活血通窍方提取液抗前列腺增生的实验研究

胡 露，李 鹏，卢海波，沙 皖，郭特鎏，夏子昌，韩 丽

活血通窍方提取液抗前列腺增生的实验研究

胡 露，李 鹏，卢海波，沙 皖，郭特鎏，夏子昌，韩 丽

目的 观察活血通窍方提取液对前列腺增生动物模型的影响。方法 应用丙酸睾丸酮复制小鼠前列腺增生模型，探讨活血通窍方提取液抗前列腺增生的作用；应用去氧肾上腺素注射液致大鼠膀胱内压升高动物模型，探讨活血通窍方提取液对膀胱α肾上腺素能受体的作用。结果 活血通窍方提取液可显著减轻鼠前列腺增生模型的前列腺湿重及其脏器指数，还可显著降低静脉注射去氧肾上腺素前大鼠基础膀胱内压值，同时也可降低静脉注射去氧肾上腺素所致的大鼠膀胱内压升高，减少其膀胱内压的变化值，活血通窍方疗效明显优于复方天益胶囊。结论 活血通窍方提取液治疗前列腺增生症明显优于复方天益胶囊，具有更好的应用前景，作用机理可能与该药抑制前列腺体积增生和拮抗α肾上腺素能受体介导的平滑肌张力增加有关。

活血通窍方；前列腺；增生；动物实验；膀胱内压

活血通窍方是对解放军77156部队医院的院内制剂复方天益胶囊进行剂量配比优化而成的临床协定处方，具有化瘀散结、通利水道之功效，能较快缓解良性前列腺增生症(benign prostatic hyperplasia，BPH)患者的排尿困难症状，长期服用还能缩小前列腺体积，本实验旨在通过动物实验研究，来探讨其治疗前列腺增生的作用机制。

1 材料与方法

1.1 主要试剂与设备 活血通窍方提取液：为棕色浸膏，其中益母草、皂角刺采用水煎煮提取，蜣螂采用乙醇回流提取，合并提取液浓缩成浸膏，1 g浸膏相当于7 g原生药；批号：20121203，由解放军452医院制剂室提供，临用前用蒸馏水稀释成所需浓度的混悬液备用，本实验剂量按原生药g/kg计算；阳性药：复方天益胶囊：0.4 g/粒，解放军77156部队医院院内制剂，批准文号：成制字(2011)F17002，主要成分：益母草、皂角刺等，临用前用蒸馏水稀释成所需浓度的混悬液备用，本实验剂量按原生药g/kg计算；丙酸睾丸酮注射液(1 ml/支，批号为090702，上海通用药业股份有限公司)，临用前用食用油配成所需浓度的油溶液备用；盐酸去氧肾上腺素注射液(1.0 ml/支，批号为100501，上海禾丰制药有限公司)，临用前用生理盐水配成所需浓度的溶液备用。16道生理记录仪(MP150，美国BIOPAC公司)。

1.2 动物 昆明种小鼠：雄性，8 w龄，27～33 g；SD大鼠：雄性，体重为280～350 g，均由成都中医药大学实验动物中心提供(合格证号：川实动管第7号)。

1.3 方法

1.3.1 对小鼠前列腺增生模型的影响[1]取小鼠72只，随机分为活血通窍方高剂量组(5 g/kg)、中剂量组(2.5 g/kg)、低剂量组(1.25 g/kg)，复方天益胶囊组(8.6 g/kg)、空白组和模型组，每组12只，每天灌胃给药1次，连续3 w，空白组和模型组则给以等体积的蒸馏水。同时，除空白组外，其余各组皮下注射丙酸睾丸酮5 mg/kg，1次/d，连续3 w。末次给药后24 h，处死动物，取前列腺称湿重，并计算其脏器指数。

1.3.2 对大鼠膀胱内压升高动物模型的影响[2]取大鼠50只，随机分为活血通窍方高剂量组(3.5 g/kg)、中剂量组(1.75 g/kg)、低剂量组(0.875 g/kg)，复方天益胶囊组(6 g/kg)和模型组，每组10只，每天灌胃给药2次，连续3次。末次给药后30 min，腹腔注射水合氯醛麻醉，仰卧固定，在其耻骨弓上部纵向切开腹部皮肤，暴露膀胱，在膀胱颈上部插入一根细导管，荷包逢扎固定，用导管通过压力换能器与16道生理记录仪连接。测定前先排空膀胱，通过导管向膀胱注入生理盐水0.3 ml/只，稳定10 min后，测定其膀胱内压；然后静脉注射盐酸去氧肾上腺素注射液1.6 mg/kg，观察并记录静脉注射药物后膀胱内压的变化，并计算膀胱内压最大值与基础值的差值。

2 结果

2.1 对小鼠前列腺增生模型的影响 与空白组比较，模型组小鼠在注射丙酸睾丸酮3 w后，其前列腺湿重及其脏器指数均显著增加(P<0.05)，提示模型成功；与模型组比较，活血通窍方高、中剂量组和复方天益胶囊组可显著减轻前列腺湿重及其脏器指数(P<0.05)，提示活血通窍方和复方天益胶囊可对抗丙酸睾丸酮所致的前列腺增生作用，活血通窍方低剂量组疗效不明显；但活血通窍方高、中剂量组疗效优于复方天益胶囊(P<0.05)。见表1。

表1 对丙酸睾丸酮致小鼠前列腺增生模型的影响(n=12)

