解聚素-金属蛋白酶19水平与神经胶质瘤诊断及预后的相关性

王 辉 张梅美 陈春辉 张旺明

解聚素-金属蛋白酶19水平与神经胶质瘤诊断及预后的相关性

王 辉 张梅美 陈春辉 张旺明

目的 探讨解聚素-金属蛋白酶19水平与神经胶质瘤诊断、预后的相关性。方法 收集初诊为原发神经胶质瘤的患者49例，回顾性分析胶质瘤ADAM-19的表达与临床因素的相关性，并结合远期随访结果对胶质瘤ADAM-19的表达水平与生存时间进行比较。结果 ADAM19的相对表达率在各组间的表达从小到大排列为对照组(0.57±0.13)<胶质瘤Ⅰ～Ⅱ级(1.24±0.46)<胶质瘤Ⅲ～Ⅳ级(3.78±0.85)。胶质瘤分型Ⅰ～Ⅱ组，ADAM-19低表达人数及所占比例明显高于高表达人数及比例(17/20 vs 3/20)；相反的趋势可见于WHO分型Ⅲ～Ⅳ组(6/29 vs 23/29)。ADAM-19高表达组的平均生存时间为(28.44±2.41)个月，明显低于低表达组(43.58±4.27)个月，P<0.05。结论 胶质瘤ADAM-19的表达与预后、WHO分级相关。

胶质瘤；ADAM19；临床因素；预后

(ThePracticalJournalofCancer,2014,29:1529～1531)

胶质瘤是神经系统最常见的肿瘤，临床上70%的恶性脑肿瘤为胶质瘤[1]，具有预后差(5年生存率仅25%),高侵袭性及过度增殖的特点[2]。因此，找到影响胶质瘤发生发展的关键基因并以之作为靶点抑制肿瘤增殖、分化、甚至逆转其病理生理过程已成为目前的研究热点[3]。解聚素-金属蛋白酶19(ADAM19)是解聚素-金属蛋白酶家族成员之一，在多种肿瘤中高表达并与肿瘤的恶性程度相关[4]。Wildeboer等[5]证实ADAM19在原发性脑肿瘤中高表达，且其表达水平及活性与肿瘤的侵袭性相关。因此，本研究收集我院及珠江医院初诊为胶质瘤的患者49例，以外伤性脑损伤患者为对照组，采用免疫印迹法检测胶质瘤患者ADAM19的表达，并分析其与胶质瘤的诊断及预后的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集我院及珠江医院2009年3月-2014年3月初诊为原发神经胶质瘤的患者49例，其中男性30例，女性19例，中位年龄47岁(11～79岁)；位于额叶14例，颞叶19例，其他区域16例。所有患者均行开颅肿瘤次全切术，且术前未接受放疗。术后，所有患者均接受放化疗。放疗方案如下：60 Gy/月，分次放射，1.8～2.0 Gy/次。化疗方案如下：口服蒂清(替莫唑胺胶囊)，每1个治疗周期为28天，在治疗周期内连续服用5天，首次用药剂量需根据患者身高、体重直接读取150 mg/m2所对应的剂量。第2个周期和2个周期以上用药剂量根据周期内的第22天所测血像确定下一周期的治疗剂量。(ANC<1.0×109/L，PLT<50×109/L，剂量为100 mg/m2；1.0×109/L80分，19例患者<80分。根据2007年WHO中枢神经系统肿瘤分级：Ⅰ～Ⅱ级20例，Ⅲ～Ⅳ级29例。病理类型：6例Ⅰ级的患者均为毛细胞性星形细胞瘤；14例Ⅱ级患者中，12例为弥散性星形细胞瘤，2例为少突胶质细胞瘤。Ⅲ级患者17例，均为多形性成胶质细胞瘤；Ⅳ级患者12例，均为多形性恶性胶质瘤。对照组10例，均为外伤性颅脑损伤患者，且所有对照组患者均通过组织病理学排除脑恶性肿瘤的可能。将术中所取脑组织标本迅速冻存至-80 ℃冰箱内，用以Western-blot检测。所有患者均进行随访，随访时间为6～60个月，中位随访时间为27个月。终末时间点设定为患者死亡。

