蝙蝠葛碱对阿尔茨海默病小鼠海马组织Aβ水平的影响

费洪新等

摘 要：目的：研究中药提纯成分蝙蝠葛碱对阿尔茨海默病小鼠海马组织Aβ水平的影响。方法：阿尔茨海默病小鼠随机分成对照组、模型组、治疗组、蝙蝠葛碱组。给予蝙蝠葛碱灌胃，观察小鼠Aβ的变化。结果：与模型组比较后，蝙蝠葛碱组Aβ水平明显降低。结论：蝙蝠葛碱能降低Aβ水平，对阿尔茨海默病小鼠具有一定的海马组织保护作用。

关键词：蝙蝠葛碱；阿尔茨海默病；小鼠

蝙蝠葛碱（Dauricine，DAU）是祖国医药北豆根植物的提纯有效成分单体，具有广泛的药理作用，包括抗氧化作用[1]、脑缺血保护作用[2-3]等。基于此实验开展DAU对脑部疾病阿尔茨海默病（Alzheimer's disease，AD）海马组织密切相关的因子、淀粉样斑块核心成分、即β-淀粉样蛋白（Amyloid beda，Aβ）[4]的研究，研究DAU对AD小鼠Aβ的影响作用。

1 实验材料

1.1 实验动物

3月龄标准体重APP/PS1双转基因小鼠和同月龄、同背景C57小鼠，常温、常湿、自由摄取食物，饲养在黑龙江中医药大学实验动物中心。

1.2 药物

西药阳性对照吡拉西坦购于湖南迪诺制药有限公司（批号130325）；DAU购于MUST公司，批号MUST-13010313，纯度为98.66%；Aβ酶联免疫试剂盒（批号20140401），南京建成生物工程研究所生产。

2 方法

2.1 分组

AD小鼠共18只，随机分为3组，其中模型组6只、治疗组6只、DAU组6只；另设定对照组6只。

2.2 给药

实验动物对照组小鼠6只给予生理盐水灌胃；模型组6只给予生理盐水灌胃；治疗组6只给予吡拉西坦（0.62gokg-1·d-1）灌胃；DAU组6只给予DAU（20mgokg-1·d-1）灌胃，灌胃时间为2周。

2.3 Aβ检测

小鼠断头、取海马组织、匀浆、静置、离心、分装、-20℃低温保存备用。按Aβ酶联免疫试剂盒说明书操作进行，450nm波长处测定各孔OD值，记录并且分析数据。

2.4 统计学分析

实验采用SPSS19.0软件分析处理，单因素方差分析实验的原始数据。

3 结果

3.1 动物海马组织Aβ的检测

DAU对AD小鼠海马Aβ影响的结果采用x±s表示，单位pg/ml。实验中与对照组（260.6825±40.3829）比较的过程中，模型组小鼠海马组织Aβ的含量（410.0873±36.4436）较高（P<0.05），说明模型建立成功，模型稳定；经过治疗后与模型组比较，治疗组（280.7222±44.0904）、DAU组（310.6429±29.8401）小鼠海马组织Aβ的含量较低（P<0.05），说明DAU对AD小鼠的AD症状显著改善，提示DAU对AD的治疗效果较好；治疗组（280.7222±44.0904）与DAU组（310.6429±29.8401）比较，小鼠海马组织Aβ的含量相当（P>0.05），差异无统计学意义，说明西药吡拉西坦与中药的提纯成分DAU二者比较无显著差异。

4 讨论

AD是一种进行性脑组织功能减退的、脑组织迅速老化的神经系统疾病，表现为患者记忆力的下降，认知能力的下降，在老年人的人群中高发，其主要的病理改变在脑组织老年斑的沉积，在老年斑中的核心成分主要是Aβ的沉积、神经元数量的减少、神经原纤维缠结进而形成老年斑[5]。人的年龄在不断增长，老化大脑出现神经元数目减少的区域主要集中在海马、皮质等区域[6]。

实验主要对AD密切相关的因子、AD发病中心环节、老年斑的核心成分Aβ进行了检测。实验结果显示，实验中与对照组比较的过程中，模型组小鼠海马组织Aβ的含量（410.0873±36.4436）较高（P<0.05），说明模型建立成功，模型稳定；经过治疗后与模型组比较，治疗组、DAU组小鼠海马组织Aβ的含量较低（P<0.05），说明DAU对改善AD小鼠的AD症状显著，提示DAU对AD治疗效果较好；治疗组与DAU组比较，小鼠海马组织Aβ的含量相当（P>0.05），说明西药吡拉西坦与中药的提纯成分DAU二者比较无显著差异。

综上所述，DAU可以降低Aβ的水平，减轻AD患者的临床症状，从而保护AD小鼠的海马组织结构，延缓机体的老化，延长人们的寿命。

参考文献

[1]何丽娅，李立中，吴基良.蝙蝠葛碱的抗氧化实验研究[J].中草药，1997，28（8）：479-481.

[2]李艳红，黄向江，卢浩浩.蝙蝠葛碱对大鼠局灶性脑缺血及线粒体氧化损伤的保护作用[J].华中科技大学学报（医学版），2005，34（3）：270-273.

[3]李艳红，龚培力.蝙蝠葛碱对实验小鼠脑缺血的保护作用[J].中国药理学通报，2004，20（5）：564-567.

[4]Wu Y L，Xin X J，Xin X L，et al.Research progress about the regulation of GXXXG structures in the Alzheimer-related protein[J].Chin Pharmacol Bull，2011，27（1）：1-4.

[5]Mohandas E，Rajmohan V，Raghunath B.Neurobiology of Alzheimer's disease[J].Indian Journal of Psychiatry.2009，51（1）：55-61.

[6]Rossi L，Mazzitelli S，Arciello M，et al.Benefits from dietary polyphenols for brain aging and Alzheimer's disease[J].Neurochem Res，2008，33（12）：2390-2400.

作者簡介：费洪新（1978-），男，黑龙江佳木斯人，在读博士，讲师，从事痴呆、痛风、肿瘤研究。

通讯作者：周忠光（1957-），男，黑龙江哈尔滨人，博士，教授，博导，从事痴呆、痛风、肿瘤研究。