应用.中国卫生检验杂志， 2008， 18（7）：1395-1360.

[6 ] 郭林， 卢仁泉.胃癌患者血清胸苷激酶检测的临床意义.检验医学， 2008， 23（3）：271-273.

[7] Von Euler H， Einarsson R， Olsson U， et a1. Serum thymidine ki-nase activity in dogs with m alignant lymphoma， a potent marker for prog-nosis and monitoring the disease.J Vet Int Me， 2004， 18（5）：696-702.

[8] Ohrvik A， Lindh M， Einarsson R， et a1. Sensitive nonradiometric method for determining thymidine kinase l activity. Clin Chem， 2004， 50（9）：1597-1606.

[9] Grothey A， A comparison of XELOX with FOLFOX-4 as firstline treatment for metastatic colorectal cancer. Nat Clin Pract Oncol， 2009， 6（1）：10-11.

[10] 庄珊珊， 陈炯玉， 方裕森， 等.血清CA199与CEA检测对结直肠癌的诊断价值.现代肿瘤学， 2010， 18（7）：1395-1396.

[11] 徐炜， 卢敏， 韩峰， 等.血清CA199、CA125、CA724、CEA联合检测诊断胃癌的价值.山东医药， 2009， 49（19）：78.

[12] 胡晓爱， 曹广斌， 王卫.血清肿瘤标志CEA和CA724联合检测在结直肠癌诊断中的应用 .中国实用医药， 2011， 14（6）：54-55.

[收稿日期：2014-03-12]endprint