包埋技术在超声波提取乌饭树叶工艺中的应用

梁红昌，李百健，邵京，卢美娟

（江苏九久环境科技有限公司，江苏无锡214036）

乌饭树为杜鹃花科越桔属植物，属常绿灌木，是一种药食兼用的植物[1]。《本草纲目》称之为“墨饭草”，《本草拾遗》称“牛筋”，《本草图经》称为“南烛草”。李时珍曾在《本草纲目》中写道：“南烛树叶气味甘平、无毒、止泻除睡，利肠胃、补骨髓，久服，固精驻颜，轻身明目”[2]。现代科学证实，乌饭树叶中除含有丰富的微量元素和营养物质以外，还含有以黄酮类物质为主的多种功能性成分[3]。

目前国内对乌饭树叶的提取工艺多采用热浸法、酶提法及超临界CO2萃取法等对其进行研究，超临界CO2萃取法的成本和设备要求高，可行性受到限制[4-6]；热浸法加热温度较高，加热时间较长，会导致一些热敏性物质及一些易挥发成分降解损失。超声波是一种弹性机械波，利用超声振动能量，可以改变物质组织结构、状态、功能和加速这些改变的过程。将其运用在固液萃取过程中，则可使细胞周围和细胞内产生环流，从而提高细胞壁和细胞膜的通透性[7-8]，起到强化萃取过程、有利于细胞内有效成分浸出的作用。

传统工艺所得的提取物原料存在色泽暗淡、浑浊，感官性质较差；异味明显；香气流失严重；极易吸潮等缺陷，不仅影响到产品的质量，也会给原料的保藏和运输带来不便。

针对以上存在的问题，本实验利用超声波工艺对乌饭树叶进行提纯，并添加适量环糊精至所得提取液中进行包埋法处理，探讨提取物在物化性质方面的变化，并通过HPLC法检测提取物中总黄酮的含量。

1 材料与方法

1.1 材料与设备

1.1.1 材料

乌饭树干叶、环糊精、纯净水、甲醇（液相）、芦丁标品等。

1.1.2 仪器

THC-206型超声波提取机：济宁天华超声电子仪器有限公司；RE-5205型旋转蒸发器：上海亚荣生化仪器厂；FD-1C-50型真空冷冻干燥机：上海比朗仪器有限公司；安捷伦高效液相1200：北京科益恒达科技有限公司；TG20-WS型台式高速离心机：长沙维尔康湘鹰离心机有限公司；水分测定仪：上海仪田精密仪器有限公司。

1.2 实验方法

1.2.1 超声波提取乌饭树叶工艺

分别量取1 000 mL水溶液于A、B两个蒸馏烧瓶中，各加入100.0 g乌饭树叶原料，于35℃～40℃温度条件下、频率35 kHz超声波仪器中提取30 min后，过滤取上清液，重复二次以上步骤，合并滤液，得到提取液A和提取液B备用。

1.2.2 包埋物质对提取液的后处理

称取20.0 g环糊精溶于收集得到的提取液B中，于35℃水浴中加热搅拌30 min至完全溶解收集上清液备用。

1.2.3 提取液的浓缩与干燥

所得上清液A、B在真空度为0.09 MPa的65℃温度条件下进行减压浓缩，收集浓缩液于冷阱盘管温度-45℃，真空度50 Pa以下的真空冷冻干燥器中进行干燥，分别得到样品A和样品B。

1.2.4 样品的检测

1.2.4.1 水分的测定

准确称取10.0 g待测样品至水分测定仪托盘中，于检测温度105℃下观察刻度盘指针的变化，待指针稳定不变后，读取对应的刻度值，记录样品的水分含量。

1.2.4.2 HPLC检测条件

检测器：紫外检测器；检测波长：348 nm；流动相：水/甲醇；检测时间：45 min；柱温：30℃；色谱柱：Lichrospher C182.1×250 mm；流量：0.9 mL/min；进样量：10 μL；定性方法：芦丁外标法。

2 结果与分析

2.1 包埋法对提取物感官性状的影响

称取1.0 g未经包埋技术处理的超声波提取物A和1.98 g用环糊精包埋处理的超声波提取物B（含乌饭树叶提取物50.7%），分别溶解于20 mL纯净水中制备对照溶液。包埋技术对提取物色泽的影响见图1。

图1 包埋技术对提取物色泽的影响Fig.1 Effect of pack cementation technique on colour and lustre

观察结果（见图1）显示，经包埋技术处理的提取物B溶液色泽清澈、明亮，呈黄褐色；与样品A溶液相比，异味消失，且具有乌饭树叶特殊的淡淡的清香。

2.2 包埋法对提取物吸潮性的影响

样品平铺在平皿中，放置在温度24℃、相对湿度72%的环境中30 min后，称取一定质量样品利用水分测定仪检测其含水量M值。不同时间样品的含水量检测结果见表1。

表1 不同时间样品的含水量Table 1 Water content of the samples in different time

包埋法对提取物吸潮性能的影响效果见图2。

图2 包埋法对提取物吸潮性能的影响效果Fig.2 Effect of pack cementation technique on hygroscopicity

分析结果显示，样品B与样品A相比，在相同湿度相同时间内，其ΔM值较小，这说明了包埋法能极大的改善乌饭树叶提取物易吸潮的缺陷，对原料的保藏具有很大的现实意义。

2.3 高效液相色谱法对乌饭树叶提取物中总黄酮的检测

选取芦丁作为标准品，按照上述所设定的HPLC检测条件采用外标法进行检测，芦丁标品的HPLC图谱及乌饭树叶提取物的HPLC图谱见图3～4。

图3 芦丁标品的HPLC图谱Fig.3 HPLC spectra of rutin

图4 乌饭树叶提取物的HPLC图谱Fig.4 HPLC spectra of Vaccinium bracteatum Thunb

通过对比表明，在相同的分析条件下，样品和芦丁标准品的保留时间相差约0.02 min；通过公式计算得出：样品中总黄酮的含量为0.017 2 mg/mg。

3 讨论与结论

经包埋技术处理的提取物溶液色泽清澈、明亮；与对照品溶液相比，异味消失，且具有乌饭树叶特殊的淡淡的清香；在相同湿度相同时间内，其ΔM值较小，提取物易吸潮的缺陷明显改善；通过芦丁外标法对样品进行HPLC检测，结果显示总黄酮的含量为0.017 2 mg/mg。

[1]王立,姚惠源,陶冠军,等.乌饭树树叶中槲皮素的提取分离和鉴定[J].食品与生物技术学报,2005,24(4):89-91

[2]江苏中医学院.中药大辞典(下册)[M].上海:上海人民出版社,1977:56

[3]王立.乌饭树黑色素中功能成分的研究[D].无锡:江南大学,2005

[4]胡志杰,姜萍,张义生.乌饭树叶色素提取工艺及色索性质再研究[J].中国野生植物资源,2002,22(4):47-48

[5]杜建明,史建慧,张艳芬,等.乌饭树叶色素的提取技术及其稳定性研究[J].食品科学,1992(4):14

[6]杨瑞萄.乌饭树叶营养饮料研制[J].食品研究与开发,1994(1):27-28

[7]宋小妹,崔九成,强军,等.超声法提取纹股蓝总皂甙的工艺研究[J].中成药,1998,20(5):4-5

[8]王昌利.超声提高薯蓣皂甙得率的实验研究[J].中成药,1994,16(4):7-8