1.2 方法

计量资料(Western-Blot)武汉华美生物工程有限公司CUSABIO®完成，实验方法参照既往文献[5]。

1.3 统计学方法

计量资料(Wstern-Blot)以均数±标准差的形式表示，采用One-Way ANOVA单因素方差分析进行比较。组内比较根据方差齐性采用LSD法或Games-Howell法进行比较。计数资料采用非参数检验的Chi-Square检测进行评估。采用Kaplan-Merier曲线对生存率进行分析。统计学软件为SPSS 13.00。

2 结果

2.1 Western-blot结果

ADAM19在胶质瘤不同WHO等级脑组织、对照组中的表达差异具有明显统计学意义(F=15.773,P=0.021)。组间多重比较可知：ADAM19的相对表达率在各组间的表达从小到大排列为对照组(0.57±0.13)

2.2 ADAM19与临床因素的相关分析

性别、年龄、肿瘤分布、KPS积分与ADAM19表达无明显相关性；而WHO肿瘤分级与ADAM19表达明显相关(P<0.05)。见表1。

2.3 生存分析

ADAM19高表达组的平均生存时间(28.44±2.41月，95%CI:23.72-33.18)明显低于低表达组(43.58±4.27月，95%CI:35.22-51.94),P=0.038。见图2。

1A为adam19蛋白表达电泳图，1B为两者的相对表达率。

图1 不同分组间ADAM19相对表达率的变化趋势表1 ADAM19与临床因素的相关性分析

图2 不同ADAM19表达水平与总生存率的生存分析

3 讨论

胶质瘤是临床最常见的神经系统恶性肿瘤，其侵袭性强，预后差，对现有治疗手段不敏感[6]。因此，在此背景下，临床迫切需要一种灵敏的分子标志物用以监测疗效、判断预后并据此进行个体化治疗[7]。然而，由于胶质瘤的发病、发生发展的潜在分子机制尚未明确，因此，目前对于胶质瘤的治疗亦无法做到个体化，从而导致患者间疗效差异极大。

解聚素-金属蛋白酶19(ADAM19)是解聚素-金属蛋白酶家族成员之一，在多种肿瘤中高表达，并与肿瘤的恶性程度相关[8]。既往研究证实ADAM19在肺癌、绒毛膜癌、卵巢癌中均有显著升高，并与临床疗效、预后相关[9]。然而，尽管体外实验已证实ADAM19可调控胶质瘤细胞株的分化、增殖、浸润等，但尚无临床数据对其与胶质瘤患者分级、预后的相关性进行深入探讨[10]。本研究结果证实：ADAM19在胶质瘤患者脑组织中的表达明显高于对照组，且与WHO分级相关，即WHO分级越高，胶质瘤ADAM19的表达越高。此外，通过长期随访可知：胶质瘤ADAM19高表达者的预后较低表达者差，而既往研究亦已证实WHO分级与预后明显相关。因此，该结果与之前的研究类似。

尽管胶质瘤的发生发展机制复杂，涉及多靶点、多基因及各种因素综合作用，但ADAM家族在胶质瘤发病中的重要性日趋凸显。其中，ADAM8，17，10均已得到证实，其在胶质瘤患者中的表达明显升高[10]，并由此引发一系列的病理生理过程，从而调控肿瘤增殖、侵袭。因此，本研究的临床意义在于临床医师可根据胶质瘤的ADAM的表达进行远期预测，从而制定更为有效的治疗方案。此外，ADAM家族或可称为日后治疗胶质瘤的有效靶点，从而提高和改善胶质瘤的治疗现状。

[1] Mercer RW,Tyler MA,Ulasov IV,et al.Targeted therapies for malignant glioma: progress and potential〔J〕.Biodrugs,2009,23(1):25-35.