注：与空白组比较，①P<0.05；与模型组相比，②P<0.05；与复方天益胶囊相比，③P<0.05

2.2 对大鼠膀胱内压升高动物模型的影响 大鼠在静脉注射去氧肾上腺素后，其膀胱内压显著升高。与模型组比较，活血通窍方高、中剂量组可显著降低静脉注射去氧肾上腺素前大鼠的基础膀胱内压值(P<0.05)，同时也可降低静脉注射去氧肾上腺素所致的膀胱内压升高，减少其膀胱内压的变化值，且效果优于复方天益胶囊(P<0.05)，而低剂量组疗效不明显(P>0.05)。提示活血通窍方可显著降低大鼠膀胱内压，这种作用可能与阻断α肾上腺素能受体有关。见表2。

表2 对大鼠膀胱内压升高动物模型的影响(n=10)

注：与模型组比较，①P<0.05；与复方天益胶囊比较，②P<0.05

3 讨论

BPH常见于老年男性，其发病率随年龄增大而增高，据报道，在50岁以上人群BPH患病率为40%～50%，在>80岁人群超过80%[3]。BPH属于中医“癃闭”、“癥积”范畴，发病机理与尿路瘀阻有关。尿路阻塞瘀血败精，或肿块结石，阻塞尿道，小便难以排出。实验研究表明，BPH患者存在微循环障碍和血液流变学异常，其可作为血瘀的客观辨证标准之一[4]。

活血通窍方是对解放军77156部队医院治疗前列腺增生症的院内制剂复方天益胶囊进行剂量配比优化组方，由三味药物(益母草、皂角刺、蜣螂)组成，作为医院协定处方，具有化瘀散结、通利水道之功效。现代医学研究证明，益母草含益母草碱、水苏碱、益母草定、益母草宁等多种生物碱及苯甲酸、氯化钾等。益母草具有抗血小板聚集、降低血液黏滞度，利尿，增强膀胱逼尿肌功能作用[5-8]。药理研究证明，蜣螂乙醇提取物有抗前列腺增生的作用[9]，皂角刺具有抗菌、抗炎、抗病毒、免疫调节、抗凝血和抗肿瘤等作用[10-14]。前列腺增生属于良性肿瘤，现今中药复方治疗BPH的报道多有选用皂角刺，取其散结消肿功效。

引起BPH的病理生理变化主要有两个因素：静力性因素和动力性因素，前者主要是前列腺体积增大压迫尿道，后者主要是前列腺平滑肌张力增高，而前列腺平滑肌的张力增加主要是由α肾上腺素能受体所介导的。本研究结果表明，活血通窍方和复方天益胶囊可显著减轻丙酸睾丸酮小鼠的前列腺湿重及其脏器指数，说明其可对抗丙酸睾丸酮致前列腺增生的作用；活血通窍方可显著降低静脉注射去氧肾上腺素前基础膀胱内压值，同时也可降低静脉注射去氧肾上腺素所致的膀胱内压升高，减少其膀胱内压的变化值，其疗效优于复方天益胶囊，这种作用可能与阻断α肾上腺素能受体的有关。

本实验结果揭示，活血通窍方既可抑制BPH的静力性因素，又可抑制BPH的动力性因素，从而达到治疗BPH的目的，其疗效明显优于复方天益胶囊，值得推广使用。

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Experimental research of anti-prostatic hyperplasia treatment by the extract of Huoxue Tongqiao formula

Hu Lu1,Li Peng1,Lu Haibo1,Sha Wan1,Guo Teliu1,Xia Zichang2,Han Li3

1.Hospital 452 of PLA,Chengdu,Sichuan,610021,China;2.Hospital of Unit 77156 of PLA,Leshan,Sichuan,614000,China;3.School of Pharmacy,Chengdu University of Traditional Chinese Medicine,Chengdu,Sichuan,610000,China

Objective To observe the effects of the Huoxue Tongqiao formula extract on the animal model of prostatic hyperplasia.Methods Testosterone propionate was used to replicate the mouse model of prostatic hyperplasia.The effects of the Huoxue Tongqiao formula extract on anti-prostatic hyperplasia were discussed.The injection with phenylephrine was carried out to make the rat model of high intravesical pressure.The effects of Huoxue Tongqiao formula extract on adrenoceptor in bladder were discussed.Results The extract of Huoxue Tongqiao formula could significantly decrease the humid weight of prostate,its viscera index,the rats' basic intra-bladder pressure before the intravenous injection with phenylephrine,and also the rising of the intravesical pressure caused by the injection.In the aspect of reducing the change values of the intravesical pressure,the Huoxue Tongqiao formula was superior to compound Tianyi capsule.Conclusion The extract of Huoxue Tongqiao formula has superior curative effect on prostate hyperplasia than compound Tianyi capsule and also a better application prospect.Its mechanism may be relevant to its inhibition of prostate volume hyperplasia and the increase of α-adrenoceptor antagonist mediated smooth muscular tension.

Huoxue Tongqiao formula;prostate;hyperplasia;animal experiment;intravesical pressure

610021 成都，解放军452医院(胡 露，李 鹏，卢海波，沙 皖，郭特鎏)；解放军77156部队医院(夏子昌)； 成都中医药大学药学院(韩 丽)

郭特鎏，E-mail：kyguotl@126.com

R 697.32

A

1004-0188(2014)02-0146-04

10.3969/j.issn.1004-0188.2014.02.011

2013-11-08)