野菊花提取物耐缺氧能力实验研究

魏昌玲

野菊花提取物耐缺氧能力实验研究

魏昌玲

野菊花；耐缺氧；心肌缺氧；小鼠

野菊花为双子叶植物，在我国大部分地区广泛分布，主要化学成分有萜类、挥发油和野菊花黄酮类[1]。具有疏风、清热、明目、解毒的功效，主要治疗头痛、眩晕、目赤、心胸烦热、疗疮、肿毒等症[2]。近代研究表明，野菊花有抗病原微生物、保护心肌、降血压、抗氧化等药理作用[3]。为进一步了解野菊花的药理作用，本文对野菊花的耐缺氧能力进行了初步研究。

1 材料与试剂

1.1 动物 昆明种小鼠，雌雄各半，体重18～22 g，由泰邦科技生物有限公司提供，动物合格证号：20030011。

1.2 药品 野菊花由济宁邦尔中药饮品有限公司（批号：20130321）；盐酸异丙肾上腺素（iso）由上海禾丰制药有限公司提供（批号为：5E20010）。

1.3 仪器 动物耐缺氧与耗氧量动态变化同步测定装置、电子天平、秒表。

2 方法

2.1 野菊花提取物制备 称取野菊花300 g加适量水浸泡6 h，煎煮40 min，过滤，去滤渣，再次加适量水，煎煮40 min过滤，合并两次滤液浓缩至折合生药1.0 g/ml，4 ℃低温保存备用。

2.2 耗氧量的测定 将受试小鼠放入耗氧量测定装置内，调整液面高度至定量管0刻度，关闭通气管，使装置密闭，立刻记录实验开始时间，每隔5 min记录一次定量内液面上升高度，作为小鼠的累积耗氧量，连续观察30 min，并记录从装置密闭至小鼠呼吸停止的时间为小鼠的缺氧存活时间[4]。

2.3 常压耐缺氧实验

2.3.1 动物分组及给药 将小鼠禁食16 h后按体重随机分为四组，分别为对照组给予0.9%氯化钠注射液（30 ml/kg），野菊花提取液小剂量组（5.0 g/kg）、中剂量组（12.5 g/kg）、大剂量组（25.0 g/kg），每组10只，雌雄各半。各药物组灌胃给药，容量为0.2 ml/10g，每天给药1次，连续3 d[6]。

2.3.2 方法 最后一次灌胃40 min后，照上述方法测定耗氧量。记录开始时间，密切观察小鼠的反应。并记录5、10、15、20、30 min时液面上升的高度，作为小鼠的累计耗氧量；小鼠死亡时液面上升的高度即为存活期总耗氧量；记录小鼠从装置密闭至呼吸停止的时间，即为小鼠缺氧存活时间；用不同时间的累计耗氧量减掉前一次的累计耗氧量，即为各时间段的耗氧量。

2.4 减压耐缺氧实验 照上述方法分组与给药，最后一次给药40 min后，四组小鼠均腹腔注射盐酸异丙肾上腺素（ISO）20 ml/kg，10 min后，放进缺氧装置中，记录5、10、15、20、30 min时液面上升高度和小鼠死亡时间，以及死亡时液面上升高度[7]。

2.5 小鼠急性脑缺血及失血性休克实验 照上述方法分组与给药，最后一次灌胃40 min后，在小鼠耳后部迅速断头，造成脑部急性缺血，在断头后的同时，观察小鼠张口呼吸次数，并记下呼吸停止时间。小鼠断头后，同时迅速剖开小鼠的胸部，暴露心脏，以心室停跳为指标，观察小鼠心脏搏动时间。

2.6 统计学方法 采用SPSS 19.0统计软件进行分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

3 结果

3.1 野菊花提取物对正常小鼠存活时间及耗氧量的影响 野菊花提取物中、大剂量组均可延长小鼠存活时间，降低前20 min的累计耗氧量；大剂量组野菊花水提液明显降低前10 min的耗氧量；并且耐缺氧程度与野菊花提取物有剂量成正相关，差异有统计学意义（P＜0.05），见图1～4。

3.2 对异丙肾上腺素致心肌耗氧增加小鼠耐缺氧能力的影响 对异丙肾上腺素致心肌耗氧增加的小鼠，中、大剂量组野菊花提取物能明显增加小鼠的耐缺氧能力，降低前5 min的耗氧量，提高小鼠的存活时间，并且小鼠的耐缺氧程度与野菊花水提液剂量成正相关，差异有统计学意义（P＜0.05），见图5～7。

3.3 对脑缺血小鼠耐缺氧能力的影响 对脑缺氧小鼠，野菊花中、大剂量组与对照组比较，能明显增加小鼠的呼吸次数、呼吸时间、心搏时间，并且耐缺氧程度与野菊花提取物浓度成正相关，有统计学意义（P＜0.05）。

图1 野菊花对四组小鼠死亡时累计耗氧量的影响

图2 野菊花对四组小鼠死亡时累计耗氧量与存活时间的影响

图3 野菊花对四组小鼠各时间段耗氧量的影响

图4 野菊花对ISO致心肌耗氧量增加四组小鼠的累计耗氧量的影响

图5 野菊花对ISO致心肌耗氧量增加四组小鼠死亡累计耗氧量、存活时间的影响

图6 野菊花对ISO致心肌耗氧量增加四组小鼠各时间段耗氧量的影响

图7 野菊花对急性脑缺血性缺氧四组小鼠的影响

4 讨论

缺氧对机体是一种紧张性刺激，影响机体各种代谢，特别是影响机体的氧化供能，最终会导致心、脑等主要器官缺氧供能不足而死亡。由于吸入气体中氧分压低而引起缺氧，从而使动脉血氧分压下降，以致于动脉血氧含量减少，最终导致机体死亡[5]。

对于正常小鼠，耗氧量测定结果表明，野菊花水提物有增强耐缺氧作用可能主要与减少单位时间内的耗氧量有关，但野菊花水提物提高小鼠的耐缺氧能力具有剂量依赖性。对于异丙肾上腺 素致心肌耗氧量增加小鼠的耗氧量测定结果表明，在心肌耗氧情况下，更高浓度的野菊花水提物的耐缺氧能力更加明显。灌胃12.5 g/kg、25.0 g/kg剂量可显降低耗氧量并延长小鼠存活时间。对于脑缺氧的小鼠，灌胃12.5 g/kg、25.0 g/kg的中、大剂量组能明显增加小鼠的呼吸时间、呼吸次数，延长心搏时间。

本实验证明，野菊花提取物有增强小鼠耐缺氧能力的作用，为野菊花药物资源的进一步开发利用提供了实验依据。不过野菊花增强耐缺氧能力的作用机制有待于进一步研究。

[1] 中华人民共和国卫生部药典委员会编.中华人民共和国药典[M].北京:化学上业出版社,2010:120-120.

[2] 吴钉红,杨立伟,苏薇薇.野菊花化学成分及药理研究进展[J].中药材,2009,27(2):142-144.

[3] 陈传千,沈艳平,屈跃丹,等.野菊花提取物药理作用的研究进展[J].吉林医药学院院报,2010,3(31):175-176.

[4] 孔燕芳,周艳梅,闫艳仓,等.正交试验优选野菊花中总黄酮的提取工艺[J].中国药房,2013,24(43):4068-4069.

[5] 马艳,汪宇,康万军,等.蛹虫草口服液对小鼠耐缺氧和抗疲劳作用[J].中国药师,2012,12(10):1376-1377.

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1673-5846(2014)07-0228-02

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