[2] OrtegaAznar A,JimenezLeon P,Martinez E,et al.Clinicopathological and molecular aspects of diagnostic and prognostic value in gliomas〔J〕.Rev Neurol,2013,56(3):161-170.

[3] Ni SS,Zhang J,Zhao WL,et al.ADAM17 is overexpressed in nonsmall cell lung cancer and its expression correlates with poor patient survival〔J〕.Tumour Biol,2013,34(3):1813-1818.

[4] Kanda K,Komekado H,Sawabu T,et al.Nardilysin and A- DAM proteases promote gastric cancer cell growth by activating intrinsic cytokine signalling via enhanced ectodomain shedding of TNFα〔J〕.EMBO Mol Med,2012,4(5):396-411.

[5] Wildeboer D,Naus S,Amy Sang QX,et al.Metalloproteinase disintegrins ADAM8 and ADAM19 are highly regulated in human primary brain tumors and their expression levels and activities are associated with invasiveness〔J〕.J Neuropathol Exp Neurol，2006，65(5):516-527.

[6] McGowan PM,Ryan BM,Hill AD,et al.ADAM17 expression in breast cancer correlates with variables of tumor progression〔J〕.Clin Cancer Res,2007,13(8):2335-2343.

[7] Kornfeld JW,Meder S,Wohlberg M,et al.Overexpression of TACE and TIMP3 mRNA in head and neck cancer: association with tumour development and progression〔J〕.Br J Cancer,2011,104(1):138-145.

[8] Slaby O,Sachlova M,Brezkova V,et al.Identification of microRNAs regulated by isothiocyanates and association of polymorphisms inside their target sites with risk of sporadic colorectal cancer〔J〕.Nutr Cancer，2013，65(2):247-254.

[9] Chan MW,Huang YW,Hartman-Frey C,et al.Aberrant tr- ansforming growth factor beta1 signaling and SMAD4 nuclear translocation confer epigenetic repression of ADAM19 in ovarian cancer〔J〕.Neoplasia，2008，10(9):908-919.

[10] Chesneau V,Becherer JD,Zheng Y,et al.Catalytic properties of ADAM19〔J〕.J Biol Chem，2003，278(25):22331-22340.

(编辑：甘 艳)

Relationship between ADAM19 and the Prognosis and Diagnosis of Glioma

WANGHui,ZHANGMeimei,CHENChunhui,etal.

XiangyaPingkuanCooperationHospital,Pingxiang,337000

Objective To evaluate the association between ADAM19 and the prognosis and diagnosis of glioma.Methods 49 patients with glioma were collected.The association between the expression of ADAM19 in glioma and clinical factors were retrospectively analyzed.The expression of ADAM19 and survival were compared during follow up.Results The expression of ADAM19 showed the highest level in WHO Ⅲ～Ⅳ class compared with those of the control group and WHOⅠ～Ⅱ class.In addition,patients with low expression of ADAM19 showed more percentage in WHO Ⅰ～Ⅱ class than those of WHO Ⅲ～Ⅳ Class,a reverse trend could be observed in WHO Ⅲ～Ⅳ class.Mean survival time of patients with high ADAM19 expression was (28.44±2.41)months,which was significantly less than that of low ADAM19 expression (43.58±4.27)months,P<0.05. Conclusion ADAM19 expression in glioma is correlated with prognosis and WHO class.

Glioma;ADAM19;Clinical factors;Prognosis

337000 江西省萍乡市湘雅萍矿合作医院(王 辉，张梅美，陈春辉)；510280 南方医科大学珠江医院(张旺明)

10.3969/j.issn.1001-5930.2014.12.006

R73-36

A

1001-5930(2014)12-1529-03

2014-11-12

2014-11-21)